Ethanol impairs Rho GTPase signaling and differentiation of cerebellar granule neurons in a rodent model of fetal alcohol syndrome

Developmental exposure to ethanol impairs fetal brain development and causes fetal alcohol syndrome. Although the cerebellum is one of the most alcohol-sensitive brain areas, signaling mechanisms underlying the deleterious effects of ethanol on developing cerebellar granule neurons (CGNs) are largely unknown. Here we describe the effects of in vivo ethanol exposure on neurite formation in CGNs and on the activation of Rho GTPases (RhoA and Rac1), regulators of neurite formation. Exposure of 7-day-old rat pups to ethanol for 3 h moderately increased blood alcohol concentration (BAC) (∼40 mM) and inhibited neurite formation and Rac1 activation in CGNs. Longer exposure to ethanol for 5 h resulted in higher BAC (∼80 mM), induced apoptosis, inhibited Rac1, and activated RhoA. Studies demonstrated a regulatory role of Rho GTPases in differentiation of cerebellar neurons, and indicated that ethanol-associated impairment of Rho GTPase signaling might contribute to brain defects observed in fetal alcohol syndrome. Received 16 July 2006; received after revision 12 September 2006; accepted 13 October 2006     

慢病毒介导的CBS基因过表达对原代皮质神经元β淀粉样蛋白分泌的影响

目的通过过表达手段上调胱硫醚β-合成酶(Cystathionine-β-synthase,CBS)在原代神经元细胞中的表达,观察其对原代神经元β淀粉样蛋白(Aβ)分泌的影响。方法使用过表达CBS慢病毒载体感染体外培养的原代皮质神经元,设定为慢病毒介导阳性(CBS)组、另设阴性对照慢病毒感染(NC)组、未经慢病毒感染(CON)组。采用实时荧光定量PCR检测CBS基因mRNA的表达,Western blot检测CBS蛋白的表达,采用Elisa检测Aβ40的表达水平。结果使用过表达CBS的慢病毒载体感染体外培养的神经元,实时荧光定量PCR检测其mRNA的表达上调明显升高,与NC组和CON组相比差异有统计学意义(P0.01),Western blot结果显示蛋白表达升高与定量PCR一致,Elisa检测感染72小时后CBS组、NC组、CON组Aβ40的分泌分别为(182.19±24.52)ng/L、(411.90±12.43)ng/L、(390.41±54.53)ng/L,CBS组与NC组和CON组相比差异有统计学意义(P0.05)。结论慢病毒介导的CBS基因过表达可降低原代皮质神经元Aβ40的分泌。     

Rho激酶影响大鼠海马神经元突起生长的实时成像

目的:观察Rho激酶对大鼠海马神经元突起生长的影响.方法:体外培养新生大鼠海马神经元5 d后,连续动态观察溶血性磷脂酸(lysophosphatidic acid,LPA)及Rho激酶抑制剂Y-27632对神经元突起生长的影响.结果:对照组神经元一级突起迅速生长、延伸,不断发分支,形成丰富的二级、三级突起;用LPA处理后,神经元大部分突起进行性塌陷,一级突起逐渐缩短并且变细,二级、三级突起数量减少,且较细小;而预先用Y-27632处理后再加LPA,细胞突起塌陷的现象减少,神经元的突起不断分支、延伸,一级、二级、三级突起数量较LPA组增多且长度也增加.结论:Rho激酶参与LPA诱导海马神经元突起回缩的过程,抑制Rho激酶的活性可抑制LPA诱导的突起回缩.     

