黄色短杆菌中谷氨酸脱氢酶的分离纯化及特性

经硫酸铵盐析、DEAE-纤维素层析、苯-琼脂糖CL-4B(Phenyl-SepharoseOL-4B)层析和交联葡聚糖G-200(Sephadex G-200)层析等步骤从谷氨酸产生菌——黄色短杆菌中分离纯化的谷氨酸脱氢酶,酶活提高了230倍。该酶的分子量约为30万,由六个分子量约为5万的亚基组成,最适pH为8.9,并对热较稳定。在pH8.2时,以谷氨酸和NADP+为底物时的米氏常数值分别为0.294mol/L和0.1mmol/L。     

莠去津对中华绒螯蟹精子LDH、ACP活性的影响

为了评估莠去津对雄性中华绒螯蟹的生殖毒性,以成熟雄性中华绒螯蟹为材料,采用莠去津梯度(0.001、0.01、0.1、1 mg/L)暴露方式进行体内染毒2周,通过分光光度法和聚丙烯酰胺凝胶电泳酶谱法,分析中华绒螯蟹精子中乳酸脱氢酶(LDH)和酸性磷酸酶(ACP)的活性,比较其催化能力的变化.结果显示,0.1 mg/L莠去津处理组精子的LDH、ACP比活力是所有组别中最高的,且显著高于对照组(P<0.05);1 mg/L的次之,但同2个低质量浓度组(0.001、0.01 mg/L)的一样,均较对照组差异不显著(P>0.05).凝胶电泳后活性染色分析结果显示2种酶的催化能力的变化与分光光度法结果一致.实验结果表明,一定质量浓度的莠去津对雄性中华绒螯蟹具生殖毒性,可为莠去津对人类生殖健康的影响提供参考数据.     

NADP-异柠檬酸脱氢酶的结构与功能

异柠檬酸脱氢酶(isocitrate dehydrogenase,IDH)在三羧酸(TCA)循环中催化异柠檬酸生成α-酮戊二酸,将NAD 或NADP 还原成NADH或NADPH.根据空间结构特点,NADP-依赖性IDH可分为同源二聚体IDH和单体IDH,它们对生物体的能量代谢、生物合成以及抗氧化胁迫起重要作用.当碳源贫乏时,NADP-依赖性IDH的可逆磷酸化对TCA循环和乙醛酸旁路碳通量(carbon flux)的分配起关键性调控作用.因此目前IDH是研究蛋白质的结构与功能关系、酶的催化与调节机制、蛋白质功能进化的最好模型之一.     

米根霉L-乳酸脱氢酶基因的克隆及在大肠杆菌中的表达

文章以米根霉基因组DNA为模板,根据已公布的米根酶L-乳酸脱氢酶基因(ldnL)序列设计引物,PCR扩增得到含有ldnL的DNA片段;PCR产物T/A克隆后再双酶切,将ldnL片段连接到大肠杆菌表达载体pET17b,得到重组表达质粒pET17b-ldnL;pET17b-ldnL转化大肠杆菌BL21(DE3),摇瓶培养诱导表达后的菌体经SDS-PAGE电泳分析,结果表明克隆的ldnL基因在大肠杆菌中实现表达。     

移植瘤株冷冻保护的实验研究

本文介绍了人肝癌细胞析细胞及其移植瘤组织经冻存，复苏后检测琥珀酸脱氢酶（ＳＤＥ）活性，成瘤率和电镜检查，选择１０％ＤＭＳＯ或１０％甘油作为冷冻保护剂来冻存细胞，它们先在冰箱里缓慢降温冷却（－０．８℃／ｍｉｎ），后在液氮罐口的液氮气中冷冻（－１０℃／ｍｉｎ）１天，最后置入液氮内，冷并保护后的冻存或组织复苏后显示高的ＳＤＥ活性，１０％ＤＭＳＯ冻存的细胞ＳＤＥ活性比１０％甘油者高，两者相比有显著差别（Ｐ     

