铁皮石斛抗疲劳作用的谱效关系研究

为了探讨铁皮石斛提取物高效液相色谱（HPLC）图谱峰面积与其抗疲劳作用的关联性,为阐明其抗疲劳药效物质基础提供依据。本研究从4个不同产地采集铁皮石斛,分别制取水提取物、醇提取物和制备其HPLC指纹图谱;并开展小鼠负重游泳和游泳疲劳实验,记录力竭游泳时间、检测血清乳酸含量和肝糖原含量,分析抗疲劳作用;最后采用偏最小二乘回归法,研究各提取物指纹图谱共有峰面积与药效的关联性。结果如下：分别制取了各产地铁皮石斛水提取物、醇提取物HPLC指纹图谱,提取出30个特征峰;铁皮石斛水提物、醇提物显著延长小鼠力竭游泳时间、降低游泳疲劳小鼠血清乳酸含量、提高游泳疲劳小鼠肝糖原含量;与延长游泳时间相对应的色谱峰为第4,8,15,23号,与降低血清乳酸含量相对应的色谱峰为第1,3,5,7,9,11,20,24,25,30号,与增加肝糖原含量相对应的色谱峰为第27,28号。实验结果初步证明铁皮石斛抗疲劳作用显著,与延长小鼠力竭游泳时间、降低游泳疲劳小鼠血清乳酸含量或提高游泳疲劳小鼠肝糖原含量相关联的铁皮石斛提取物HPLC色谱峰各不相同。     

超声波提取枳椇多糖的工艺研究

为了优化超声波法提取枳椇果柄多糖的工艺条件,分析了不同超声波功率、超声波温度、料液比、超声波时间、提取次数对提取枳椇多糖的影响,确定了其中影响较大的四个因素,并设计L934正交试验。结果表明,超声波法提取枳椇多糖的最佳工艺为:以蒸馏水为提取溶剂,超声波功率为500 W,温度为70℃,料液比为1∶35,提取时间0.5 h,提取次数为2次。在此工艺下得到的多糖含量为27.949 mg/g,得率为30.83%。     

金钗石斛试管苗壮苗培养和光合速率的检测

选用金钗石斛(Dendrobium nobileL ind l)种子播种在固体、半固体、液体、滤纸拱桥液体培养基上,作种子萌发对比试验,最终研究结果:滤纸拱桥液体培养基上萌发率最高,可达90%以上。试管苗在添加或者未添加苔藓植物提取液壮根壮苗培养基上培养,最终研究结果为:前者平均每天苗净增长0.054 g,后者平均每天苗净增长0.082 g。这一实验结果充分证实了金钗石斛在未添加苔藓植物提取液的生长超过添加苔藓植物提取液生长的51.85%。光合速率的测定得出实验结果:金钗石斛第一功能叶的光合速率最高,其它功能叶依次递减。所有功能叶光合速率总平均值为2.60μmol.m-2.s-1。     

兰科丝核菌类真菌对铁皮石斛生长的影响

将初步鉴定为隶属于兰科丝核菌类瘤菌根菌属(Epulorhiza sp.)的GDB254和角菌根菌属(Ceratorhiza sp.)的MLX102、CLN103真菌菌株接种到铁皮石斛组培苗,65 d后测定对铁皮石斛生长均有明显的促进作用,接菌苗的平均鲜重净增率均高于对照,且经检验接菌苗与对照均达极显著差异(α=0.01).叶绿素a、b含量也较对照有明显增加,其中GDB254菌株接种铁皮石斛后其叶绿素a、b含量分别增加76.2%、128.0%,MLX102使其增加84.9%、85.4%,CLN103使其增加57.9% 、77.8%.通过徒手切片光学显微镜观察菌根,菌根真菌先在根外聚集并通过破坏根被入侵到皮层组织,在皮层组织细胞中通过菌丝穿越细胞壁不断延伸扩展,可侵染到中柱组织,并可在皮层和中柱细胞形成典型的菌丝结结构.从铁皮石斛生长量和叶绿素含量增加及根的显微结构表明,3个菌株确与铁皮石斛形成了共生菌根,并对其生长有明显促进作用.     

