生物素标记核酸探针杂交检测灵敏度的比较研究

用Biotin-11-dUTP进行缺口翻译缺备生物素标记的人β-珠蛋白基因探针并用该探针进行了斑点杂交，硝酸纤维素膜印迹杂交 及琼脂糖凝胶直接染交方法学比较，结果表明：经ABAP法显色后，上述三种杂交法中，DNA最低可检测量依次为5，10，50pg，以斑点杂交法最灵敏。     

乙醇沉淀法回收微量DNA效率的研究

本文研究了浓度、温度、时间和携带DNA等因素对乙醇沉淀法回收微量DNA效率的影响。结果表明:1.回收效率与DNA浓度呈正相关。2.添加携带DNA能提高低浓度DNA的回收效率,浓度越低,增加比例越大.3.超低温(-70℃)、长时间(12h)冷冻处理,对回收效率无明显影响,在室温(+20℃)或低温(-20℃)下放置2～30min同样可获得较高的回收率。     

几种微量DNA定量测定方法的比较

本研究通过对溴乙淀染色、紫外分光光度计和高效液相色谱(HPLC)等方法的比较,找出了适用于不同情况下,微量DNA的最佳测定方法:1.紫外分光光度计,能准确测量纯净的、浓度在1μg/mL以上的DNA浓度;2.在有标准DNA的情况下,溴乙淀染色法能粗略区别1～5ngDNA;3.HPLC能够快速、准确检测0.21ng以上的DNA,此法简便、灵敏、不受杂质干扰,且能同时对多种微量DNA进行分离和定量。     

B-DNA活性中心的空间可及性

本文介绍了计算生物大分子内原子静态空间可及性的方法,讨论了在B-DNA的组成单元到单螺旋到双螺旋的变化过程中可及性的改变。同时研究了各种碱基序列对可及性影响,探讨了B-DNA内原子可及性的应用,通过具体事例说明其对化学反应活性的解释有重要意义。     

番茄DNA复制因子RFC1在减数分裂重组中的功能研究

减数分裂是真核生物有性生殖所必需,前期研究表明拟南芥DNA复制因子RFC1在减数分裂重组中具有重要作用,但其同源基因在其他物种中的减数分裂或其他功能还未有报道.为了检验番茄RFC1在减数分裂中的功能,我们建立了减数分裂特异RFC1~(RNAi)转基因番茄,发现其花粉活性显著降低,而且减数分裂异常.利用DAPI染色观察染色体形态,发现RFC1~(RNAi)减数分裂细胞在终变期和中期Ⅰ形成多价体,表明重组异常.DNA双链断裂指示蛋白γH2AX在RFC1~(RNAi)粗线期染色体上分布的保留滞后,进一步支持RFC1~(RNAi)中的重组异常.拟南芥和番茄分别属于真双子叶植物中的两个不同大支,蔷薇类和菊类,因此本文的结果也表明DNA合成基因RFC1在进化距离很远的不同植物物种中的功能相对保守.     

设计及自组装六边形网格状DNA二维阵列

根据Watson-Crick DNA碱基互补配对原则,设计了不同黏性末端DNA序列,以两种三点星状为模块(three-point-star motif),运用DNA自组装技术,成功制备了六边形网格状DNA二维阵列.研究不同单链DNA的摩尔比例对三点星状模块结构组装的影响,以及不同起始退火温度对二维阵列自组装的影响,用凝胶电泳及原子力显微镜(AFM)对结构进行了表征.结果表明,当构成三点星状模块的3条单链摩尔比例为1:3:3时得到的模块结构更稳定,从50℃开始退火时得到的二维阵列更完整.自组装得到的二维阵列厚度约2nm,六边形边长约20nm.本研究为进一步探究三点星模块组装二维阵列的机理提供了新的思路.     

雪人DNA与远古北极熊匹配

新DNA研究或许揭开了”雪人”之谜。科学家们对雪人毛发样本进行检测发现,它拥有的基因与一种远古北极熊的非常匹配,为此研究人员认为,喜马拉雅山脉可能存在棕熊的一个亚种,而它一直被人们误认为是虚构的动物。雪人又称“喜马拉雅雪人”或者“大脚怪”,几个世纪以来,     

线粒体基因种属鉴定复合扩增体系

针对cyt b基因和ND6基因序列,设计两对引物,以14种常见动物（包括人）生物性检材为对象进行PCR扩增,产物经聚丙烯酰胺凝胶电泳（PAGE）、硝酸银染色进行分析。结果证明,两条电泳条带者为人样本,分别是cyt b基因片段（358 bp）和ND6基因片段（181 bp）;一条电泳条带者为动物来源,是358 bp cyt b基因片段。在37.5μL PCR反应体系中最小检出模板量为0.25 pg基因组DNA。检材在4℃、室温和37℃温度下,经过4个月后均可获得正确的种属区分。高度潮湿环境中放置50 d的检材、形成于水泥地面、墙面、泥土等基质上的血痕,本方法可得到正确区分。由此建立的种属鉴定的线粒体基因复合扩增体系,其检测片段短、灵敏度高、操作简易,适合法医学上微量、降解、陈旧检材的种属判定。     

带有preS抗原决定簇的乙肝表面抗原的DNA免疫研究

构建了３种融合了ｐｒｅＳ抗原决定簇的乙肝表面抗原的表达质粒。在ＣＯＳ－Ｍ６细胞中暂时表达的结果显示,在ＣＭＶ启动子转录调控下融合基因表达的蛋白可以有效地分泌至细胞外,并且同时具有ＨＢｓＡｇ,ｐｒｅＳ１和ｐｒｅＳ２抗原性。带有ｐｒｅＳ抗原决定簇顺序的质粒ＤＮＡ直接免疫ＢＡＬＢ／ｃ小鼠后,能诱发小鼠产生抗Ｓ抗体,抗体滴度高于仅带有Ｓ基因的表达质粒。     

光柄筒冠花核糖体DNA ITS区序列

测定中国特有植物光西风筒化的ＩＴＳ区序列,分析了其结构特征,Ｇ＋Ｃ百分含质量及序列变异性,并比较了光西风筒冠花与其他被子植物的ＩＴＳ区序列特征。光柄筒冠花的ＩＴＳ区和５．８Ｓ ＤＮＡ的总长度为６０９个核苷酸。其中ＩＴＳ－１为２０７ｂｐ,ＩＴＳ－２为２３６ｂｐ,５．８ＳｒＤＮＡ为１６６ｂｐ;总的ω（Ｇ＋Ｃ）为５９．１１％,其中ＩＴＳ－１为６４．２５％,ＩＴＳ－２为５７．６３％和５．８ＳｒＤＮＡ为５３