Thermal ablation versus conventional regional hyperthermia has greater anti-tumor activity against melanoma in mice by upregulating CD4~+ cells and enhancing IL-2 secretion

To determine whether conventional hyperthermia (42-45℃) or ablation therapy (＞50℃) achieves better synergistic effects on direct cytotoxicity and anti-tumor immunity,we compared the therapeutic effects of two hyperthermia temperatures,43 and 55℃,in terms of cytotoxicity and upregulation of immune functions in a mouse malignant melanoma model.Melanoma-bearing mice were treated by directly applying regional hyperthermia to the tumor nodule with a heating light at a temperature of 43℃ for 30 min or 55℃ for 10 min.The tumor growth curve and mice survival rate were observed.To investigate the hyperthermia-induced immunological response,peripheral blood CD4~+ and CD8~+ T cells and the serum IL-2 level were determined.Our results indicated that application of regional hyperthermia at the ablation temperature (such as 55℃) achieved better synergistic anti-tumor effects than did conventional hyperthermia (43℃).Significant increases in the number of peripheral blood CD4~+ T cells and the serum IL-2 level likely contributed to the underlying mechanism.     

实验小鼠念珠状链杆菌和鼠痘病毒混合感染的诊断

经细菌分离,生化鉴定,血清学试验,尸体解剖及病理学检查,发现一起由念珠状链杆菌和鼠痘病毒混合感染而导致引起的实验小鼠发病死亡。     

利用CRISPR-Cas9 构建syncytinA 条件敲除小鼠

摘要: 目的构建syncytinA( 合胞素A) 条件敲除小鼠,为进一步研究syncytinA 在胎盘形成过程中发挥的融合及非融合作用及研究子痫前期病理模型提供基础。方法在用ES 细胞打靶完成syncytinA 外显子上游loxp 同源重组基础上,利用CRISPR-Cas9 得到syncytinA-loxp 小鼠。构建syncytinA-loxp 转基因载体及sgRNA,通过原核显微注射方法将构建好的doner、Cas9 及sgRNA 一并注射到C57 小鼠受精卵中,并移植入同期受孕代孕受体ICR 输卵管中获得子代小鼠。用PCR 方法检测子代鼠尾基因型, loxp 阳性小鼠与WT 交配获得syncytinA-loxp 小鼠。为了检测syncytinA-loxp 能否被敲除,通过与prime1cre 及zp3cre 交配获得syncytinA － / － ,PCR 及q-PCR 检测syncytinA 是否被敲掉。结果经PCR 及q-PCR 方法检测,我们成功得到syncytinA － / － 胚胎。结论syncytinA 条件敲除小鼠构建成功,为更好的研究它在胎盘及子痫前期中的功能提供了基础。     

小鼠视神经再生研究动物模型的建立

目的总结制作小鼠视神经完全截断性动物模型作为视神经再生研究的经验和体会。方法将雄性Bcl-2高表达转基因小鼠(Bcl-2 transgenic mice)和受GFAP启动子控制表达疱疹病毒-胸苷激酶转基因雌性小鼠(GFAP-TK)交配产生的4只8~12周成年小鼠(20~30g),Bcl-2/GFAP-TK双转基因小鼠作为实验组,同周龄4只Bcl-2转基因小鼠作为对照组。其中Bcl-2/GFAP-TK双转基因小鼠皮下植入缓释泵,连续7d释放更昔洛韦(GCV)100mg.kg-1.d-1以选择性地去除视神经损伤后激活的星形胶质细胞。更昔洛韦缓释泵植入术后2d在两组动物中制作右侧单眼标准完全性视神经钳夹损伤模型,视神经钳夹10d后获取组织标本。采用免疫荧光染色特异性检测再生轴突纤维并进行定量分析;结合罗丹明的霍乱毒素B亚单位(CTB-R)或增强表达绿色荧光蛋白的复制缺陷型腺相关病毒(AAV-EGFP)用作顺行性标记物以显示再生轴突是否到达大脑靶器官。结果在Bcl-2/GFAP-TK双转基因小鼠中存在免疫荧光阳性的再生视神经轴突,再生轴突计数为71.99±24.04,并可见生长锥(growth cone)样结构,但是再生轴突纤维未能延伸达到大脑靶器官。在对照组Bcl-2转基因小鼠中未见明显再生迹象。结论小鼠视神经完全截断性动物模型可用于视神经病变的再生研究。     

KM小鼠剖腹产手术中福利保障对仔鼠的影响

目的评估KM小鼠剖腹产手术中动物福利保障方案。方法通过在KM小鼠剖腹产手术中采用A、B两组不同动物福利保障方案,观察其对剖产仔鼠只数、10 d存活率、离乳体质量和离乳率的影响。结果 B组较A组仔鼠体质量增大,10 d存活率和离乳率显著提高。结论剖腹产手术中的动物福利保障,可提高仔鼠体质量增长速度、仔鼠存活率和离乳率。     

