宫颈上皮内肿瘤及宫颈鳞状细胞癌组织中HPV16感染与hTERT,P21wafl和Ki67表达关系的分析

为了探讨宫颈鳞状细胞癌(SCC)及宫颈上皮内肿瘤(CIN)组织中人乳头瘤病毒(HPV)16感染及端粒酶反转录蛋白(hTERT)、抑癌基因P21wafl和增生抗原Ki67表达的关系及其意义,在130例正常宫颈组织及宫颈上皮内瘤样病变和宫颈鳞状细胞癌组织中,利用组织芯片技术,结合原位杂交技术,检测HPV16感染及结合免疫组织化学技术检测hTERT,Ki67,P21wafl的表达.结果表明:1)CINⅡ级、CINⅢ级、原位癌、浸润性鳞癌组织HPV16杂交信号阳性率显著高于正常宫颈组织(P均＜0.05),浸润性鳞癌HPV16阳性率也显著高于CIN(χ2=5.670,P=0.017).2)hTERT在CINⅡ级、CINⅢ级、原位癌、浸润性鳞癌组织中的表达都显著高于正常宫颈组织(P均＜0.05),浸涧性鳞癌hTERT表达率也显著高于原位癌及CIN(χ2=18.870,P=0.000;χ2=66.390,P=0.000).CIN三级之间相比差异也具显著统计学意义(χ2=30.468,P=0.000).3)P21wafl在浸润性鳞癌组织中的阳性率显著低于正常宫颈组织(P＜0.05),但与CIN相比差异无显著统计学意义(P＞0.05).CIN三级之间P21wafl表达差异也无显著统计学意义(P＞0.05).4)随着宫颈病变组织学严重程度的增加,Ki67表达逐渐增加(P＜0.05).5)HPV16感染率与hTERT表达之间呈正相关(P＜0.05,r=0.339),与P21wafl表达之间呈负相关(P＜0.05,r=-0.337),与Ki67表达无相关性(P＞0.05):hTERT与P21wafl之间呈负相关(P＜0.05,r=-0.248),与Ki67表达呈正相关(P＜0.05,r=0.398);P21wafl与Ki67表达呈负相关(P＜0.05,r=-0.446).可见:在宫颈上皮内肿瘤及宫颈鳞状细胞癌组织中,hTERT,P21wafl,Ki67表达改变可能与HPV16感染有关,且几者之间互相作用,共同影响CIN的发展及宫颈鳞癌的发生.这些指标综合分析可能为阐明HPV16的恶性转化机制以及为提高宫颈鳞癌及其癌前病变诊断率提供参考依据.组织芯片技术是高效的研究基因及其表达产物的技术平台.     

甘肃地区女性宫颈HPV感染的现状研究

目的:了解甘肃地区女性人乳头瘤病毒(HPV)感染的基因亚型、年龄及地区分布等.方法:采用凯普医用核酸分子快速导流杂交基因芯片技术,对7318名兰州女性进行生殖道21种HPV感染基因亚型筛查.结果:甘肃地区女性HPV感染率为19.9%(1 452/7 318),其中高危型HPV感染率14.78%(1 082/7 318),低危型HPV感染率3.38%(247/7 318),高危型中HPV16为主要致病亚型,占28.59%(415/1 452),低危型中HPV6占6.30%(98/1 452).1452例感染HPV的标本中,单一感染1 188例,占81.82%(1 188/1 452),多重感染264例,占18.18%(264/1 452).按年龄分组中≥50岁组HPV感染率最高,占24.24%.按地区分析,陇南地区HPV感染率最高,达到30.97%(83/268).结论:甘肃地区为宫颈癌高发区,其中HPV16是感染最多的型别,对该地区女性进行子宫颈癌的筛查和防治已成为当务之急.     

宫颈HPV感染与宫颈瘤样病变的相关性

为了研究湘西地区妇女宫颈人乳头瘤病毒（HPV）感染与宫颈瘤样病变的相关性,为宫颈癌的早期预防提供科学参考,选取692例湘西籍患者为研究对象,所有患者均行宫颈HPV检测,以其中HPV检查结果阳性的234例患者作为观察组,阴性的234例患者作为对照组,均在阴道镜监视下进行宫颈多点活检及宫颈管搔刮病理学检查,病理检测结果分为癌前病变（CINⅠ,Ⅱ,Ⅲ）、宫颈癌、慢性宫颈炎.结果显示：湘西地区女性中HPV感染以HPV16（25.64%）类型最多,其余依次为HPV52,HPV51,HPV58,HPV18,HPV53为常见;CIN的加重程度随HPV感染率升高,CINⅠ,Ⅱ,Ⅲ两两比较差异具有统计意义;HPV阳性率为33.81%,HR-HPV（+）31.74%,其中单一感染HR-HPV（+）21.97%,双重或多重感染11.99%,LR-HPV（+）感染1.88%.说明在宫颈癌的筛查中高危HPV检查具有临床价值,多途径切断高危HPV感染对本地区妇女宫颈癌的一级预防具有重要意义.     

