葡萄糖氧化酶多层膜修饰电极的电化学性能的研究

利用层接层自组装法,制备出有序且稳定的葡萄糖氧化酶的多层膜.应用电化学方法和XRD方法研究了膜修饰电极的电化学传感性能.结果表明:该传感器具有较好的重现性和稳定性,传感器对葡萄糖的响应非常迅速;每次加入葡萄糖后,电极的电流响应会随之出现跳跃性增大,酶电极达到96%,稳态电流响应的时间仅为3 s;灵敏度可以通过合理地调解多层膜的厚度来控制.     

高粱BTx623幼苗多酚氧化酶Real-time PCR引物扩增效率的检测

介绍了一种检测实时荧光定量PCR技术引物扩增效率的方法,以期为进一步应用实时荧光定量PCR奠定基础。同时通过实时荧光定量PCR技术,研究高粱BTx623幼苗中的多酚氧化酶基因SbPPO的表达情况,结果发现SbPPO2,SbPPO5,SbPPO6的相对表达量较高,这3个SbPPO可能在高粱BTx623幼苗中起到重要功能。     

葡萄糖氧化酶-过氧化氢酶共固定研究

以弱碱性阴离子交换树脂D301T为载体,对过氧化氢酶（CAT）和葡萄糖氧化酶（GOD）两种酶进行分次固定,并对固定化条件进行了优化。所得最佳工艺条件为：共固定化酶采用先固定CAT,再固定GOD的顺序进行,其中CAT 0.5 mL,GOD 0.25 mL。所得CAT蛋白结合量为1.07 mg/g,固定化效率为46.71%;GOD蛋白结合量为1.58 mg/g,固定化效率为43.62%;每mL GOD酶液的表观酶活为47.98 U/mL,每g载体中GOD的酶活为12.0 U/g。以戊二醛作为交联剂,体积分数取0.5%,交联时间取15 min时,所得固定化酶表观酶活达到最大值,为14.66 U/g,固定化酶连续反应10批后,其酶活为初始值的85.3%,显示出固定化酶具有良好的操作稳定性。     

GOD/Lac生物燃料电池的构建与性能研究

使用葡萄糖糖氧化酶(GOD)和漆酶(Lac)分别做酶生物燃料电池的阳极与阴极,构成了GOD/Lac酶生物燃料电池.首先通过循环伏安法研究了酶生物燃料电池阳极催化剂GOD和阴极催化剂Lac在碳布基底电极上的直接电化学行为,结果表明:GOD与Lac在该修饰电极上均完成了一个直接、可逆的电化学过程,保持了自身的生物学活性,为成功构成GOD/Lac酶生物燃料电池提供一个必要条件.其二,采用葡萄糖作为GOD/Lac酶生物燃料电池的阳极燃料,氧气(O2)作为GOD/Lac酶生物燃料电池的阴极燃料,使用充放电仪测得该GOD/Lac酶生物燃料电池在38.5 mV处的最大输出功率密度为0.108μW·cm-2,电流密度为2.75uμA·cm-2.     

酶电极法测定肌苷片中肌苷

以固定化核苷磷酸化酶(EC 2.4.2.1)、黄嘌呤氧化酶(EC 1.2.3.2)与过氧化氢电极构成电流型酶电极,研究了肌苷酶电极分析法的各种分析条件及参数,并与紫外分光光度法对比测定了肌苷片中肌苷含量。酶电极法测定结果与紫外法测定结果之间有较好的一致性。采用酶电极法测定肌苷片中肌苷含量专一性高、成本低、分析速度快。     

Involvement of NADPH oxidase NtrbohD in the rapid production of H2O2 induced by ABA in cultured tobacco cell line BY-2

