Programmed cell death in Laminaria japonica (Phaeophyta) tissues infected with alginic acid decomposing bacterium

TdT-mediated dUTP-biotin nick end labeling (TUNEL) is a sensitive and valid method for detecting DNA cleavage in programmed cell death (PCD). Using this method, DNA cleavage was observed in Laminaria japonica sporophytic tissues, which were infected with alginic acid decomposing bacterium. It was found that DNA cleavage occurred 5 min after the infection, the fragments with 3′-OH groups of cleaved nuclear DNA increased with time of infection and spread from the infection site. Although no typical DNA ladder (200 bp/180 bp) was detected by routine agarose gel electrophoresis, the cleavage of nuclear DNA fragments of 97～48.5 kb could be detected by pulsed field gel electrophoresis (PFGE). By using CaspGLOWTM fluorescein active caspase-3 staining method, caspase-3 activity has been detected in response to the infection of alginic acid decomposing bacterium. Our results are similar to the observations in hypersensitive response (HR) of higher plant, suggesting that the rapid cell death of L. Japonica infected by alginic acid decomposing bacterium might be involved in PCD, and indicating that the occurrence of PCD is an active defense process against the pathogen's infection.     

绞股蓝与乌蔹莓的比较形态学研究

对绞股蓝与乌蔹莓进行了形态特征的比较，同时指出了它们在生境、形态等方面容易混淆的原因。     

紫萁孢子萌发与孢子体形成进程的调控

用紫萁孢子粉，在试验苗床上进行孢子体幼苗培育过程中，运用优良培养基质、塑料小拱棚保温，初期分别用2、4—D、GA350mg／L喷施，原叶体与幼苗形成阶段用1‰磷酸二氢钾浇施以及对基质水分、棚内的相对湿度、温度、光照的监测等措施依发育阶段而进行调控，结果表明：紫萁孢子粉3g／m^2，可出孢子体幼苗3000株以上，同时加速了孢子萌发、原叶体形成以及孢子体幼苗形成的进程．     

日本黄姑鱼人工育苗技术的初步研究

从国外引进日本黄姑鱼受精卵约1.2×106粒,孵出仔鱼约99.6×104尾,在水温18.0～23.5℃、盐度29.9～23.4、溶解氧6.5～7.9mg/L的条件下,历时40d,共培育出平均全长2.2～4.0cm的幼鱼约50.03×104尾,育苗成活率达41.7%。     

九孔鲍摄食海带的能量收支研究

在室内水族箱投喂新鲜海带养殖九孔鲍(Haliotis diversicolor aquatiliis)．实验结果表明，个体耗氧率在夜晚高，白天低，最高是在17：30～2l：30．摄食能(C)中，只有少部分(2.60％)的能量用于软体部和壳的生长，而很大一部分能量(52．86％)是在代谢能(R)中，排泄能(U)、排粪能(F)、粘液(M)和壳能(Pah)分别占摄食能的9．69％、12．33％、6．61％和0.26％，鲍能量收支方程为：100％(C)=12．33％(F) 5286(R)％ 9．69％(U) 6．61％(M) 2.33％(Pg) 0．26％(Pah) 15．90％。     

海带凝集素的分离及性质研究

海带 (Laminariajaponica)经TBS缓冲液粗抽提 ,然后进行硫酸铵分级实验 ,测定盐析范围为 70 %硫酸铵饱和度 ,经 70 %硫酸铵饱和度分级后 ,海带凝集素 (LJL)纯化倍数为 9,总活力回收为 410 % ,LJL粗抽提液糖含量为12 .94% .该凝集素不被已测试的D 果糖、葡萄糖、γ 球蛋白所抑制 ,但被卵清蛋白抑制     

东亚三角涡虫肌球蛋白轻链（MLC）融合蛋白原核表达载体的构建及其在大肠杆菌中的表达

构建了涡虫肌球蛋白轻链融合蛋白原核表达载体,并进行表达,根据涡虫基因文库中肌球蛋白轻链（Mlc）基因完整的ORF序列设计合成特异性51物,通过PCR扩增涡虫Mlc基因,并插入到融合蛋白原核表达载体PET-28a中,转化宿主菌B121（DE3）细胞．0．4mMol／L的IPTG诱导表达MLc蛋白．重组质粒测序和酶切结果显示Mlc基因已正确插入PET-28a中,重组蛋白经SDS—PAGE在18．2KD处有一条明显的蛋白表达条带。western blot检测得到同样大小的条带。结果表明,涡虫His-MLC融合蛋白已成功表达。     

紫萁黄酮类化合物的提取条件研究

在60℃条件下,分别采用水、不同浓度的醇和丙酮提取紫萁中黄酮类化合物,通过比较提取液中黄酮的含量,得出最佳提取方法是丙酮法。对丙酮法设计正交实验,得出最佳条件。考虑乙醇法和丙酮法黄酮得率差异不大,且乙醇成本低、易操作,比丙酮安全,故对乙醇提取法亦做正交实验。结果表明：丙酮法的最佳条件：丙酮浓度为50%、固液比1：120、水浴温度70℃;乙醇法的最佳条件：水浴温度90℃、乙醇浓度为50%、固液比1：120。