气相色谱法测定金钗石斛中石斛碱的含量

目的:测定贵州不同产地金钗石斛中石斛碱的含量。方法:采用气相色谱法,OV1701石英毛细管柱(30×0.32mm,0.25μm),以FID为检测器。结果:贵州赤水产金钗石斛的石斛碱含量最高,达0.259%,罗甸、兴义、独山产金钗石斛石斛碱含量分别为0.199%、0.09%和0.118%。结论:本实验建立的方法简便快捷,结果稳定,可作为中药金钗石斛中石斛碱含量测定的方法。     

原球茎为转化受体的农杆菌介导石斛遗传转化

以携带双元载体pCAMBIA1305.1的农杆菌菌株EHA105转化石斛种子萌发形成的原球茎,通过GUS瞬时表达检测对受体状态、农杆菌活化条件、共培养时间等转化影响因子进行了优化;共培养4 d的原球茎接种到含有30 mg/L潮霉素(Hyg)和500 mg/L头孢噻肟钠的愈伤组织诱导与增殖培养基上以获得潮霉素抗性的愈伤组织,抗性愈伤组织在含Hyg 50 mg/L的再生培养基上再生植株,抗性株经GUS组织化学、PCR和PCR-southem blot检测证明为转化株。     

不同氮素水平对铁皮石斛UV-B辐射缓解作用研究

研究了高、中、低3种氮素营养水平(2.208 4,0.552 1和0.138 0g/L)对UV-B辐射(5.1,15.6μW/cm~2)下铁皮石斛的光合色素、类黄酮质量分数、苯丙氨酸解氨酶(PAL酶)活性及主要药用成分总多糖质量分数的动态变化情况,探讨了缓解铁皮石斛UV-B辐射伤害的适宜氮素营养条件.结果表明:低氮素营养条件下,铁皮石斛光合色素质量分数较低,但PAL酶活性强、类黄酮及多糖质量分数明显高,其类黄酮质量分数变化与PAL酶活性变化存在明显的正相关性.分析表明,低氮素营养条件虽然不利于铁皮石斛光合色素的形成,但促进类黄酮及药用成分多糖的积累,有助于缓解UV-B辐射带来的损伤.     

铁皮石斛不同生长阶段遗传稳定性的RAPD分析

利用从20个随机引物筛选出来的3个稳定性较好的10碱基引物对已继代12到13次仍然维持在不同生长阶段、来自同一蒴果的铁皮石斛T31种群进行RAPD检测其遗传稳定性,发现不同生长阶段内遗传相似系数较高,在89．36％和100％之间,其中原球茎期的变异比萌芽期、一叶期、两叶期、开花期要显著,但程度都极其微弱．     

基于ITS2条形码对铁皮石斛及其混伪品分子鉴定的初步研究

通过分析铁皮石斛及其常见混伪品的ITS2序列差异，建立铁皮石斛药材真伪的快速鉴别方法．运用CodonCode Aligner V3．0软件对测序峰图进行校对拼接，基于隐马尔可夫模型的注释方法获得ITS2序列，采用MEGA5．0软件进行序列比对，种内种间距离计算及UPGMA聚类树构建，应用Koetschan等建立的ITS2数据库及网站预测ITS2二级结构．结果表明，铁皮石斛及其混淆品ITS2之间存在明显差异，所有铁皮石斛样品在UPGMA树上单独聚为一类．ITS2序列可以作为DNA条形码用于铁皮石斛与其混伪品的快速分子鉴别．     

石斛共生真菌木霉菌拮抗作用的初步研究

为探讨拮抗真菌及其次生代谢产物对石斛病原菌生长的影响,从药用植物石斛中分离、鉴定和筛选出对常见病原真菌镰刀菌(Fusarium)有拮抗作用的木霉菌(Trichoderma).通过平板对峙培养,观察其对镰刀菌生长的影响;通过几丁质水解圈实验,检测木霉几丁质酶的活力.该研究所筛选获得的木霉生防菌株,可应用于石斛的栽培管理,...     

31种石斛属植物的RAPD遗传多样性分析

采用随机扩增多态性DNA技术对31种石斛属植物的遗传多样性进行分析.从100条RAPD引物中共筛选出18条引物,18条引物共扩增出1802条带,其中多态性位点有261个,多态性比为99.2％.UPGMA 聚类结果显示,基因型之间的相似系数分布于0.642～0.838之间,31种石斛属植物样品分为7类.聚类分析显示供试样...     

鼓槌石斛干花正己烷提取物的GC-MS研究

利用GC-MS联用技术,首次分析了鼓槌石斛干花正己烷提取物,并应用色谱峰面积归一化法计算了各成分的相对含量。共确认了22个化学成分,占总提取物的92.34%,其中含量最高的是十八碳二烯酸(亚油酸),约占提取物总量的40.66%.     

石斛属植物的形态组织学研究

从器官、细胞组织和分子水平上对石斛属植物的形态组织学研究进行了较为系统的综述.为充分开发利用石斛属药用植物资源提供科学的理论依据.     

金线莲种质的生理生化特性及内源激素含量差异

比较两个金线莲Anoectochilus roxburghii (Wall.) Lindl.种质的生理生化特性及内源激素含量差异,为后续的金线莲优良品种选育提供参考依据。本研究以福建小圆叶金线莲和福建黑叶金线莲30 d扩繁丛生苗、30 d生根试管苗和30 d温室移栽苗为材料,采用酶联免疫吸附测定法(ELISA)分别测定两个金线莲种质的内源激素含量;可溶性蛋白、可溶性糖、叶绿素和丙二醛(MDA)含量,以及过氧化物酶(POD)活性采用分光光度法测定。试验结果显示在扩繁、生根、移栽过程中,福建小圆叶金线莲可溶性蛋白含量、可溶性总糖含量、POD活性、MDA含量及其体内脱落酸(ABA)、赤霉素(GA)含量均高于福建黑叶金线莲,且两个不同种质金线莲扩繁、生根苗的可溶性蛋白、可溶性总糖及其体内玉米素(ZR)、GA和生长素(IAA)含量均显著(P0.05)高于移栽苗。因此,福建小圆叶金线莲可能更易于适应环境的变化。