Chromosome microdissection by laser microbeam, chromosomal fragment isolation and amplificationin vitro in barley (Hordeum vulgare L.)

A method for microdissection, isolation and amplification of plant chromosomal fragments using laser microbeam and a glass microneedle was established. Firstly, 7H chromosome of barley (Hordeum vulgare L.) was dissected by Nd: YAG laserbeam with suitable parameters and the fragment comprising a satellite was isolated with a glass microneedle which was fixed on a micromanipulator. Then, the chromosomal fragment DNA was amplified by LA_PCR (linker adaptor PCR) for two rounds. The size of the DNA fragments of PCR products varied from 500-3 000 bp and the PCR products originated from the genome of barley were verified by Southern hybridization. Compared with previous reports, there are some advantages in this research. The performance is easier, the dissection is more precise and the cost is low. It also permits efficient amplification with only one single chromosome fragment. Laser microbeam_glass microneedle method may be useful in the microdissection of special chromosome regions, especially in plants with middle or small chromosomes.     

盐胁迫短芒大麦甜菜碱醛脱氢酶基因片段的克隆与序列分析

以2％NaCl诱导3－6天的短芒大麦叶片为材料，用TRIzol试剂提取总RNA后，反转录合成cDNA，用PCR扩增得到的600bp片段，将所得序列与GenBank上已登录的序列进行同源性比较，发现它与大麦等作物的BADH基因同源性很高，并存在醛脱氢酶的保守十肽区，从而证明短芒大麦的耐盐性与小分子渗透物质的积累有关。     

SO2衍生物对大麦幼苗生理和遗传的影响

以大麦为材料，研究了二氧化硫（SO2）体内衍生物NaHSO3-Na2SO3混合液（1：3，mmol／L）对大麦幼苗叶片叶绿素含量、叶片和根系过氧化物酶（POD）活性，及对根尖细胞姊妹染色单体交换（SCE）的影响．研究结果表明：一定浓度的NaHSO3-Na2SO3混合液对大麦叶片叶绿素含量、根尖细胞SCE频率、叶片和根系细胞POD活性有明显影响，且呈浓度和时间效应；对大麦根尖SCE及POD增值的诱导在时间上具有一致性.     

氯化镍对绿豆和大麦核仁结构损伤的研究

应用植物A g-NOR技术,研究了不同浓度的N i2 对绿豆和大麦根细胞核仁结构的影响.结果表明:N i2 对绿豆和大麦根细胞核仁均有明显的毒害效应,用50 m g.L-1~150 m g.L-1N i2 处理绿豆和大麦根尖24 h~27 h后,细胞核仁结构发生解体,形成许多数量不等的微核仁颗粒,并从细胞核进入细胞质中,随着N i2 浓度的增加和处理时间的延长,其异常核仁的细胞比例逐渐增加.N i2 对大麦根细胞核仁的损伤效应大于绿豆.     

黄化型大麦的系列研究 Ⅳ南黄大麦的小孢子发育

本文首次报导南黄大麦小孢子母细胞的减数分裂基本正常,但有少数细胞出现落后染色体、微核等。四分孢子基本正常,小孢子较少,但能育,其原因与南黄大麦叶黄化带来的营养不良有关。     

应用RAPD技术对新疆布顿大麦遗传多样性的研究

利用RAPD分子标记，通过40条10碱基随机引流，对32份新疆布顿大麦进行了遗传多样性评价。在40个10碱基随机引物中，有22个引物（占55％）的扩增产物具有多态性，每条多态性引物能产生1－7条多态性DNA带纹。40个引物共扩增227条带，其中95条（占41．9％）具有多态性，平均每条引物能产生1．7条多态性DNA带纹。基于RAPD技术计算了32份布屯大麦间的遗传相似系数（GS）变化值为0．427－0．848，平均值为0．681，利用不完全加权算术平均数（UPGMA），采用1－GS矩阵对其进行遗传聚类，结果表明，RAPD标记将32份参试材料区分为3类（或亚类），来源于新疆北部的20份材料有17份材料（占85％）聚入Ib亚类，而第Ia亚类则主要来自于新疆中部的一些材料。研究表明，RAPD标记揭示的新疆布顿大麦间的遗传多样性与其地理来源紧密相关。     

镉对姐妹染色单体交换的影响

以大麦为材料，应用姐妹染色单体分染（ＳＣＤ）技术检测氯化镉溶液对ＤＮＡ的损伤，发现即使镉浓度较低时实验组的姐妹染色单体交换（ＳＣＥ）频率仍显著高于对照。氯化镉溶液处理还影响大麦幼苗的生长分裂，实验组的主胚根及侧根长度、苗高、根系体积均比对照组低，且随着镉浓度的提高抑制效应增强。当镉浓度提高时，大麦胚乳淀粉酶活力及根尖细胞有丝分裂指数均呈下降趋势。因此，镉对生物体的毒害是多方面的，用ＳＣＥ实验能灵敏地检测环境中的有害镉     

大麦籽粒醇溶蛋白组分的基因型和环境变异及其与β-淀粉酶活性的关系

选用7个二棱大麦品种,种植在生态条件差异很大的3个地区,测定和分析了以上大麦籽粒的蛋白质含量、醇溶蛋白组分含量及β-淀粉酶活性,分析了这些性状的基因型和环境变异之间的相关性。结果表明:这些性状在试点间、品种间差异显著,且试点和品种的互作效应显著;B醇溶蛋白和C醇溶蛋白的基因型效应要比环境效应影响大,而蛋白质含量、D醇溶蛋白和β-淀粉酶活性的环境效应要比基因型效应的影响大。相关分析表明:籽粒蛋白质含量与B醇溶蛋白含量、C醇溶蛋白含量与β-淀粉酶活性呈显著正相关;B醇溶蛋白含量和C醇溶蛋白含量均与β-淀粉酶活性呈显著正相关。     

西藏野生大麦醇溶蛋白的遗传多样性

作者利用A-PAGE(Acid-polyacrylamide gel electrophoresis)法研究了来自中国西藏的野生二棱大麦、野生瓶形大麦和野生六棱大麦共106份材料在3个醇溶蛋白位点的遗传多样性．结果表明，所有供试材料在Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ组醇溶蛋白位点分别发现了26、14和22种等位变异类型，平均等位变异数大小顺序为：野生二棱大麦，野生瓶形大麦，野生六棱大麦．这些等位变异类型的频率在这3组野生大麦间的分布存在显著或极显著差异．野生二棱大麦平均遗传多样性程度极显著地高于野生六棱大麦，这3组大麦间存在明显的遗传分化．最后，讨论了栽培大麦的起源中心及中国栽培大麦的起源与进化问题．本研究结果表明，野生二棱大麦是栽培大麦的祖先，支持了栽培大麦起源的“二棱大麦单系发生论”．