首页 | 本学科首页   官方微博 | 高级检索  
文章检索
  按 检索   检索词:      
出版年份:   被引次数:   他引次数: 提示:输入*表示无穷大
  收费全文   3069篇
  免费   123篇
  国内免费   303篇
系统科学   29篇
丛书文集   77篇
教育与普及   40篇
理论与方法论   7篇
现状及发展   196篇
研究方法   1篇
综合类   3138篇
自然研究   7篇
  2024年   2篇
  2023年   11篇
  2022年   47篇
  2021年   34篇
  2020年   44篇
  2019年   35篇
  2018年   39篇
  2017年   55篇
  2016年   39篇
  2015年   79篇
  2014年   97篇
  2013年   85篇
  2012年   145篇
  2011年   121篇
  2010年   124篇
  2009年   169篇
  2008年   175篇
  2007年   232篇
  2006年   246篇
  2005年   220篇
  2004年   224篇
  2003年   214篇
  2002年   226篇
  2001年   166篇
  2000年   142篇
  1999年   108篇
  1998年   93篇
  1997年   52篇
  1996年   61篇
  1995年   43篇
  1994年   48篇
  1993年   22篇
  1992年   26篇
  1991年   23篇
  1990年   22篇
  1989年   10篇
  1988年   4篇
  1987年   2篇
  1986年   5篇
  1985年   4篇
  1955年   1篇
排序方式: 共有3495条查询结果,搜索用时 546 毫秒
911.
为了解视网膜色素变性患者与正常人群中绿色觉基因外显子 5常见多态在正常色视人群中的分布 ,收集了 10 8例正常色视男性的白细胞基因组DNA [其中视网膜色素变性 (RP)男性 6 1名、非RP正常色视男性 4 7名 ],PCR扩增每例绿色觉基因外显子 5 ,异源双链_SSCP分析PCR产物。用已知序列的绿色觉基因产物作标准 ,确定待检个体绿色觉基因外显子 5的组成。结果表明 ,就基因频率而言 (g p之比 ) ,RP患者为 2 9,而非RP正常色视者为 4 0 ;就基因型频率而言 (g gp p之比 ) ,RP患者为 5 4 1 3 1,非RP正常色视者为 5 3 0 4 1。在RP患者与非RP患者这两种正常色视的人群中 ,绿色觉基因外显子 5常见多态存在着偏差分布  相似文献   
912.
白血病抑制因子(LIF)是一种多功能活性的糖蛋白,LIF基因在大多数妊娠第4天的小鼠子宫内膜进行着强烈的表达,然而LIF基因表达调控的机理目前尚不清楚,本实验对130只妊娠4-5d的小鼠LIF基因表达和血清中孕激素水平分别进行了检测,发现12只小鼠(占总数的9.23%)无LIF基因表达,无该基因表达小鼠血清中孕激素水平显著低于其它表达的小鼠。实验结果表明:孕激素可能是LIF基因表达的复杂的调控体系中的一个重要的调控因素。  相似文献   
913.
近年来神经干细胞已在成年哺乳动物中的中枢神经系统中分离成功。神经干细胞的最基本特征是具有分化为神经元、星状胶质细胞和少突胶质细胞的潜能,具有自我更新能力,并足以维持整个大脑所需。神经干细胞在修复受伤神经组织及治疗神经系统退行性疾病,如帕金森病、阿尔茨海默病、和亨庭顿病等方面有很好的应用前景。但在达到临床实际应用之前仍有一系列问题需要解决,最首要的是搞清神经干细胞的分化机制。  相似文献   
914.
用PCR方法合成了人表皮生长因子(hEGF)基因,构建了原核表达质粒p 20T-hEGF,研究了原核表达的重组蛋白hEGF的生物学活性,并构建了植物表达质粒,研究表明:无论是融合蛋白GST-hEGF或纯化的hEGF蛋白,都有相当高的生物活性,hEGF蛋白对Hela细胞的增殖有很好的促进作用,免疫小鼠亦能产生很高的免疫应答反应。  相似文献   
915.