血小板生成素Ⅱ体内生物活性研究

目的：探讨血小板生成素受体的两种新配体－－血小板生成素Ⅱ（TPOⅡ）在体内的生物学活性。方法：以Babl/c纯系小鼠为实验对象，通过腹腔连续7d分组注射提纯的TPOⅡ配体Ⅰ、人工合成的TPOⅡ配体Ⅱ及重组的人血小板生成素，并于第7d末测定小鼠外周血小板数量，分析TPOⅡ体内的生物学活性。结果：在实验第7d，TPOⅡ配体Ⅰ实验组小鼠外周血小板数明显高于同期阴性对照组（P＜0.05），与rhTPO阳性对照组相弱则无明显差异（P＞0.05）；第14d，TPOⅡ的两个实验组的血小板数均较同期阴性对照组明显升高（P＜0.01）；与阳性对照组相比亦无明显差异（P＞0.05）。而且随实验时间的延长，TPOⅡ实验组及阳性对照组血小板数均呈升高趋势。结论：提纯的TPOⅡ配体Ⅰ促进小鼠外周血小板的产生，其升高血小板的能力与rhT-PO无明显差别。     

胡桃楸树皮抗肿瘤有效成分对H22荷瘤小鼠T细胞亚群的影响

 为测定胡桃楸树皮提取物(HT)抗肿瘤有效成分对H₂₂荷瘤小鼠T细胞亚群的影响,将昆明小鼠随机分为HT高剂量组、HT低剂量组、阳性药环磷酰胺组、模型组和正常组,采用接种法复制H₂₂肿瘤移植模型。利用荧光标记抗体-流式细胞术检测HT对建立的H₂₂荷瘤小鼠模型外周血中CD4⁺/CD8⁺细胞亚群比值变化; ELISA法检测CD4⁺细胞所分泌细胞因子IL-4和IFN-γ的含量,以测定Th1/Th2细胞亚群比例。结果显示,与阳性药注射用环磷酰胺(CTX)相比,HT高、低剂量组能显著降低机体CD8⁺亚群比例(P<0.01),HT低剂量组可明显提高CD4⁺/CD8⁺比值(P<0.05)。HT高、低剂量组的IL-4含量显著低于阳性药CTX组(P<0.001),明显低于模型组(P<0.05)。HT高剂量组的IFN-γ/IL-4水平明显高于阳性药CTX组(P<0.05)。研究表明,胡桃楸树皮提取物具有明显的抑瘤作用,能保护胸腺和脾脏,能减轻荷瘤机体的T细胞免疫功能的损伤。     

碘硒对氟致小鼠肾脏细胞线粒体损伤的影响

为探讨碘硒对氟致小鼠肾脏细胞线粒体损伤的影响，用JEM－1200EX透射电镜观察了摄入含高氟但碘量不同、硒量一定的小鼠肾脏细胞线粒体的形态学变化。结果表明：高氟组、高碘高氟组小鼠肾脏细胞线粒体膜系统损伤；低碘高氟组、中碘高氟组、高碘高氟加硒组小鼠肾脏细胞线粒体膜系统几乎完好。结果提示，一定量的碘对氟致小鼠肾脏细胞线粒体损伤有拮抗作用，但碘量过高则有协同毒性作用；一定量的硒对高碘高氟所致小鼠肾脏细胞线粒体损伤也有拮抗作用。     

不同最佳频率的下丘神经元的声反应特性和方位敏感性

在自由声场刺激条件下 ,从 2 0只昆明小鼠 (Kunming Mus Musculus)下丘 (Inferior Col-liculus,IC)记录到 1 93个神经元 .将这些神经元按其最佳频率 (best frequency,BF) (k Hz)分为(5 ,1 0 ],(1 0 ,1 5 ],(1 5 ,2 0 ]和 (2 0 ,3 1 ]4个频率段 ,观察和分析它们的声反应特性 ,并用最小阈值(minimum threshold,MT)和放电率 (firing rate)标准对这些神经元前听空间俯仰方位(Elevation) 0平面的 7个水平方位 (Azimuth)角 (同侧 90°、60°、3 0°,0°,对侧 3 0°、60°、90°)的敏感性进行了研究 .结果表明 :1、IC神经元的放电率和潜伏期基本随刺激强度的增加而增加和缩短 ,其函数表现为三种基本不同的形式 :单调型、非单调型以及放电率函数的不规则型和潜伏期函数的饱和单调型 .非单调函数神经元数目高于单调函数神经元 .三种函数形式的神经元数目分布与 BF之间无明显相关 ;2、BF较高的 IC神经元的潜伏期与 BF较低的神经元的潜伏期之间未发现显著性差异 ;3、用低 MT和最大放电率指标检测 IC神经元的方位特性发现 ,在神经元的最敏感角度展现出低 MT和高放电率 ,虽然最佳敏感角度的分布随频率段而不同 ,但绝大部分神经元的最敏感角度位于对侧 ,其中以对侧 60°所占比例最大 .用低 MT指标所确定的最佳敏感角度