PCR用于孕牛外周血中胎儿SRY序列检测和奶牛早期胚…

根据文献报道的人、鼠，兔ＳＲＹ同源序列设计引物，从 在因组中扩增出一段牛特异的ＳＲＹ序列，对该序列进行克隆测序后高度出一对雄牛特异的ＰＣＲ引物，利用此引物对奶牛早期胚胎细胞和妊娠晚期母牛外周血ＤＮＡ样品进行ＰＣＲ扩增，经分娩牛犊性别验证，本引物能够准确鉴别孕牛外周血中雄性胎儿的ＳＲＹ序列，并且对早期胚胎性别鉴定的准确率８０％。     

耐热FD DNA多聚酶在PCR中的应用条件

探索了用于多聚酶链式反应(PCR)的FD DNA多聚酶的最适反应条件在100μl的反应液中含有25 mmol/L的Tris-HCl(pH8.0),25 mmol/L的(NH_4)_2SO_4,1.5 mmol/L的MgCl_2,200 μg/ml的明胶,dNTP各200 μmol/L,模板量为3.3×10～(-2)Pg,引物量各为290 nmol/L,1～2 U的耐热FD DNA多聚酶,30次循环反应的系统为通用PCR最适反应系统。应用这一反应系统,混迹于大量DNA分子中的特定DNA片段可借助于琼脂糖凝胶电泳专一性地、快速而有效地检出。     

乳鼠心脏α1肾上腺素受体亚型分析

采用放射配体结合实验和逆转录 聚合酶链式反应 (RT_PCR) ,分析Wistar乳鼠心脏α1 肾上腺素受体 (α1 AR) 3种亚型的分布 .结果显示 :乳鼠心脏上α1_AR 3种亚型的mRNA均有表达 ;α1 AR总数量 (Bmax)为 ( 1 34± 4)fmol/mg蛋白 ,与12 5 IBE2 2 5 4的亲和性 (Kd 值 )为 ( 1 6 4±5 2 )pmol/L .α1 AR亚型选择性拮抗剂RS1 70 5 3,( + )Niguldipine ,5_Methyl urapidil ( 5_MU) ,BMY7378,WB41 0 1均呈浓度依赖性竞争抑制α1 AR与12 5 IBE的特异结合 ,其竞争抑制曲线均呈双位点特性 ,α1A,α1B和α1D分别约占α1 AR总结合位点的 2 5 % ,5 0 %和 2 5 % .     

人骨髓单核细胞表面分化抗原CD14基因的扩增、克隆和鉴定

根据人骨髓单核细胞表面分化抗原ＣＤ１４（ｈＣＤ１４）基因的核苷酸序列，设计ｈＣＤ１４基因５＇端和３＇端的两个引物．以人血中提取的基因组总ＤＮＡ为模板，利用聚合酶链式反应（ＰＣＲ）技术特异性扩增该基因１２４５加的编码序列．扩增产物经Ｘｂａｌ、ＫｐｎⅠ双酶切后，克隆到ｐＵＣ１８质粒ＸｂａＩ－ＫｐｎＩ位点间，随后转化大肠杆菌ＪＭ１０９．用ＰＣＲ方法筛选出重组菌落．经酶切和序列分析方法检测后，证明获得了含ｈＣＤ１４基因的重组克隆ｐＨＣＤ１４．巳测出的插入片段５＇端部分中包含着人ＣＤ１４基因４８８ｂｐ的序列，与巳报道的相应ＤＮＡ序列相比具有９９％的同源性．     

22种丝状异型胞固氮蓝细菌的16S rDNA的 PCR-RFLP 分析

用1对引物CYA106F及781R（a）从23种蓝细菌的DNA中扩增出一条600bp的16SrDNA－PCR片段，对该片段进行的限制性酶切长度多态性（RFLP）分析表明：可将其中21种自生或共生的丝状异型胞固氮蓝细菌的样品分为2个类群组，基本上对应于形态分类上的Anabaena及Nostoc属，但有1种被认为是Anabaena的蓝细菌以及作为对照的1种聚球藻(Synechococcus)蓝细菌样品被明显区分出来，并发现Anabaena属的蓝细菌也可同被子植物根乃拉草（Gunnera）形成共生固氮作用。     

DGGE法检测稻田蓝细菌及硅藻的遗传多态性

运用对蓝细菌和硅藻16SrRNA特异的引物对，将稻田土壤中提取的总DNA进行PCR扩增后，通过DGGE技术对PCR产物进行分析。结果表明，在水稻生长的不同时期，稻田蓝细菌及硅藻种群也在变化，田间不同位置蓝细菌及硅藻种类也有所不同，并且每 一时期都有其优势的蓝细菌及硅藻种群。     

人表皮生长因子（hEGF）基因合成及在枯草杆菌BS9920中分泌表达

采用PCR技术人工合成了一段长约175bp的人表生长因子（hEGF)的基因片段，为了便于克隆，在该片段的5′端设计了Pst I的酶切位点及与pUS186载体signal sequence相连接的碱基部分，在3′端设计了HindⅢ的酶切位点及终止密码子，经DNA分析，合成的片段与已发表的hEGF在序列上完全一致，之后将其克隆至枯草杆菌分泌型质粒载体pUS186上，构建重组载体pUSE并转化一株枯草杆菌突变菌株BS9920感受态细胞，以PCR法快速筛选重组菌落，RIA检测结果表明BS9920阳性转化子能够表达和分泌hEGF。     

生物芯片的发展及应用

本文通过研究生物芯片的发展历史、类型、应用以及所依赖的技术，探讨了生物芯片的发展前景，尤其是在法医领域的应用前景。     

免疫PCR的方法学研究进展及临床应用

详细介绍了免疫PCR方法的原理、方法学类型、实验条件控制及临床应用.