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多数分子诊断方法对靶基因的检测都是以单链DNA为基础的,如何获得大量和高质量的单链靶DNA分子一直是研究热点.以包含BRCA1基因上3个单核苷酸多态性(SNP)的DNA片段为研究对象,通过调整不对称扩增引物碱基序列组成(5′-端引入错配或加入锁核苷酸(locked nucleic acid,LNA)),使用相差10倍浓度来增加不对称引物间Tm值差异,改进扩增条件(添加增强剂的扩增缓冲液,不同退火温度的二阶循环扩增程序)后,进行不对称扩增来产生大量单链靶DNA产物.结果表明Tm差异型不对称PCR(Tm difference asymmetric PCR,TDA-PCR)可有效提高单链DNA分子产率,降低引物设计难度,也扩大了模板序列的适用范围.此外,还针对禽流感病毒H5N1的血凝素(haemagglutinin)HA基因保守序列进行不对称扩增,用获得的单链DNA为模板进行焦磷酸测序检测,所得结果与参考序列一致且无明显干扰信号.因此,采用Tm值差异型不对称PCR可使焦磷酸测序等分子诊断流程更为简便,成本更低,效率更高,具有很好的通用性和实用性. 相似文献
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为应对农民工返乡局势,教育部、农业部、人力资源和社会劳动保障部等部委,以及地方政府近日都紧急出台了政策措施,要求扎实做好返乡农民工的培训和再就业工作。在对当地农民工进行计算机培训鉴定技能考试中,发现把文件夹里的文件名全部放到Excel里,怎么样做才能更快些,过去的作法就是使用“复制”、“粘贴”方法(将文件夹中的文件重命名,在可编辑状态下进行复制,而后在其他文档中粘贴)。这种办法可行,但对于文件夹中有大量的文件的情况, 相似文献
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This paper investigated the age-related changes in the expression patterns of maintenance methyltransferase (DNMT1) and de novo methyltransferases (DNMT3a, 3b, 3L) and the chromosome architecture in in-vivo matured mouse oocytes using two-photon laser-scanning microscope. Our results showed that (1) DNMT1 and DNMT3a, 3b, 3L in the oocytes of pubertal mice were located in the cortical region of oocyte cytoplasm. In aging groups, DNMT1 was also located in the cortical region. However, DNMT3a, 3b, 3L had a relatively wider distribution in the oocyte cytoplasm and appeared near the chromosomes. These differences between pubertal and aging groups suggested that aging might affect DNA methylation; (2) the expression of DNMT1, and DNMT3a, 3b in aging groups increased significantly compared to pubertal groups, while, the expression of DNMT3L decreased. These results might be explained by the compensation mechanism among DNMTs, which might be impervious to aging; (3) aging caused increased errors in the distribution and three-dimensional morphology of chromosomes, including the increased total volume and surface area, the high ratio of height to diameter of a circular cylinder enclosing the chromosomes (H/D). Our work provided morphological information for the studies of age-related decline in oocyte qualities. 相似文献
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在日常工作中各部门由于地理上的分散,将数据存放在某个公用站点上。这种方案的优点是数据的一致性容易保证,但其缺点是该站点网络负载大,远程用户的数据响应迟缓。数据复制技术可以有效解决这个问题,它通过将这些共享数据复制到位于不同地点的多个数据库中,从而实现数据的本地访问,减少网络负荷,从而确保了所有的用户使用同样的、最新的数据。 相似文献
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DNA疫苗技术由于其独特的作用和优势,现已成为最有发展潜力的新兴免疫技术之一。将DNA疫苗技术和卵黄抗体技术联合起来,可获得效价更高、亲和性更好和成本更低的卵黄抗体。就DNA疫苗和卵黄抗体的各自特点以及DNA疫苗技术在卵黄抗体制备中的应用优势进行综述。 相似文献