用PCR对6个水稻基因组BAC克隆进行了筛选,得到了水稻nmads1基因2933bp的序列,通过与mmads1基因的cDNA序列比较,发现nmads1基因含6个内含子和6个外显子,5′非编码区有2个TATA盒及1个Car G类似序列。  相似文献   
916.
bFGF真核表达载体构建及表达   总被引:3,自引:0,他引:3  
旨在构建可在哺乳细胞中表达碱性成纤维细胞生长因子(basic Fibroblast Growth Factor,简称bFGF)的真核表达载体,以便用于研究bFGF基因治疗在骨组织工程中的应用,应用基因重组技术,将已经克隆的bFGF基因从PBR322-bFGF载体上亚克隆到真核表达载体pcDNA3.1上,构建的重组质粒经脂质体介导转染3T3细胞,36h后观察瞬时表达情况,酶切,PCR和DNA测序结果均证实了插入片段的正确性,免疫组织化学检测bFGF的表达分泌情况,结果显示部分经转染的细胞呈阳性(棕色颗粒)。结果表明已成功构建了bFGF真核表达载体pcDNA3.1-bFGF,并且bFGF能够在3T3细胞表达。  相似文献   
917.
对产气荚膜梭菌α毒素的组成、结构、理化性质、作用机理、检测及分子遗传等方面的研究进展作了简要综述。  相似文献   
918.
大肠杆菌caiE基因的克隆与高效表达   总被引:1,自引:0,他引:1  
用聚合酶链反应(PCR)从大肠杆菌K12s中扩增大肠杆菌肉碱代谢相关酶基因cai E,将其克隆到克隆载体pBluescripy SK中,测序表明:该基因有612bp,与文献报道相比,有10个核苷酸不同,相应的翻译氨基酸有6个相异,将该基因重组到ColE1为复制子,T7为启动子控制下的分泌型表达载体pET-22b( )中,构建表达质粒pETCaiE,重组到载体pACYC184中构建以p15A为复制子,Lac为启动子的表达质粒pACYC-CaiE;重组到载体pWSK129中,构建以pSC101为复制子,T7为启动子的表达质粒pSC-CaiE。上述表达质粒转化大肠杆菌BL21(DE3),经1mmol/L异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)诱导后,均可表达,SDS-PAGE分析表明表达蛋白分子质量约26ku,表达量占菌体总蛋白质的比例分别为pETCaiE30%,pACYC-CaiE8%,pSC-CaiE5%。  相似文献   
919.
目的 :研究新基因SNC 6 6和SNC 73的表达状况 ,并探讨其与大肠癌发生的相关性。方法 :采用体外转录的方法合成地高辛标记的探针 ,并用它进行cRNA/mRNA原位分子杂交 ,检测37例大肠癌标本及其相应正常大肠粘膜中SNC 6 6和SNC 73两基因表达mRNA的状况 ,并加以比较。结果 :SNC 6 6和SNC 73基因只在上皮细胞和淋巴细胞中表达 ,在大肠癌组织中都存在明显的表达缺陷 ,尤其以SNC 73的表达缺陷更明显。SNC 6 6在粘膜绒毛上多呈梯度性表达 ,以隐窝处最深 ,到绒毛顶端逐渐变淡 ;SNC 73则多呈均一性表达。结论 :SNC 6 6和SNC 73是表达行为、代谢途径均有所不同的两个免疫球蛋白样大肠癌负相关基因 ,可以作为候选大肠癌抑癌基因加以进一步研究  相似文献   
920.
实时定量聚合酶链反应的研究及应用(综述)   总被引:2,自引:0,他引:2  
实时定量聚合酶链反应(real-time quantitative PCR,RQ-PCR)是综合PCR、分子杂交和酶动力学的一种新技术,它根据荧光共振能量转移(fluorescence resonance energy translation,FRET)的原理进行。目前已经成功地开发出TayManTM、molecular beacon probe、amplifluor technologies、LightCycler和single-labeled probe几种相关的技术,并广泛地应用于病毒学、遗传性疾病和肿瘤等方面的诊断检测。实验研究表明:RQ-RCR作为一种快速、准确的核酸检测方法,在临床及生物学研究方面均具有相当的实用价值。  相似文献   
设为首页 | 免责声明 | 关于勤云 | 加入收藏

Copyright©北京勤云科技发展有限公司  京ICP备09084417号