粘膜佐剂霍乱毒素B亚单位的克隆与表达

目的 :构建表达粘膜佐剂霍乱毒素B亚单位 (CTB)基因的重组质粒 ,并在大肠杆菌中表达获得基因重组蛋白。方法 :用PCR方法从霍乱弧菌中扩增CTB片段 ,将其转入原核载体质粒pET-32a( ) ,在大肠杆菌Top10克隆 ,并在BL21中表达。结果 :重组质粒PET-CTB的全长序列经分析与基因文库公布的一致 ;表达蛋白经SDS-PAGE分析 ,相对分子量与文献相符 ;重组蛋白竟Westernblot检测有抗原性。结论 :基因重组菌表达的CTB蛋白可能作为有效、安全的粘膜佐剂用于口服疫苗的研制     

糖尿病防治研究新进展

哈佛医学院的研究通过游活成年动物体内的干细胞使Ⅰ型糖尿病发生逆转。研究将移植体的胰岛细胞和完全性弗洛得佐剂(一种能够诱导肿留坏死因子-2并杂死那些破坏胰岛分泌的细胞的试剂)移植剂非肥胖糖尿病的小鼠体内，经过40天抑制了自身免疫并恢复了内原的胰岛功能。这项实验使75％的老鼠的血糖达到正常水平，     

鱼类特异性免疫受控多样性的研究进展

免疫防治在鱼病防治过程的免疫效果受多因素控制。本从疫苗、免疫途径、鱼体、环境等4个方面介绍了免疫受控的研究进展。疫苗种类、灭活方法、佐剂类型、疫苗剂量、免疫途径、温度、污染、鱼体健康状况等是影响鱼体免疫效果的主要因素。     

鸭传染性浆膜炎灭活疫苗保存期试验

选用白油佐剂、蜂胶佐剂和鸭疫里默氏杆菌(Riemerella anatipestifer,RA)灭活菌液制成RA油乳剂灭活疫苗和蜂胶灭活疫苗,分别保存3个月、5个月、6个月、7个月、8个月、9个月,免疫雏鸭,探讨不同佐剂和保存期对免疫效果的影响。结果表明:2种佐剂疫苗均有保护力,但油乳剂灭活疫苗免疫效果比蜂胶灭活疫苗好,其保护率可达100%。疫苗保存期试验证明,油乳剂灭活疫苗在4°C冰箱可保存9个月以上。     

鸡补体因子C3d对禽流感病毒M2蛋白免疫应答反应的增强作用

M2蛋白是禽流感病毒中具有交叉保护性的结构蛋白，但其抗原性差，难以诱导高水平的免疫反应.分别将一个鸡补体因子C3d，2个C3d基因同禽流感sM2基因（缺失跨膜区的M2基因）以柔性肽链Linker串联连接，构建了4个重组质粒并在大肠杆菌中表达出4种带有谷胱苷肽硫转移酶（GST）的融合蛋白：GST-C3d-sM2，GST-C3d-L2-sM2，GST-C3d-L1-C3d-sM2，GST-C3d-L1-C3d-L2-sM2.将纯化后的4个融合蛋白及对照GST-sM2蛋白免疫BALB/c鼠4次（每组10只），结果在三免后，4个融合蛋白免疫的BALB/c鼠体内抗sM2抗体滴度与对照组相比均差异显著（p<0.05），并且GST-C3d-L1-C3d-L2-sM2组的抗体滴度最高.另外，分别构建重组质粒pcDNA-sM2和pcDNA-C3d-L1-C3d-L2-sM2，然后以这两种DNA疫苗与蛋白GST-C3d-L1-C3d-L2-sM2和GST-sM2同时接种14日龄SPF鸡3次（每组15只）.结果表明，蛋白GST-C3d-L1-C3d-L2-sM2 和对照组GST-sM2的抗sM2抗体滴度差异明显（p<0.01），而pcDNA-C3d-L1-C3d-L2-sM2平均sM2抗体滴度也明显高于对照组pcDNAsM2（p<0.05）.分别以脂多糖（LPS）和刀豆蛋白（ConA）作为致裂原对SPF鸡的外周血淋巴细胞进行淋巴细胞转化试验 （MTT法）.结果以LPS刺激的淋巴细胞的增殖程度在融合蛋白GST-C3d1-L1-C3d2-L2-sM2免疫组与对照组GST-sM2之间以及pcDNA-C3d-L1-C3d-L2-sM2免疫组与对照组pcDNA-sM2之间均差异极显著（p<0.01），而Con A刺激的淋巴细胞各组之间则无显著差异.所有这些结果证实，鸡补体因子C3d无论是在原核系统表达的融合蛋白，还是插入DNA疫苗中均可以增强禽流感病毒M2蛋白引起的免疫应答反应.     

甘油-3-磷酸对甲肝疫苗诱导的体液免疫影响*

目的 研究甘油-3-磷酸对甲肝疫苗诱导的小鼠体液免疫应答的影响。方法 选取49只雌性ICR小鼠,分7组,每组7只,这7组小鼠分别为阴性对照、单纯抗原组、铝佐剂组和4组甘油-3-磷酸组,分别在免疫之后的第4、8、12、16、20周用酶联免疫法(ELISA)测定小鼠血清中的特异性的anti-HAV IgG水平。结果 在小鼠免疫之后的第4、8、12、16、20周单纯抗原组、铝佐剂组和4组不同剂量甘油-3-磷酸组均能检测到特异性抗HAV抗体,并且趋势为先升高后降低,且在免疫后的第8周最高;第4周和第8周的甘油-3-磷酸实验组的结果均高于单纯抗原组,且差异均具有统计学意义(P<0.05),并且第4周甘油-3-磷酸组抗体水平均超过铝佐剂组,并具有统计学意义(P<0.05),其中甘油-3-磷酸2 mg为最佳剂量组,其抗体水平在免疫后的第4、8、12、16、20周均高于单纯抗原组,且在第8周抗体水平达到峰值,抗HAV IgG水平为lg(3.064±0.07851),铝佐剂的也是在第8周抗体水平达到峰值,抗HAV IgG水平为lg(3.150 ±0.1382)。结论 甘油-3-磷酸有免疫佐剂的作用,能够有效、迅速地增强HAV诱导的体液免疫应答,是一种潜在、安全有效的新型疫苗佐剂。