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231.
按大肠杆菌高表达序列设计的入干扰素α—2b基因的化学合成和克隆 总被引:1,自引:0,他引:1
根据大肠杆菌高表达序列重新设计了人干扰素α—2b基因编码区的核苷酸序列,应用化学合成的方法合成了多个互补DNA片段,经互补片段分别退火和连接后,将完整编码区分两段分别克隆于pUC19质粒中,进行DNA序列分析,分别选取序列完全正确的两种克隆片段进行重组,获得了与设计序列完全一致的含有完整编码区的人干扰素α—2b基因。 相似文献
232.
根据巴氏杆菌基因序列设计合成一对引物,以临床分离的动物源性巴氏杆菌抗链霉素耐药菌株为模板,通过PCR技术,扩增出StrA基因350-1153bp序列.PCR产物及表达载体通过粘端连接,将长约804bp的StrA目的基因片段克隆到pGEM—T载体上,构建了克隆载体质粒pGEM—TstrA.StrA基因片段测序结果与文献报道的结果同源性为99.8%.只有一个碱基发生突变,但所编码的氨基酸没有改变. 相似文献
233.
王显金 《四川大学学报(自然科学版)》2004,41(2):268-270
证明了在强拟凸域上,它的拓扑边界上的连续函数代数的K1-群同构于边界上的Toeplitz代数的K1-群与Z的直和。并进一步证明了在复平面C上,任意区域的拓扑边界上的连续函数代数的K1-群与它边界上的同伦群同构. 相似文献
234.
235.
水稻RSSG8基因启动子与GUS融合基因的构建及在烟草中的瞬间表达 总被引:1,自引:0,他引:1
使用染色体步移(Genome walking)法,从籼稻(Oryza sativa subsp.indica)桂朝2号基因组中克隆到长度为471bp的水稻精细胞优势表达基因RSSG8的启动子片段R8PN,并进行了全序列测定和分析.该段序列中含有3个CAAT-box,6个Gobox和多种植物顺式作用元件,但没有发现典型的TATA-box,推测为一种特殊的启动子结构,为了鉴定RSSG8基因的基本启动子元件,将二条长度不同的5’端侧翼区缺失体(分别长471bp,260bp)定向插入载体pBI121中,取代原有的CaMV 35S启动子,构了驱动报告基因GUS的植物表达载体pRGUS1,pRGUS2,通过农杆菌介导的瞬时表达法转化烟草叶片和花粉,快速鉴定启动子片段中起关键作用的区域,结果显示两个缺失片段都能启动GUS的表达,可以初步判定这两个片段具有启动子功能。 相似文献
236.
本论文采用分子检测(PCR扩增、PCR-Southern杂交)与表型检测(接真菌实验、酶活力测定)相结合的手段,对花粉管通道法及载体法导入几丁质酶基因烟草后代的遗传表现进行研究。结果证明通过不同方法导入受体细胞基因组中的外源基因均能遗传给后代,并能在转化受体当代及后代中高效表达。但采用花粉管通道法导入的外源基因虽然能够遗传给后代,但分离比复杂,遗传规律性较差。而载体法导入的外源基因T1代x^2检测符合3:1的遗传分离比,遗传稳定性要好于DNA直接导入。因此,建立良好的遗传转化系统是外源基因稳定遗传和表达的前提。 相似文献
237.
常规PCR与RACE结合法快速从cDNA文库中克隆基因 总被引:1,自引:0,他引:1
首先根据Fe(Ⅱ)-转运蛋白基因家族的保守区设计同源的常规PCR引物(F1,R1),扩增出490bp的特异片段。然后根据RACE法原理,巧妙地设计3′RACE(F2)和5′RACE(R3)特异性引物,使两者既能分别与文库载体上的筛选扩增引物配对扩增cDNA 3′和5′末端序列,又能使扩增出的3′RACE和5′RACE产物序列有重叠部分;另外设计引物时还兼顾到使F2和R3也能配对,从而能对3′RACE和5′RACE扩增产物进行双特异性引物常规PCR鉴定。该方案不但能够直接根据序列鉴定3′RACE和5′RACE产物是否为同一基因序列,还能快捷地用常规PCR鉴定3′RACE和5′RACE扩增产物是否为特异性扩增,避免了对非特异性扩增产物的克隆测序等繁琐的鉴定过程,优化了基因克隆策略。最后根据拼读出的全长序列设计引物(F4,R4)扩增出完整编码区。应用该方法成功地从小金海棠缺铁处理的根系cDNA文库中克隆了Fe(Ⅱ)-转运蛋白基因的cDNA。说明该方案是一种从cDNA文库中克隆目的基因的快捷优化方法。 相似文献
238.
彭燕玲 《上海师范大学学报(自然科学版)》2004,33(4):9-11
证明在K4-同胚图K4(2,2,3,δ,ε,η)这一类图簇中,任何两个不同构的图之间不存在色等价关系.这一结论从色多项式的角度刻划了K4-同胚图K4(2,2,3,δ,ε,η)的结构特征,为研究K4-同胚图K4(α,β,γ,δ,ε,η)的色唯一性奠定了基础. 相似文献
239.
以中华根瘤菌(Sinorhizobium morelense)SS—ori总DNA为模板,用PCR法扩增D-海因酶基因,分别克隆到5种不同的载体,并转入5种不同的Escherichia coli菌株,获得25株工程菌,进行培养与诱导表达.细胞经超声处理后,通过SDS—PAGE和酶活性两种指标比较表达产物.结果表明,除3株工程菌具有D-海因酶活性外,其它均为无酶活性的不溶性包涵体,包涵体经变性、复性后,可部分获得有活性的D-海因酶,其比活为0.90U/mg,复性率约为20%.此外,对包涵体产生的原因及可能解决办法也进行了讨论. 相似文献
240.
刘证 《鞍山科技大学学报》2004,27(6):406-407
给出Banach空间成为K一致光滑空间的一个新的更一般化的定量形式的充分条件,推广了文献[1]中的主要结果。 相似文献