宫颈癌中CALCA基因甲基化与HPV16-E7致癌蛋白表达的依存关系

 选择HPV16 阳性宫颈癌细胞和RNAi 技术,研究CALCA 基因甲基化与HPV16-E7 致癌蛋白表达的依存关系。构建慢病毒siRNA 重组表达载体,建立稳定表达HPV16-E7-siRNA 的RNAi 细胞模型。以SiHa 细胞和RNAi 细胞模型的基因组DNA 为对象,选择CALCA 基因启动子区富含CpG 岛屿的目标片段,使用亚硫酸氢盐测序法（bisulfite sequencing PCR,BSP）筛查分析,研究RNAi 抑制HPV16-E 7 表达后,CALCA 基因甲基化状态的可逆性程度。选出CALCA 基因启动子区富含CpG 位点的目标片段,其大小为365 bp,含有19 个CpG 岛屿,发现其中13 个CpG 位点的胞嘧啶在SiHa 细胞基因组DNA 中发生了甲基化（13/19）,而在表达HPV16-E7-siRNA 的RNAi 细胞模型中,所有CpG 位点的甲基化已发生逆转（0/19 位点）。本研究从细胞水平证明了宫颈癌细胞内的CALCA 基因启动子高甲基化对HPV16-E7 致癌蛋白表达有依赖性,为进一步研究E7 蛋白的作用及致癌机制奠定了重要的物质基础。     

HPV病毒及其疫苗的研究进展

人乳头瘤病毒（HPV）是引起宫颈癌的主要病因,HPV疫苗的研制成为近年来研究热点.主要对HPV病毒的结构、HPV疫苗不同类型及其优缺点进行综述,最后针对目前HPV疫苗面临的安全、有效、成本等问题提出展望.     

海口地区人乳头瘤病毒感染的分子流行病学研究

利用PCR扩增和Southen杂交技术,对海口地区人乳头瘤病毒（HPV）型别进行了调查,结果显示,在所抽取的1045份样本中,有436份检出HPV-DNA,总阳性率为41．72％（436／1045）,其中有337份只检出1种型别感染（单侵染）,65份检出2种型别感染（二重侵染）,34份检出3种或3种以上型别感染（三重或三重以上侵染）,分别占感染样本的77．29％,14．91％和7．80％;在单侵染中,高危型所占比例为74．78％（252／337）,不同型别的检出率从高到低分别是HPV16（22．25％）,HPV58（17．89％）,HPV43（16．74％）,HPV52（16．06）和HPV6（8．94％）．其中HPV16,HPV58和HPV43为高危型,其检出率较高,具有一定的区域性．     

采用反向PCR技术优化适合毕赤酵母表达的截短型HPV58型L1基因

目的:探讨利用反向聚合酶链反应(反向PCR)技术根据毕赤酵母偏爱密码子优化截短型人乳头瘤病毒58型(HPV58)L1基因的研究.方法:设计PCR引物扩增截短型HPV58L1目的基因,将其克隆入毕赤酵母分泌表达载体pPICZαC;测序并对目的基因进行序列分析;根据毕赤酵母偏爱密码子利用反向PCR技术设计引物对目的基因进行扩增.结果:扩增了截短型HPV58L1基因并将其克隆入毕赤酵母分泌表达载体pPICZαC中;根据毕赤酵母偏爱密码子优化了截短型HPV58L1基因.结论:成功构建经密码子优化截短型HPV58L1基因的毕赤酵母分泌表达载体pPICZαC-HPV58L1.     

HLA DRB1＊1501和DQB1＊0602与新疆维吾尔、汉族HPV感染及宫颈癌发生的相关性

探讨HLADRB1＊1501和DQB1＊0602与新疆维吾尔、汉族妇女HPV感染及宫颈癌发生的相关性。PCR-SSP和PCR检测287例浸润性宫颈癌（维族192例,汉族95例）及297例正常宫颈组织（维族203例,汉族94例）中DRB1＊1501和HLADQB1＊0602的分布频率和HPV16DNA。维族HPV16阳性NILM组中DRB1＊1501基因频率高于HPV16阴性NILM组（OR,2．222;95％CI,1．107—4．461;P=0．023）,差异有统计学意义;在维族ISCC组及HPV16阳性ISCC组中DQB1＊0602基因频率均低于对照组（OR,0．484;95％CI,0．324～0．722;P=0．000;OR,0．552;95％CI,0．360～0．845;P=0．006）,差异有统计学意义;汉族ISCC组中DRBl。1501等位基因及DRB1＊1501～DQB1＊0602单体型均低于对照组（分别为OR,0．305;95％CI,0．115～0．813;P=0．013和OR,0．274;95％CI,0．086—0．874;P=0．021）,差异有统计学意义。携带DRB1＊1501等位基因为新疆维族妇女HPV16易感基因。DQB1＊0602基因可能是新疆维族妇女宫颈癌的保护基因,而DRB1＊1501基因及DRB1＊1501～DQB1＊0602单体型则可能是新疆汉族妇女宫颈癌的保护基因。     

1， 4-双［2-(3， 4， 5-三甲氧基苯基)乙烯基］苯异构体的分离和色谱测定

研究了 1,4 -双 [2 - ( 3,4 ,5-三甲氧基苯基 )乙烯基 ]苯合成产物中的三种异构体的柱色谱分离方法 ,用硅胶为固定相 ,乙酸乙酯和环己烷混合液为流动相 ,分离产物所达纯度分别为顺 -顺式 97% ,顺 -反式 96% ,反 -反式 99% .另外 ,还进行了HPV异构体的HTGC或HPLC的定性和定量测定法研究     

病毒与人类健康——2008年诺贝尔生理学或医学奖简介

2008年10月6日,诺贝尔生理学或医学奖授予了德国科学家哈拉尔德•楚尔•豪森、法国科学家弗朗索瓦丝•巴尔-西诺西和吕克•蒙塔尼,以表彰他们对揭示病毒感染在肿瘤、传染病等人类重大疾病中的致病机制所做出的突出贡献。本文将就病毒感染与人类健康的密切关系做一简要介绍。