抗体制备技术平台

目前,单克隆抗体主要以进口为主,价格昂贵.且许多单抗没有商品,必须自己制备.单克隆抗体制备具有周期长、费用高、经验性强等特点,使许多实验室望而却步.     

温度对拟南芥STN7激酶表达及LHCⅡ蛋白磷酸化的影响

拟南芥STN7蛋白激酶参与了LHCⅡ蛋白的磷酸化和状态转换过程. 本研究根据STN7激酶的蛋白序列, 合成了一段含11个氨基酸的亲水肽段, 与牛血清蛋白BSA偶联后, 免疫家兔制备得到合成多肽的抗体, 免疫双扩散和Western blot检测表明该多肽抗体效价和特异性较高. 借助该多肽抗体、磷酸化抗体和低温(77 K)荧光, 研究了温度对拟南芥LHCⅡ蛋白的磷酸化、状态转换和STN7激酶表达的影响. 结果表明, 温度不仅调节LHCⅡ蛋白的磷酸化水平, 而且还调节STN7激酶的表达水平. 另外, LHCⅡ蛋白的磷酸化随温度的变化趋势与STN7激酶表达量的变化趋势相对一致, 并且与状态转换密切相关, 为LHCⅡ蛋白磷酸化及STN7激酶表达调控机理研究提供了有用的信息.     

多肽药物的研究进展

功能肽目前已经越来越广泛地应用于临床诊断和治疗中。本文分7个大类介绍了多肽类药物的主要研究内容、现状和发展方向,并简要介绍了多肽药物的非注射给药途径的研究成果。多肽类药物的主要特点是用量小、生物活性强。通过生物表达和化学合成方法制备出的多肽类药物将在疫苗、抗菌、抗肿瘤、诊断用药等领域发挥出积极而重要的作用。     

戊二醛交联固定血红蛋白对水中NO2-吸附性能的研究

报道了戊二醛交联法固定血红蛋白(hemoglobin,Hb)吸附水中NO2-的方法,并考察了浓度、温度、pH值、吸附时间及干扰离子对其吸附率的影响,确定了吸附的最佳条件:3 mg/LHCl活化处理2h,温度25℃,pH 6.5,吸附时间5h,此时吸附率达90%以上.用抗坏血酸作洗脱剂,经洗脱处理后可使固定化血红蛋白反复使用十次左右仍可使吸附率保持在90%以上.在动态吸附实验中,我们以0.5mL/min的流速分别将四种废水过柱处理,均有较好的效果,尤其是被NO2-污染了的饮用水.血红蛋白和洗脱剂抗坏血酸均对     

环肽的分析方法与研究

环肽是一种较线性多肽更为稳定的具有多种生理功能和医药价值的环状多肽,在形成荷尔蒙、抗生素、离子载体系统、抗真菌素、癌制剂以及毒素等方面展现出丰富多样的生物活性,具有重大的应用价值。近年来随着生物技术以及生物学与化学领域的交叉发展,不断有新的环肽被分离并鉴定出来。本文综述了自然界存在的一些环肽及环肽的分离纯化、分析方法,并且对环肽的生物合成机制和化学合成进行了概述。     

燕麦多肽数据库及降血糖活性的虚拟筛选

为了深入研究燕麦多肽中可能发挥降血糖功能的活性多肽分子，本文首先从文献中调研了从燕麦中提取鉴定得到的多肽，构建了对应的燕麦多肽数据库，并基于DPP4蛋白对多肽数据库进行了虚拟筛选.随后，针对筛选获得的6个多肽分别进行了100 ns的分子动力学模拟.从模拟之后稳定结合的构象分析了不同多肽分子与DPP4的相互作用信息，并分别计算了不同多肽分子与DPP4的结合自由能.结果表明，从燕麦多肽数据库中筛选得到的多肽可以与DPP4蛋白稳定结合，其中2个多肽分子与DPP4的亲和力相对较强.本文得到的多肽分子可以作为后续DPP4抑制剂设计和改造的先导分子，燕麦多肽数据库也可用于研究燕麦的其他生物学功能.     

美洲大蠊多肽和顺铂联用对HepG2细胞凋亡及自噬的影响

采用MTT法检测美洲大蠊多肽（PAP-3）与不同浓度的顺铂（DDP）单用或联合使用对人肝癌HepG2细胞增殖的影响；采用流式细胞术检测PAP-3、DDP单独或联合给药干预对HepG2细胞凋亡的影响；Western Blot检测PAP-3、DDP单独或联合给药后HepG2细胞内自噬相关蛋白p62、LC3、Beclin-1、Atg5及PI3K的表达。实验结果显示，与DDP单独给药相比，PAP-3与DDP联合给药对HepG2的细胞的抑制作用更强；PAP-3与DDP联合给药组中细胞的凋亡率与DDP和PAP-3单独给药组相比均有升高（P ＜ 0.05)。与对照组相比，DDP组中，p62蛋白水平降低，LC3II蛋白水平升高，LC3II/I的比例也升高，表现出细胞自噬流的活化；与DDP组相比，联合给药组中p62蛋白水平回升，LC3II蛋白水平和LC3II/I的比例均有回落。且联合给药组中PI3K、Atg5、Beclin-1等自噬相关蛋白的量均较DDP组减少，而凋亡相关的Caspase-3蛋白的表达量则较DDP组增加。据此推测，PAP-3和DDP的联用可以通过抑制HepG2细胞自噬相关蛋白的表达水平，抑制DDP带来的细胞自噬水平的升高，增加细胞对DDP的敏感性，从而诱导HepG2细胞凋亡。