一种利用微波炉加热快速提取细菌DNA用于PCR扩增的方法

利用微波加热原理,探索一种快速、简单、高效提取细菌DNA用于常规PCR快速检测的方法。在微波炉额定功率800 W条件下分别对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、单增李斯特氏菌、副溶血弧菌、沙门氏菌以及志贺氏菌6种常见食源性病原菌进行微波处理,离心取上清,获取细菌DNA,将样本DNA进行PCR扩增及琼脂糖凝胶电泳进行验证。并进一步采用微波加热方法针对6种病原菌最低检出浓度和混合提取6种病原菌DNA的PCR检测进行分析。6种病原菌在微波炉中加热40-130 s的上清DNA样本均能用于常规PCR扩增。针对检出浓度的分析表明,副溶血弧菌的最低检出浓度为103 cfu/ml,金黄色葡萄球菌为104 cfu/ml,肠出血性大肠杆菌为105 cfu/ml,肠炎沙门氏菌和福氏志贺氏菌的最低检出浓度为106 cfu/ml,针对单核细胞增生李斯特氏杆菌的的最低检出浓度为107 cfu/ml。进行6种混合菌微波共提取时,其中5种病原菌的特异性基因都能扩出,并且条带很亮。该微波提取方法具有快速,简单,高效的特点,能满足大部分食源性病原菌的常规PCR检测需求,大大节约了时间和成本,具有广泛的适用性,为细菌快速分子检测提供了简便手段。     

基于单细胞凝胶电泳法的不同烷化剂导致DNA损伤的比较研究

从单细胞水平考察单官能团和双官能团烷化剂引起DNA损伤的差异.采用单细胞凝胶电泳法检测并比较单官能团烷化剂甲基亚硝基脲与双官能团烷化剂尼莫司汀在不同浓度下对DNA的损伤情况.研究结果表明药物浓度与彗星尾部DNA含量之间存在线性关系.为了检测DNA交联损伤,选择加入断裂剂作为对照,结果显示双官能团烷化剂尼莫司汀能引起显著的DNA交联.本文从细胞毒性作用和DNA损伤水平考察了烷化剂的毒性,为阐明烷化剂的致癌和抗癌机制提供理论基础.     

应用UPLC-Q-TOF-MS/MS技术分析生物诱导后雷公藤悬浮细胞化学成分

利用超高效液相色谱-四级杆-飞行时间质谱连用技术(UPLC-Q-TOF-MS/MS)和化学计量学结合的方法,分析生物诱导后雷公藤悬浮细胞体系中化学成分的变化.分析样品相似度、层次聚类分析(HCA)和主成分分析(PCA),建立554个共有峰的质谱指纹图谱.结果表明:通过对雷公藤离体培养体系中的质谱指纹图谱分析,鉴定了104种化学成分;生物诱导后雷公藤悬浮细胞和培养液中部分化学成分质量分比显著升高,雷公藤内酯乙、山海棠酸衍生物1、TH1、雷公藤甲素衍生物2、雷酚内酯、雷公藤甲素衍生物1、雷酚新内酯质量比分别提高了7.41,6.50,6.07,5.85,3.63,1.59,1.13倍;质荷比(m/z)为224,278,678,701的未鉴定成分质量比分别提高了2.88,1.57,4.04,6.27倍.     

科学级冷却型CCD—荧光图像系统定量性能的鉴定

以荧光探针Ｈｏｅｃｈｓｔ３３３４２（Ｈｏ３３３４２）特异性标记大白鼠精子和肝细胞ＤＮＡ，用科学冷却型ＣＣＤ显微荧光图像系统获取单个细胞的荧光图像，再以图像处理软件“Ｉｍａｇｅ－Ｐｒｏ ＰＬｕｓ”，分析测量各细胞的ＤＮＡ相对含量和细胞核的相对面积。实验数据表明：鼠肝细胞的ＤＮＡ相对含量分别为精子的ＤＮＡ相对含量的２，４，８倍，符合生物学的规律，说明这套系统的定量结果是可靠的。     

DNA序列非退化的二维图形表示及其应用

提出了一种新的DNA序列的2-D图形表示方法,并证明了它的非退化性,随后结合图形表示给出DNA序列的12个正规化的ALE指标.在此基础上,结合双核苷酸计数和符号序列LZ复杂度,将DNA序列转化为一个29维的数值向量.对23个物种的β球蛋白基因和18个物种的线粒体NADH脱氢酶序列进行的系统发生分析,证明了所提方法的有效性.     

聚乙二醇修饰多壁碳纳米管对质粒DNA的影响

利用体外评价方法(plasmid DNAassay)和原子力显微镜(atomic force microscopy,AFM)直接观测相结合,研究原始多壁碳纳米管(multi-walled carbon nanotubes,MWNTs)、纯化后的MWNTs以及聚乙二醇(polyethylene glycol,PEG)修饰的MWNTs与DNA的相互作用.结果表明:原始MWNTs对质粒的损伤较为严重;纯化后的MWNTs对质粒的损伤有所减弱;而经PEG修饰的MWNTs对质粒的损伤非常小,表现出良好的生物相容性.     

含萘环结构Salen-Mn(Ⅲ)和Salen-Co(Ⅲ)配合物与DNA的相互作用研究

为了定性地研究席夫碱类配合物与DNA的作用,按文献方法,合成了2种Salen-Mn(Ⅲ)配合物和2种Salen-Co(Ⅲ)配合物,用紫外光谱法和粘度法研究了这4种配合物与DNA之间的结合模式,在DNA存在下,配合物的紫外吸收光谱产生了明显的减色效应.粘度测试表明,DNA溶液的粘度随着配合物的加入而增加.结果说明,这4种配合物都是以插入模式与DNA结合,其中平面性好的配合物与DNA的作用较强;Co的配合物与DNA作用强于相应Mn的配合物与DNA的作用.     

分布式计划生育管理系统设计

介绍了计划生育管理信息系统的功能需求以及功能模块,详细介绍了多级计划生育管理系统的网络结构,并说明了计划生育管理信息系统采用的实现技术以及实现方法。     

DNA序列分类数学模型

本利用统计的方法对以某些碱基特别丰富（稀少）作为特征研究DNA序列结构，再利用某些频率较高的片段对序列结果进行进一步的研究，从而得到了更为有效的判断标准。     

中国主要红树科植物的分子系统发育

测定和分析了红树科（Ｒｈｉｚｏｐｈｏｒａｃｅａｅ）５属６种植物的ｒＤＮＡＩＴＳ区序列，所构建的ＩＴＳ区分子系统树图表明：红树科植物可形成１个单系的类群．但在部分属种ＩＴＳ序列分析的结果与红树科传统的分类系统有所不同，陆生红树科植物竹节树属（Ｃａｒａｌｉａ）的竹节树（Ｃｂｒａｃｈｉａｔａ）和旁杞木（Ｃｐｅｃｔｉｎｉｆｏｌｉａ）之间的分子差异很大，呈复系演化的特征．旁杞木与红树林主要植物秋茄属（Ｋａｎｄｅｌｉａ）的秋茄（Ｋｃａｎｄｅｌ）和红树属（Ｒｈｉｚｏｐｈｏｒａ）的红海榄（Ｒｓｔｙｌｏｓａ）的关系较近，竹节树则与另一红树林的主要种类角果木属（Ｃｅｒｉｏｐｓ）的角果木（Ｃｔａｇａｌ）呈姐妹群关系．