野木瓜注射液对小鼠皮层神经细胞的抗氧化保护作用

研究了野木瓜注射液(IS)对小鼠大脑皮层神经细胞氧化损伤的保护作用.在细胞培养液中加入100μmol/L H2O2和不同浓度IS,培养数日后通过观察细胞的形态变化,检测细胞外液LDH的活力,胞内超氧化物歧化酶(SOD)的活性,测定细胞活性来观测IS对氧化受损神经细胞的保护作用,并通过脱氧核糖法对IS的羟自由基(.OH)清除率进行测定.结果表明:浓度在25～300 mg/L,IS均能抑制神经细胞的氧化损伤,神经细胞SOD酶活力上升,细胞外液LDH活力降低,浓度为100 mg/L时效果最显著.与阳性对照甘露醇相比,IS有较高的.OH清除率.IS有较高的抗氧化能力,能有效抑制H2O2导致的皮层神经细胞的损伤.     

地黄饮子含药脑脊液对海马神经元损伤的影响

探讨地黄饮子对β-淀粉样蛋白(Aβ25-35)诱导体外原代培养海马神元损伤的保护作用．把离体培养的海马神经元分为6组：空白对照组、模型组、、VE组、中药低剂量组、中药中剂量组和中药高剂量组,分别测定细胞培养液中乳酸脱氢酶(LDH)含量和MTT自动比色微量分析,观察中药地黄饮子脑脊液对受损神经元的影响．表明中药地黄饮子脑脊液能明显降低Aβ25-35诱导的海马神经元细胞培养液中LDH含量,提高细胞生存活力．地黄饮子有效成分能穿透血脑屏障,对抗Aβ25-35诱导的海马神经元损伤,表现出对海马神经元一定的保护作用．     

大鼠海马锥体神经元外向电流特征分析

利用全细胞膜片钳技术研究了大鼠海马锥体神经元去极化激活的外向电流的特征.结果表明,短时去极化至-60mV以上电位可引发快速上升的外向电流,之后缓慢衰减至一平台.当保持电位改变时,该峰电流与平台电流的幅度均会发生变化,但前者较后者变化显著.试验中测得峰电流与平台电流的逆转电位分别为-(76.1±5.97)mV和-(83.6±4.13)mV,与用Nerst方程计算出的本试验细胞外液与电极内液的钾离子平衡电位Ek=-88mV接近,说明该外向电流是钾电流,且提示此外向电流包括两种成分.试验结果还表明,此外向电流的衰减过程可用双指数方程很好地拟合,而在500ms预脉冲刺激后再经去极化激活的快成分的失活过程则适合用单指数方程进行拟合,从而进一步证实大鼠海马锥体神经元的外向钾电流包括快慢两种成分(IA和IK).IA的稳态激活和失活过程均可用Boltzmann方程进行拟合,半数激活和半数失活电压分别为(7.40±3.01)mV和-(66.27±3.62)mV,但其稳态失活在测试电压范围内(-100mV至+30mV)不完全.     

Neuro-protective effects of CNTF on hippocampal neurons via an unknown signal transduction pathway

Stress is one of the leading contributing factors for psychosomatic diseases of modern society. Prolonged or strong stress may cause more release of glutamic acid (Glu) transmitter from hippocampal neurons. As most hippocampal neurons are glutaminergic ne…     

读心的模拟说进路

本文从几个方面考察了日常生活中的读心能力实现的主要进路之一模拟说,交待了模拟说作为理论说的对立方出现的背景,复制策略、最小努力原则和离线机制三种模拟形式,几组支持模拟说的有力的实验证据,以及模拟说在遭到质疑时的各种辩护,说明了读心过程和读物过程存在巨大差异,模拟说对于读心研究而言的确存在诸多理论说所不可比拟的解释优势,但读心始终是一个不可将理论因素完全排除在外的过程,它容纳模拟与理论甚至更多进路的结合。     

镜像神经元与他心认知

镜像神经元的经验发现,被部分发现者和模拟论者解读为基于模拟的心理阅读的神经基础,即亚个人水平的隐模拟过程或映像过程,支撑着个人水平的、有意识内省的显心理模拟。本文分析考察这种哲学解读,认为镜像神经元的相关功能表明了它应该是人们对他人心理阅读能力的神经基础,但还不足以判定其到底支持ST还是TT的心理阅读方式。