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131.
以 RNA一步提取法 ,采用 RT-PCR技术成功地将 Balb/ C小鼠金属硫蛋白 -1 c DNA基因片段克隆于质粒 p UC-1 9上 ,并对克隆片段 c DNA进行核苷酸序列测定 相似文献
132.
根据鸡10型腺病毒以及人2、5、40、41型腺病毒、牛3型、鼠1型腺病毒六邻体蛋白基因序列,选择保守区,设计和合成一对引物,以鸡腺病毒内蒙古分离株基因组DNA为模板,进行聚合酶链反应(PCR)扩增得到预期大小的0.55kbDNA片段.将此DNA片段克隆于pUC19的SmaI位点,筛选重组质粒,进行限制酶切分析和PCR检测,得到含有六邻体蛋白基因片段的重组质粒,为进一步开展此病毒分子生物学研究和分子生物学诊断技术的建立创造了条件 相似文献
133.
建立一种基于单拷贝基因的菌落PCR方法,筛选低能离子束辐射下IS因子插入引起的大肠杆菌lacI基因突变.PCR的优化结果显示,DMSO是一种合适的添加剂,而细胞的裂解方法和过程在菌落PCR中有比较关键的作用.经过测定,该方法的菌落PCR最低菌浓度约为1×105个菌.0.8%琼脂糖凝胶电泳结果显示,96个突变子的菌落PCR的成功率为95%以上.测序结果表明:两个由IS因子插入引起的突变被成功筛选. 相似文献
134.
Strategies for cloning unknown cellular flanking DNA sequences from foreign integrants 总被引:6,自引:0,他引:6
Many virus and transposon DNAs can integrate into the host genome. In this review, techniques, including inverse polymerase
chain reaction (IPCR), novel Alu-PCR and vectorette- or splinkerette-PCR are introduced as possible strategies for cloning
flanking DNA regions of the integrants. Targeted gene-walking PCR, restriction-site PCR, capture PCR, and panhandle PCR and
boomerang DNA amplification are also described. The principles, advantages and limitations of each approach are discussed.
Received 9 July 1998; received after revision 2 October 1998; accepted 7 October 1998 相似文献
135.
用两步PCR法,成功地从石蜡包埋组织DNA中扩增了P^16INXK4exon2片段;并用单链构象多态分析PCR产物的差异。 相似文献
136.
猪瘟是由猪瘟病毒引起的猪的急性、热性、高度接触性传染病,严重危害我国养猪业。尽管中国很早就研制成功了猪瘟兔化弱毒疫苗。但近年来猪瘟的流行和发病特点发生了很大的变化,很多地区和猪场不断出现非典型猪瘟、温和型猪瘟,给该病的诊断带来了困难。近年来,猪瘟病毒分子生物学诊断方法的研究进展迅速,为猪瘟的快速、准确诊断起到了重要的作用。从聚合酶链式反应技术、核酸探针技术、DNA芯片技术等方面对猪瘟病毒的分子生物学诊断方法进行了综述。 相似文献
137.
丙型肝炎病毒核酸疫苗的研究 总被引:1,自引:0,他引:1
从丙型肝炎病人的阳性血清中提取出丙型肝炎病毒RNA,通过RT-PCR的方法获得丙型肝炎病毒C区基因片段。并将此片段克隆到真核细胞表达载体pcDNA3.1(+),得到重组质粒pcDNA-HCV/C,再将其通过肌肉注射免疫BALB/小鼠后,小鼠产生了抗HCV/C区抗体。 相似文献
138.
IntroductionIn recent years,the development of miniaturizedsystems for chemical and biochemical reactions hasrapidly progressed[1] .Most of the microdevices forconducting these reactions are made of silicon orglass using conventional microfabrication methodsused in the microelectronic industry or bymodifying the processing technologies for microelectromechanical systems ( MEMS) . Severalresearch groups have developed polymerase chainreactions ( PCR) chips with various features toperform sim… 相似文献
139.
从PCR放大产物的形成和组成特点入手,推导出基因组特异DNA序列扩增倍数的理论计算公式,即Yn=An(1+X)^n,其中Y表示放大后的DNA片断拷贝数,x表示各反应周期的平均放大效率,n代表循环次数,An为反应周期系数。 相似文献
140.
人rabl3基因克隆和表达 总被引:2,自引:0,他引:2
以人的胚胎cDNA为模板,用PCR方法筛选获得rab13基因,并克隆到真核表达载体pcDNA3和原核表达载体pGEX、pET-15b和pMAL-c2中,把rab13基因转染入牛肾上腺毛细血管内皮细胞(BCE细胞)中,免疫荧光染色显示Rab13定位于BCE细胞胞质内膜性细胞器上,在为rab13基因对膜通道调节功能的进一步研究打下了基础。 相似文献