The mechanisms for the production of hydrogen peroxide (H₂O₂) induced by abscisic acid (ABA) were investigated in suspension culture cells of tobacco BY-2 cells. The results showed that the immediate generation of H₂O₂, which was mainly derived from superoxide dismutase-catalyzed dismutation of superoxide radical, was significantly induced by ABA. Furthermore, treatment of the cultured tobacco cells with ABA resulted in a time-dependent quick increase in plasma membrane (PM) NADPH oxidase activity, which coincided on time and magnitude with the elevation in ABA-induced accumulation of H₂O₂. Moreover, these enhanced effects were pronouncedly inhibited by two NADPH oxidase inhibitor, diphenylene iodonium and imidazole, suggesting that PM NADPH oxidase is involved in the rapid accumulation of ₂O₂ in cultured tobacco cells. In addition, analysis of the expression level of NtrbohD, a PM NADPH oxidase gene in tobacco, by RT-PCR and protein gel blot revealed that the gene at both mRNA and protein levels was upregulated by ABA, indicating that NtrbohD participates in the ABA-stimulated rapid production of H₂O₂ in tobacco culture cells. Taken together, these findings suggest that ABA induces the rapid accumulation of reactive oxygen species via NADPH oxidase in suspension culture cells of tobacco, and that NADPH oxidase and H₂O₂ appear to be important components in ABA signal transduction pathway in plants.     

新鲜菊芋预处理工艺条件研究

由于菊芋中含有多酚类物质和多酚氧化酶,容易受到机械力或与空气中的氧作用发生褐变现象,影响高纯度菊糖的品质.实验以PPO的活性作为指标,考查了温度、维生素C的含量及pH值对PPO钝化的影响,确定温度100℃热烫4min,加入护色剂0.5%的维生素C溶液2mL,pH值是8为菊芋最佳的预处理条件,可有效抑制PPO的活性,防止褐变现象。     

葡萄糖氧化酶修饰聚二甲基硅氧烷-纳米金电极的制备及其应用

利用聚二甲基硅氧烷-纳米金表面生物亲和性结合葡萄糖氧化酶,制备了葡萄糖氧化酶修饰的聚二甲基硅氧烷-纳米金软电极,并用计时安培法在磷酸盐缓冲体系中研究其对葡萄糖的催化氧化,实验结果表明该酶电极对葡萄糖具有明显的催化能力且在葡萄糖浓度为0.66 mM～100 mM的范围内,响应电流与葡萄糖浓度呈良好的线性关系。     

镉离子胁迫下4种辣椒超氧化物歧化酶-同工酶酶谱及酶活性分析

以4种辣椒为材料,分析在不同胁迫浓度和胁迫时间镉离子胁迫下,4种辣椒超氧化物歧化酶(SOD)活性及同工酶酶谱的变化.结果表明,镉离子能显著影响酶活性的变化,不同镉离子浓度胁迫下不同材料酶活性变化不同, SOD酶活性最高为对照组的1.4倍(1号品种,100 mg/L胁迫3 d),酶活性最低的为对照组的60%(2号品种,150 mg/L胁迫6 d);镉离子还能影响同工酶酶谱,不同胁迫时间和浓度对同工酶的影响不同,对1号材料的影响最为显著,能诱导出2条SOD同工酶新谱带.     

Zn^2＋与苹果多酚氧化酶相互作用研究

为探讨苹果多酚氧化酶（简称PPO）的结构与功能关系,应用紫外差示光谱、同步荧光光谱及圆二色性光谱（CD）等生物物理技术和酶活性测定研究了外加Zn^2＋对苹果PPO的分子构象和酶活性的影响。结果表明,微景锌的加入能增加酶的活性和提高α-螺旋含量,当[Zn^2＋]／[PPO]为2．0左右时,苹果PPO活性最高,继续增加[Zn^2＋]／[PPO]比值,酶活性开始下降,比值为2．7以后,Zn^2＋表现了对PPO活性的抑制,α-螺旋含量下降;Zn（Ⅱ）可能与PPO中的组氨酸残基进行了配位,（ImH）σN＋σN→Zn^2＋、（ImH）σ→Zn^2＋、（ImH）π1→Zn^2＋、（ImH）Ⅱπ→Zn^2＋分别为227,241,265,335（nm）;色氨酸和酪氨酸的荧光均受到Zn^2＋的猝灭,但它们的微环境在Zn（Ⅱ）-PPO的相互作用中基本保持不变。