铁皮石斛试管苗的RAPD分析及其特异性鉴定引物设计

为了能方便快捷地鉴别出铁皮石斛试管苗和铁皮石斛,采用随机扩增多态性DNA(RAPD)技术对铁皮石斛试管苗及石斛属23个种进行了基因组DNA多态性分析,从中找出铁皮石斛试管苗特征性条带进行克隆和测序,并根据测序结果设计了特异性引物.采用此特异性引物对铁皮石斛试管苗及石斛属其他一些种进行扩增,结果表明,铁皮石斛试管苗与各地产野生铁皮石斛出现同一特征条带,而石斛属其他种未出现该条带.     

影响铁皮石斛原球茎生长的若干因素

比较了不同无机盐浓度、不同碳源和不同pH 值对铁皮石斛原球茎生长的影响。实验结果表明:铁皮石斛原球茎生长较适宜的培养基为MS NAA1 mg·L- 1 w = 3% 蔗糖(pH为5 .0) 。     

外源Ca2+对干旱胁迫下金钗石斛幼苗生长的影响

分别用加有不同浓度的PEG6000(0,5%,10%,15%,20%,25%)的MS培养液模拟干旱胁迫,胁迫第3、9、15 d,测定植株增高、植株增重量、相对含水量和可溶性糖含量。用加有PEG600015%MS培养液胁迫的同时施加不同浓度(0,5,10,15mmol/L)的CaC l2,测定植株增高、植株增重量、相对含水量和可溶性糖含量。     

铁皮石斛野生居群研究(Ⅳ):RAPD反应体系的构建与优化

为获得铁皮石斛RAPD的最佳反应体系,本文对影响RAPD反应的模板含量、Mg2+浓度、dNTP浓度、Taq酶浓度、扩增程序及退火温度等多种因子进行了构建与优化.通过各因子的组合研究,我们得到铁皮石斛RAPD反应最适扩增体系是:25μLPCR反应体积,10×Buffer 2.5μL,2.5 mmol/L MgC l2,dNTP 2.5μL(各2.5mmol/L),模板DNA为30 ng,Taq聚合酶1.5 U,随机引物12 pmol,ddH2O 14.2μL.最佳扩增程序:94℃预变性3m in,94℃变性50 s,38℃复性1 m in,72℃延伸2 m in,循环40次;最后72℃延伸5 m in.4℃保存.     

环草石斛(D.loddigesii Rolfe.)快速繁殖研究

用环草石斛的茎段作为外植体进行组织培养,以MS培养基为基本培养基,通过形成丛生芽的形式快速繁殖试管苗,改变了过去通过原球茎诱导途径进行繁殖的方式,简化了操作步骤。结果表明：芽诱导、芽增殖与继代培养基、壮苗与生根培养基分别以MS NAA0．1mg／L 6-BA1．0mg／L、MS NAA0．1mg／L 6-BA3．0mg／L、1／2MS NAA0．7mg／L为最好;移栽最适基质以碳酸盐小石子：杉木屑=1：2,上面铺盖1cm厚的苔藓为最好,幼苗的成活率达95％;取材的位置不同对环草石斛出芽也有一定的影响,茎尖部位明显要高于其它部位,茎中部次之,而茎基部几乎不能萌发;茎段外植体苗比种子苗成株快,茎粗,苗壮,易成活;外植体苗分段增殖时基部茎段的增殖系数比上部茎段大,生长速度快。继代增殖苗段比野生植株增殖快。同时还总结了环草石斛的组织培养和快速繁殖过程,并对其工业化生产进行了初步讨论。     

金钗石斛兰组培苗的生根培养和移栽

以1/2MS为基本培养基,添加不同浓度的NAA、IBA和6-BA,配置16种培养基进行试验,筛选最适宜于金钗石斛兰生根的培养基.结果显示:1/2MS+0.2 mg/L 6-BA+1.0 mg/L NAA+0.5 mg/L IBA及1/2MS+0.5 mg/L 6-BA+1.0 mg/L NAA+0.2 mg/L IBA培养基最适宜于金钗石斛兰生根,生根率达100%,而且根系生长健壮.将金钗石斛兰生根组培苗移栽于6种不同的基质中,结果表明,以棕榈外壳作为移栽基质最佳,移栽成活率达100%,且幼苗生长良好.     

铁皮石斛多糖的研究进展

概述铁皮石斛多糖的含量、提取工艺、结构分析,抗氧化性、增强免疫力及抑制肿瘤等方面的研究工作。     

三七内生真菌分离与分子鉴定（Ⅰ）

对三七（Panax notoginseng）内生真菌进行了分离并通过18S-ITS-28S rDNA序列分析进行鉴定。结果从根、茎、叶组织中分离得到158株形态各异的内生真菌。对其中92株的ITS序列分析显示,91株分属于19个已知属,另1株真菌的ITS序列与GenBank中已报道的序列最高相似性为82%,认为是一新种。结论：三七内生菌多样性丰富,同时不同部位内生菌的数量、种类及分布存在差异,且有其特有种。     

云南文山人工种植铁皮石斛多糖含量及微量元素测定

通过采集广南、马关、西畴3个铁皮石斛人工设施栽培基地的样品,采用苯酚-硫酸比色法测定多糖含量,用火焰原子吸收光谱法测定微量元素含量的方法,研究文山地区人工种植的铁皮石斛多糖和微量元素的含量,结果显示马关县、西畴县、广南县样品的多糖分别为26.54%、26.48%、26.55%;所检测铁皮石斛样品含有丰富的人体必需微量元素,Mn、Zn、Fe平均含量分别为6.17,0.944,0.081,0.077,0.234 mg/g;供试样品中Pb、Cu、Cr 3种重金属元素平均含量为0.0017,0.014,0.0002 mg/g,Pb、Cu含量在《药用植物及制剂进出口绿色行业标准》规定限度范围内。     

枸杞根系内生真菌的染色方法

为更好地观察枸杞(L ycium barbarum)根系内生丛枝菌根真菌(arbuscular mycorrhiza fungi,AMF)和深色有隔内生真菌(dark seprate endophytes,DSE)侵染定殖特征,建立了一种枸杞根系内生真菌适宜的染色方法.将健康枸杞根样置于100 g/L的KOH溶液中90...