PCR扩增HBV x基因特征序列检测乙肝病毒DNA

提出了通过扩增特征序列检测乙肝病毒DNA的新方法．根据乙肝病毒DNA保守区的特点,利用Primer Premier 5.0设计出乙肝病毒x基因的特异性引物,并在以血清DNA为模板的聚合酶链反应体系中进行扩增,由此检测待测血清中是否存在乙肝病毒DNA．实验结果表明,该方法较传统的酶联免疫法灵敏,可以检测出酶联免疫法所检测不到的乙肝病毒,具有与免疫印迹一样的准确度;通过与以乙肝病毒s基因为靶序列的PCR反应体系比较,发现乙肝病毒x基因比s基因在序列上更为保守,更适合做乙肝病毒DNA检测的特征序列．     

马铃薯天冬氨酸蛋白酶抑制剂基因5′上游调控区的分离和序列分析

利用单一特异引物聚合酶链反应技术，将马铃薯ＤＮＡ中天冬氨酸蛋白酶抑制剂家族一成员的５′上游区分离，并克隆进ｐＵＣ１８质粒ＳｍａＩ位点中．用３２Ｐ中标记的单一特异引物──ＰｒｉｍｅｒＡ为探针，经斑点杂交得一阳性克隆．ＤＮＡ测序获得含有马铃薯天冬氨酸蛋白酶抑制剂基因５′上游区的插入物的核苷酸序列．从这序列结构中见到ＴＡ富含区，并发现典型的调控序列ＴＡＴＡ和ＣＡＡＴ．此上游序列与国外所得到的天冬氨酸蛋白酶抑制剂的上游区相比较在序列和ＴＡＴＡ及ＣＡＡＴ盒的位置上有着很大的不同．     

聚合酶链反应诊断男性淋菌性尿道炎

用淋球菌聚合酶链反应诊断男性淋菌性尿道炎，６１例患者中９例作分泌物培养和ＰＣＲ，培养阳性２例，ＰＣＲ阳性５例；５２例先取尿道拭子作培养，后取始段晨尿作ＰＣＲ，培养阳性１例，ＰＣＲ阳性１８例．培养总阳性率４．９２％，ＰＣＲ总阳性率３７．８％，两者有显著性差异．笔者认为晨尿淋菌ＰＣＲ可作为一种敏感方法用于本病的诊断．     

PCR产物溶剂的选择对杂交信号的影响

在基因芯片技术中,提高杂交信号有利于增加基因表达变化比值的可信度.通过研究不同溶剂来溶解PCR产物后,点样对杂交信号的影响,使基因芯片的技术环节得到优化.     

小鹅瘟的PCR检测

通辽市某养鹅户饲养的640只雏鹅从5日开始死亡,死亡率达75%.经PCR检测后确诊为鹅细小病毒感染.     

Cloning and expression of the vp39 gene of Bombyx mori nuclear polyhedrosis virus in E. coli

The nuclear capsid protein gene (vp39) ofBombyx mori nuclear polyhedrosis virus (BmNPV) was amplified successfully by PCR technique and inserted into pGEM 3zf(+). The 5′ and 3′ terminal area of the amplified vp39 gene were sequenced with silver-staining dideoxy method. Bmvp39 gene was sub-cloned into the expression vector pRSET-A, and transformed intoE. coli BL21. This gene was highly expressed by IPTG induction. SDS-PAGE analysis showed that the expressed protein is about 38 kd, and the expressed amount reached maxium in 4 h with IPTG induction. Supported by the National Natural science Foundation of China and the Doctoral Foundation of Edn carto Committee Liu Deli: born in 1954, Doctoral Candidate from Huazhong Normal University To whom correspondence should be addressed: (027-7882712-2938)     

小麦矮腥黑粉菌PCR快速检疫鉴定方法

设计一对特异性引物,对小麦矮腥黑粉菌（TCK）及其近似种进行PCR扩增,结果表明TCK可以扩增出200bp清晰条带,而其近似种未出现条带,该方法可以作为TCK的PCR快速检疫鉴定方法。     

黑麂粪便DNA的简易提取方法

收集九龙山自然保护区野外自然条件下的黑麂粪便样品,用无水乙醇保存于-70℃冰箱,经十六烷基三甲基溴化铵（CTAB）裂解液温浴粪便、酚／氯仿抽提及聚合酶链反应（PCR）纯化试剂盒纯化等步骤提取黑麂粪便DNA,并扩增线粒体DNA细胞色素b基因和2个微卫星位点进行检测;同时提取黑麂肌肉和皮毛样品的DNA作为对照．结果显示,该方法可以从粪便中提取到高质量的黑麂DNA,并可进行有效扩增,为黑麂及其他濒危鹿科动物的非损伤取样提供了一种简易方法．