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241.
242.
环境微生物的分子生物学研究方法 总被引:11,自引:0,他引:11
本文介绍了在环境微生物生态研究中的分子生物学方法如分子杂交,聚合链式扩增技术PC震,rRNA基因同源分析法,新型凝胶电泳技术,生物醌谱图法等和应用。这些技术的使用将大大扩展微生物生态学研究的空间,并使得在分子水平研究生态问题的机制成为可能。 相似文献
243.
人共刺激分子B7-1/CD80胞外编码区cDNA的克隆及序列分析 总被引:1,自引:0,他引:1
用RT-PCR法从人外周血单核细胞克隆了编码共刺激分子B7-1/CD80胞外区的cDNA,并用Snager链终止法进行测序,结果表明,所cDNA片段的序列与GenBank中已报道的人B7-1/CD80 cDNA序列的对应部分仅有两个碱基存在差异(658位A→T,773位A→G),这为探讨B7-1/CD80分子的生物学功能奠定了基础。 相似文献
244.
苯并芘诱发的人支气管癌细胞系p53基因突变的研究 总被引:1,自引:0,他引:1
BT癌系是用苯并芘称在移植到裸鼠皮下的人胎儿支气管内诱发的肿瘤,为了深入了解苯并芘的致癌机理,我们对该癌系中p53基因的改变进行了系统的研究。结果表明,BT细胞核内p53蛋白异常高表达;PCR-SSCP检测到第7外显子有异常改变;D 列分析证实第248密码子发生了CGG→CTT的颠换,所编码的氨基酸由精氨酸变为亮氨到。本实验提示该害变可能是七产芘引起癌变的重要分子基础。 相似文献
245.
以特异扩增人SRY基因HMG -box保守区的一对引物 ,扩增了黑斑蛙的Sox基因 (SRY -boxgene) .结果表明 ,雌雄黑斑蛙个体均扩增出了两条带 ,大小分别为 4 50bp和 90 0bp ,显示了Sox基因在黑斑蛙雌雄个体间无性别特异性 ,且可能含有内含子 .本文为探讨黑斑蛙的性别决定机制及Sox基因的进化提供了分子资料 . 相似文献
246.
利用3-’RACE的方法分别从异源四倍体鲫鲤、三倍体湘云鲫、二倍体红鲫的卵巢中克隆了cdc2基因cDNA的部分序列.选取这3种鱼cdc2 cDNA中一段长为157 bp的保守片段设计特异引物,通过Real-time PCR检测cdc2 mRNA在这3种不同倍性鱼卵巢中的表达水平,结果表明cdc2转录量随着倍性的递增而相应升高. 相似文献
247.
248.
采用CCl4损伤性大鼠肝纤维化模型,观察肝纤维化对TGF—β信号通路的影响。方法20只雄性Wistar大鼠随机分为2组:一组作为正常组(C组,n=6),另外一组为肝纤维化模型组(M组,n=14)。C组,饲普通饲料及自来水,每次腹腔注射2mL·kg^-1橄榄油,M组于实验第1天腹腔内注射50%CCl4(CCl4:橄榄油=1:1)诱导肝纤维化,每次2mL·kg^-1,每周3次,共6周。实验完备后称重、处死,并用分光光度计测定血清中的ALT和AsT活性,用RT—PCR技术检测:Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白、Fibroneetion、PAI-1和TGF—β mRNA转录水平。结果:模型组与对照组相比较,ALT和AST活性显著升高(P〈0.05),Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白、Fibronection、PAI-1、TGF—β转录水平同样显著升高(P〈0.05)。结论:大鼠肝纤雏化与TGF—β信号通路有直接的关系,而且在纤维化肝中表达量明显上调。 相似文献
249.
聚合酶链式反应(Polymerase Chain Reaction)又称为PCR.PCR自20世纪80年代初发明以来,已迅速发展成为生物科学研究和基因诊断领域的最重要的新技术.PCR技术依赖设定的温度循环,以控制酶促进反应的自动进行。从而达到基因扩增的目的.目前实验室广泛使用的PCR基因扩增仪,主要采用国际上通用的时间控制半导体温控系统,成本较高且不易实现.利用毛细管流体在不同管道部分的流体分部,通过控制不同管道部分的温度,可以巧妙地实现流体在不同温度条件下的循环,且与毛细管电泳技术相结合,还可以实现在线检测,从而以更简化的方式,实现PCR的自动化控制与分析.该文介绍这种适合PCR扩增仪的恒温系统,包括系统的立体螺旋结构设计、单片机温控系统的设计等. 相似文献
250.
目的:从各种来源的标本中快速鉴定STEC毒力基因,并了解其在菌株中的分布情况.方法:采用多重PCR的方法鉴定STEC的特征性毒力因子stx1,six2,eaeA和hlyA.结果:各种标本中鉴定出产志贺毒素的大肠杆菌共46株,38株(82.6%)携带stx1基因,30株(65.2%)具有six2基因,22株(47.8%)同时检测到2种基因.36株(78.3%)检测到hlyA基因,24株(52.2%)有eaeA基因.4种毒力基因即six1 stx2 eaeA hlyA的有19株(41.3%),而且血清型均为O157.结论:产志贺样毒素大肠埃希菌毒力基因图谱是一个重要的分子流行病学标志,应用多重PCR可简便、快速、敏感、特异性地鉴定出STEC的特征性毒力基因,并依照毒力基因存在情况判定其致病性能. 相似文献