金钗石斛种子非共生萌发和种质保存

报道了用金钗石斛(DendrobiumnobileLindl)已开裂果实的种子经无菌处理,播种在改良的KC培养基上培养,研究结果表明:种子萌发成原球茎,原球茎分化成幼苗。同时对原球茎、幼苗和茎芽进行冷冻保存和低温贮藏。最终研究结果为:冷冻保存的原球茎其分化率为51%,幼苗和茎芽存活率分别是35%、43%。低温贮存的原球茎分化率为75%,幼苗和茎芽的存活率分别是95%、97%。     

文山铁皮石斛产业发展中存在的问题及建议

作为铁皮石斛的原产地之一,文山近年来在铁皮石斛的组培、人工种植、加工等方面均取得显著进展,笔者根据自身生产实践经验及查阅相关文献,对文山铁皮石斛产业发展中的存在问题进行了探讨,并提出几点建议,以供同行参考。     

霍山石斛带节间的茎段在IBA／NAA诱导下的组织培养

论文研究了外源激素（IBA,NAA）在霍山石斛带节间茎段的组织培养中的调节作用,探索了诱导出芽和诱导生根的最佳配比的培养基,建立了一套适宜霍山石斛快繁的改良培养基系统。     

高温胁迫对金线兰生理特性影响的研究

以金线兰(Anoectochilus roxburghii(wall.) Lindl.)无菌种子苗叶片为试验材料,研究了金线兰在高温胁迫(28℃、33℃、38℃、43℃)下内部生理生化反应的变化规律,结果表明,随着高温胁迫程度的加深和时间延长,金线兰叶片细胞膜透性明显增加;丙二醛(MDA)含量在28℃和33℃处理时随时间逐渐增加,38℃和43℃处理时则先增加后降低;叶片相对含水量(RWC)逐渐降低;叶片可溶性多糖、可溶性蛋白质及脯氨酸含量则呈先增加后降低趋势.     

见血清止血作用研究

为明确民间药见血清的止血有效部位,采用毛细玻管法及载玻片法观察见血清醇提部位对小鼠凝血时间的影响;采用断尾法观察其对小鼠出血时间的影响.实验结果显示:毛细玻管法和载玻片法中,见血清醇提部位高、低剂量均能显著缩短小鼠的凝血时间,与空白对照组比较有显著统计学差异(P<0.01,P<0.05);断尾法中,见血清醇提部位高、低剂量均能显著缩短小鼠出血时间,与空白对照组比较有显著性差异(P<0.01);见血清醇提部位具有止血功效.     

金钗石斛试管苗生根研究

在基本培养基MS上分别添加不同浓度和配比的α-奈乙酸(NAA)和6-苄氨基嘌呤(6-BA)、吲哚丁酸(IBA)和6-BA,不同浓度的多效唑(PP333);在MS 6-BA 0.2mg·L-1 NAA 1.0mg·L-1 活性炭0.1%培养基上分别添加10%的香蕉汁、马铃薯汁、椰子汁、番茄汁和胡萝卜汁5种天然成分对金钗石斛(Dendrobium nobile)试管苗进行生根研究.结果表明:NAA和IBA分别与6-BA配合使用均能抑制试管苗根的分化及生长,但单独使用对促进试管苗根的分化及生长有显著的效果,NAA的浓度为0.5～1.0 mg·L-1时,试管苗生根效果较佳,当IBA浓度为0.2mg·L-1时,试管苗生根率达100%,且根数多而粗壮,NAA和IBA均可单独作为促进金钗石斛试管苗生根培养的理想的植物激素;PP333 2～4 mg·L-1可促进再生植株根的形成,但抑制根的伸长生长,建议与其他激素配合使用;5种天然成分均对试管苗根的分化、长度和粗壮度有明显的促进作用,其中附加10%香蕉汁对试管苗的生根效果最好.