家蚕血淋巴蛋白的发育变化和BmLSP的纯化

对 1～ 5龄的家蚕幼虫血淋巴取样 ,通过十二烷基硫酸钠 -聚丙酰胺凝胶电泳(SDS -PAGE)观察并分析家蚕幼虫血淋巴主要蛋白的发育变化 ,对其中的一种主要蛋白即家蚕幼虫血清蛋白 ,通过硫酸铵沉淀、阳离子交换柱层析、凝胶过滤纯化至均一     

家蚕染色体的C-带及其扫描电镜的初步研究

以家蚕早期胚为材料，对有丝分裂染色体进行了C-带的研究以及扫描电镜的观察．结果表明大多数分裂相都显示染色体上有C-带，其中4条染色体上常有C-带深染；性染色体中Z染色体亚端部普遍显示有C-带．表明家蚕染色体C-带可能属于非着丝粒型C-带，与其弥散型着丝粒理论相辅．     

桑蚕蛹皮化学成分的分析及其显微结构的表征

对桑蚕蛹皮的成分、结构进行了化学及扫描电镜分析，确定其含有的主要成分及含甲壳素的数量，并对其中的甲壳素、蛋白质和无机盐三者之间的存在方式进行了观察，研究结果表明，蛹体中的甲壳素与灰分主要含有蛹皮中，甲壳素占整个蛹体成分的２．７１％，占蛹皮重量的２５．５％，蛹皮外表面呈规整的多边形网状结构，蛹皮中蛋白质与蜂窝状的甲壳素相结合，呈层状分布，颗粒状的无机盐填充在甲壳素／蛋白质复合物构成的蜂窝状的空隙中，     

家蚕微孢子虫侵染家蚕胚胎细胞与草地贪夜蛾细胞的病变比较

家蚕微孢子虫(Nosema bombycis)是引起家蚕微粒子病的病原,是一种无线粒体的专性细胞内寄生的原虫.将N.bombycis经KOH处理后,接种于家蚕胚胎细胞(BmE细胞)和草地贪夜蛾卵巢细胞(Sf21).用倒置显微镜对微孢子虫在宿主细胞中感染增殖过程中的形态变化进行了跟踪观察,比较两种细胞接种N.bombycis后所出现的形态学变化.接种后第12天起,两种细胞内均充满不同发育阶段的孢子,并可见大量的胞外游动.在感染晚期,Sf21中有许多孢子从细胞中逸出,留下许多空泡,细胞还保持一定的完整性,而家蚕胚胎细胞则在感染后期完全崩解.这种差异可能是Sf21作为一种非原宿主细胞,对N.bombycis的感染有一定耐受性有关.     

家蚕碱性磷酸酶的功能基团研究

用PCMB、NBS、PMSF、TNBS、SUAN、DTT、BrAc、IAc等在一定条件下选择性修饰家蚕碱性磷酸酶的部分氨基酸残基,对酶活力的变化进行测定.结果表明:PMSF、SUAN、BrAc、IAc和TNBS的修饰能显著抑制酶的活性,且酶活力降低程度与修饰剂的浓度相关;PMSF、DTT和NBT的修饰对酶的影响较小.初步认为,巯基和组氨酸的咪唑基可能是家蚕碱性磷酸酶的必需功能基团,赖氨酸残基和二硫键对保护酶的催化能力是必需的.     

家蚕新的非编码RNA功能初探

构建了家蚕50～500 nt非编码RNA的cDNA文库,发现了189个新的ncRNA,其中一个小RNA-Bm-86在家蚕幼虫和蛹中的表达量显著高于卵和成虫.利用生物信息学软件对该ncRNA的特性及其与上下游基因的关系进行了深入分析,并利用Northern杂交和半定量RT-PCR技术对该ncRNA与其宿主基因在家蚕不同组织的表达情况进行了研究.结果发现,该ncRNA属于H/ACA box snoRNA家族,是由家蚕eIF5A基因的第二个内含子转录产生的,且在家蚕中没有明显的靶标位点.分析其上下游基因结构发现,在其上游263 bp处存在着一个可能的启动子位点,表明其有独立转录的倾向.进一步分析Bm-86与其宿主基因eIF5A在家蚕不同组织部位的表达情况发现,二者在表达上存在着负相关的关系,且该现象在丝腺中尤其明显.推测Bm-86可能通过影响eIF5A基因的表达参与到家蚕丝腺发育调控过程中.     

家蚕卵蛋白的 SDS-PAGE 分析(动物科学)

本研究探讨了蛋白质提取方法、十二烷基磺酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)条件对家蚕卵蛋白分离效果的影响。分别用裂解液提取法、TCA沉淀法、冷丙酮沉淀法和TCA-丙酮沉淀法制备蛋白质样品,然后进行6%～12%、6%～15%两种梯度胶的SDS-PAGE,获得了不同提取方法和电泳条件下的电泳图谱用以比较家蚕卵蛋白分离效果。结果表明用TCA-丙酮沉淀法除盐,再用含9 mol.L-1尿素、4%CHAPS、1%DTT的裂解液重悬,最适合家蚕卵蛋白提取;6%～12%梯度胶对家蚕卵蛋白的分离较为适宜。利用这一优化方法对家蚕感染微孢子虫的蚕卵和正常蚕卵进行了比较研究,在分子量66 kD和85 kD处找到了与感染微孢子虫相关的蛋白,为进一步进行正常蚕卵和感染微孢子虫蚕卵的蛋白质组学研究奠定了基础。     

^3H—GLY对家蚕蛋白质生物合成参入活性的研究

氚标记甘氨酸（＾３Ｈ－Ｇｌｙ）对家蚕蛋白质生物合成参入试验的研究结果表明,＾３Ｈ－Ｇｌｙ对家蚕５龄幼虫的标记剂量和标记时间以每头蚕５μＣｉ和３０ｍｉｎ为宜;＾３Ｈ－Ｇｌｙ对家蚕几个主要器官的蛋白质参入活性有很大差异,进入蚕体的＾３Ｈ－Ｇｌｙ大部分参入到后部丝腺蛋白质合成中。     

球毛壳菌引起杭白菊叶枯病的首次报道

对浙江磐安地区发生叶枯症状的杭白菊进行病原菌分离鉴定,经形态学和分子生物学分析发现病原菌为球毛壳菌（Chaetomium globosum）。致病性测定后显示该菌能引起杭白菊枯叶和叶边缘萎缩等症状,与田间观察到的症状一致,符合科赫氏法则,这是目前国内外首次报道的一种新病害。