禽流感病毒H5N1血凝素基因和神经氨酸酶基因在真核酵母菌中的表达

目的克隆、表达和鉴定禽流感病毒H5N1血凝素基因（hemagglutinin,HA）和神经氨酸酶基因（neuramidinase,NA）序列,为制备抗体和基因工程疫苗打下基础。方法在成功克隆禽流感病毒H5N1全长HA、NA基因并测序的基础上,将部分基因序列克隆到表达载体pMET A上,构建了重组表达质粒pMET A/HA（49～1 587 bp）、pMET A/NA（121～1 200 bp）,电转化真核酵母菌pMAD16,甲醇诱导表达,利用Ni2＋亲和层析柱对重组蛋白进行纯化,并用Western Blotting和ELISA方法检测其抗原性。结果重组蛋白在酵母菌中可以高效表达,SDS-PAGE显示蛋白表达后形成了二聚体,蛋白纯度占总蛋白的95%以上,ELISA和Western Blotting实验证实,重组蛋白具有良好的抗原性。结论本研究成功克隆和表达了禽流感病毒H5N1 HA、NA基因序列,为禽流感病毒H5N1诊断试剂和疫苗的开发等进一步的研究提供了依据。     

NMR中InS体系的交叉极化和各向同性混合

常规的积算符法不能获得自旋为１／２ＩｎＳ（ｎ≥２）体系的密度算符在交叉极化和各向同性混合过程随时间演化的解析解。作者提出用投影算符法解决此问题，并以Ｉ２Ｓ体系的交叉极化过程为列分析了获得无相位畸变和强度失真ＮＭＲ谱的方法。     

Aberrant expression of nuclear matrix proteins during HMBA-induced differentiation of gastric cancer cells

AIM: To investigate the aberrant expression of nuclear matrix proteins in human gastric cancer cells before and after hexamethylene bisacetamide (HMBA) treatment.METHODS: Proteomics analysis of differential nuclear matrix proteins was performed by two dimensional electrophoresis polyacrylamide gel electrophoresis and matrix-assisted laser desorption/ionization time-of-flight mass spectrometry.The expression levels of three nuclear matrix proteins were further confirmed by Western blotting and their location...     

Subcellular localization of the stripe disease-specific protein encoded by rice stripe virus (RSV) in its vector, the small brown planthopper,Laodelphax striatellus

The stripe disease-specific protein (SP) encoded by the rice stripe virus (RSV) was successfully used as a localization signal of the virus in its vector, the small brown lanthopper,Laodelphax striatellus Fallen. Immunogold particles in large numbers were detected in various parts of the viruliferous females: the ovum, surface of chorion, the midgut lumen, and the columnar cells. Whereas there was none of these particles in the non-viruliferous females and males, and testis of viruliferous males. Endosymbionts (mycetocytes) were abundant, harboring ovaries of both viruliferous and non-viruliferous females, but none in the testis of males. The results provided us with the direct proof that RSV is a ciruculative and propagative plant virus and it was transovarially transmitted alongside with endosymbionts of its vector. Therefore, we deem it a nice lead for future studies on the mechanism of RSV transmission and functioning of its viral proteins.     

反向线性探针杂交技术检测慢性乙型肝炎病毒拉米夫定耐药研究

目的:建立起简单、快速、灵敏、准确的慢性乙型肝炎病毒拉米夫定耐药位点的反向线性探针(reverse line probe,RLP)检测方法.方法:根据HBV野生及耐药基因序列设计通用探针、3'、5'对称加有poly-C的特异性探针和5'标记生物素的扩增引物.将探针线性固定在硝酸纤维膜上,使HBV PCR扩增产物与探针进行杂交.通过优化杂交条件,建立RLP检测方法.利用该方法对重庆地区86个慢性乙肝病人进行检测,同时与直接测序结果比较.结果:半巢式PCR可对103拷贝/ml的血清样本进行有效特异扩增,新建的RLP检测方法可对PCR扩增产物在1 ng/ml以上,或血清样本中突变型DNA占野生型DNA比例为5％以上的均可有效检测,86例临床的检测灵敏度为100％,野生型和耐药型的检测准确性分别为98.09％(103/105)、100％ (43/43),与直接测序法比,RLP检测野生与耐药混合型准确性更好.结论:反向线性探针杂交检测方法检测HBV拉米夫定耐药位点方便、灵敏、准确,是HBV拉米夫定治疗有效的监控工具,该方法适合临床应用.     

昆虫病毒对脊椎动物性细胞的致突变性研究

应用显性致死试验方法来检测3种昆虫病毒(EpNPV、DtGV、DpCPV)对哺乳动物性细胞的致灾变性,以期全面评价3种昆虫病毒的“潜在性危害”.研究结果表明,EpNPV、DtGV、DpCPV对雄性小白鼠的生殖细胞无致突变作用,故不产生遗传性危害。     

核Drell-Yan过程和混合重标度模型

利用混合重标度模型计算铁核与氘核的Ｄｒｅｌ－Ｙａｎ截面比随ｘＦ的变化，计算结果与实验符合较好     

侵染加工番茄的BBWV2的分子鉴定及田间检测

利用蚕豆病毒属的兼并引物对23个加工番茄病株进行RT—PCR检测,其中19株检测出被该属病毒侵染。从中选取4个病株的RTPCR产物进行克隆和测序,将所得序列经过基因库检索发现,4个序列均与蚕豆萎蔫病毒2（BBWV2）基因组RNA1的序列同源性最高。然后对病毒分离物XJ14-1基因组进行进一步的克隆和测序,获得RNA1组分3659个核苷酸,RNA2组分1300个核苷酸,序列比对结果显示,它们与BBWV2的RNAl和RNA2具有高的序列同源性,分别为76．6％～94％和76．9％～94．1％,而与BBWVl的RNA1和RNA2的序列相似性都很低。因此分子鉴定结果表明,新疆加工番茄受到BBWV2的侵染。利用BBWV2的单克隆抗体对田间不同品种（品系）加工番茄病株进行ELISA检测,结果显示田间病株带毒率达到53．3％,并且供试20品种（品系）均可被BBWV2侵染,该数据表明,BBWV2在田间发生普遍。     

抵御蠕虫攻击的一种方法-Honeypot系统

Internet大面积遭受蠕虫攻击的事件时有发生，针对这种问题，引入Honeypot技术，结合入侵检测系统(IDS)、数据挖掘提出了一种解决办法：将Honeypot置于DMZ中，利用其欺骗地址空间技术覆盖服务器中没有用到的IP地址，捕获蠕虫；IDS监控流入网络的数据包，对入侵作出反映；系统日志异地保存。该系统能有效抵御目前已经出现的蠕虫攻击，同时对新出现的目前未知的蠕虫攻击也有很好的防御效果。     

核共振吸收的计算机模拟研究

根据原子核从激发态退激发到基态发射γ射线的能量分布遵从洛仑兹分布，原子核对γ射线的无反冲共振吸收截面的能量分布亦遵从洛仑兹分布理论，用蒙特卡罗方法产生服从洛仑兹分布的随机数，对核共振吸收现象进行了计算机模拟研究