野生植物火棘抗疲劳的功效研究

通过对游泳小鼠肌糖原，肝糖原、血清乳酸脱氢酶（LDH）活力，血乳酸和血清中尿素氮（SUN）含量的测定，分析火棘对小鼠的抗疲劳效应，结果表明：经火棘饲养一定时间的小鼠，其肌糖原、肝糖原，乳酸脱氢酶活力均比对照组显著增加，运动后血乳酸水平和血清中尿素氮增量显著低于对照组，运动后血乳酸清除速率比对照组显著升高，提示火棘能增强机体对运动负荷的适应能力，抵抗疲劳的产生和加速疲劳的消除。     

脲引起反相胶束酵母醇脱氢酶的紫外与荧光变化

比较了ＡＯＴ－异辛烷及水相两种体系中脲引起的酵母醇脱氢酶（ＹＡＤＨ）紫外和荧光变化。在水相反应系统中随着脲浓度增加（至３．０ｍｏｌ／Ｌ），酶活性迅速下降并全部失活，构象发生重大改变，２２０ｎｍ处的紫外吸收增加，荧光强度减小，３３６ｎｍ处的荧光峰红移１２ｎｍ至３４８ｎｍ，在Ｒ＝１５的反相胶束体系中，酶浓度相同时ＹＡＤＨ活力相当于水相ＹＡＤＨ的６３％左右，但脲浓度增至３．０ｍｏｌ／Ｌ时ＹＡＤＨ的活力基本无变化，２４０ｎｍ和２７０ｎｍ处的紫外吸收峰、３５７ｎｍ处的荧光发射峰均随着脲浓度的增加有所升高。上述结果表明脲对两种体系中ＹＡＤＨ的分子构象和活力的影响是不同的     

大足蝠八种组织乳酸脱氢酶（LDH）同工酶比较研究

本文用聚丙烯酰胺不连续凝胶盘电泳,对大足蝠8种组织的LDH同工酶进行了报道。大足蝠心肌、肾、脑、血清、睾丸、胸肌、大腿肌组织的LDH同工酶的5条主带,以H亚基的活性最高,肝组织的5条主带以M亚基的活性最高。值得注意的是,在血清的谱带中,在LDH_3和LDH_4之间,出现了一条额外的LDH_e带,在心肌、肝LDH中,还分别出现了一条向阳极泳动比LDH_1还快的带,暂称为LDH_0带。     

青鱼■和三角鲂不同亚科之间的杂交研究——Ⅱ、青鱼(?)、三角鲂(?)及其子一代乳酸脱氢酶同工酶的比较研究

本文是从生化遗传学的角度来研究青鱼■与三角鲂■杂交所产生的子一代中存在两种性状个体的机理。用聚丙烯酰胺凝胶盘状电泳和CS_(910)双波长扫描仪,研究青鱼、三角鲂及其子一代七种组织的乳酸脱氢酶(LDH)同工酶谱。实验表明:青鱼、三角鲂及其子一代各组织的LDH同工酶存在着组织的特异性,亲本之间LDH同工酶谱存在着很大的差异,为两种不同的谱型;子一代中具有母本青鱼性状的青鱼型个体,其LDH同工酶谱型与母本青鱼基本相同;而子一代兼有父母双亲性状的中间型个体,其LDH同工酶谱比青鱼型个体明显增加,类似父本。根据以往细胞遗传学、形态解剖学(拟另文发表)以及本实验的研究,可以断定具有中间型特征的鱼是真正的杂种,其LDH同工酶父本呈显性,而与母本青鱼相似的青鱼型鱼,可能是由青鱼卵子行雌核发育而来。     

Transketolase and 2-oxoglutarate dehydrogenase activities in the brain and liver of the developing rat

Summary Rat brain transketolase showed little change in activity from birth to adulthood, whereas the liver enzyme activity increased in a biphasic way. In both brain and liver, 2-oxoglutarate dehydrogenase activity increased gradually after birth and reached a plateau at 5 weeks of age. A developmental change in thiamin content in the brain was similar to the change in the 2-oxoglutarate dehydrogenase activity, but this was not the case in the liver.