重组人膜联蛋白的尿激酶原融合蛋白衍生物的复性及制备

构建重组人膜联蛋白的尿激酶原融合蛋白基因，并在大肠杆菌中实现高效表达．目标基因表达产物以包涵体形式存在于细菌细胞质中．通过稀释复性的实验方法，对目标基因表达产物进行了变复性处理及进一步的分离纯化，最终制备出具有正确空间结构的有活性的尿激酶原融合蛋白衍生物．     

核桃多糖研究进展

核桃是世界四大干果之一,营养与保健价值极高。近年来植物多糖的生物活性备受关注,研究也越来越深入,但有关核桃仁多糖的研究极少。核桃各组织部位都含多糖,为更好地开发核桃多糖营养健康作用,特别是核桃粕多糖提取利用,对近年来国内外核桃多糖的提取、分离纯化、测定、分子结构特性及生物活性研究文献进行了全面、深入的梳理与分析,获得了一系列对核桃多糖研究有意义的数据信息:超声和微波辅助热水提取工艺效果好,高于85℃和150min的提取工艺、体积分数超过90%的乙醇沉淀多糖得率高；Sevag法脱蛋白,再分别用不同截留分子质量透析与DEAE-Sepharose、Sephadex纯化可获得分子质量在7015～133021u的不同多糖；不同组织部位核桃多糖都含有葡萄糖、鼠李糖、半乳糖、木糖、阿拉伯糖和甘露糖,表明核桃多糖以酸性杂多糖为主,并呈现抗癌、抗氧化、降血糖、抑菌、预防老年痴呆等多种生物活性。核桃多糖研究对核桃产业链的提质增效具有重要的实践意义。     

多溶剂萃取法分离制备绿衣枳壳中枳属苷

目的建立一种从绿衣枳壳中快速分离制备高纯度枳属苷的方法。方法采用多溶剂萃取法将枳属苷从绿衣枳壳乙酸乙酯萃取部分粗提物中分离出来,并通过多次试验优化了多溶剂萃取法条件,枳属苷最佳分离实验条件为:萃取溶剂V(甲醇):V(氯仿)=6:5,分相液为水,V(萃取溶剂):V(分相液)=11:4。结果该法所得的枳属苷单体,经HPLC峰面积归一化法计算其纯度均不低于98%。结论多溶剂萃取法是一种简单。高效的分离制备绿衣枳壳中枳属苷的方法。     

化学吸附法净化PH3气体的研究

文章利用自制的固定床反应器,研究了以活性Ca(ClO)2作为吸附剂对PH3气体的动态吸附性能。考察了反应温度、湿度、颗粒粒径及停留时间对吸附性能的影响,确定了最佳的吸附条件,并对吸附前后的吸附剂进行了化学成分分析、红外表征和XPS表征。结果表明,最佳反应温度为35℃;水蒸气对吸附过程有关键的催化作用;减小粒径、增大停留时间会提高吸附容量;在吸附PH3过程中,Ca(ClO)2中的氧化态氯与PH3发生氧化-还原反应,氧化态氯被还原为负价态氯,PH3被氧化为磷酸或磷酸盐。     

多糖的提取纯化研究

研究了多糖的提取纯化方法,提出了将来的研究和发展方向.     

人类TBC1D7蛋白的表达纯化及其在mTOR通路中的作用机制研究

mTOR信号通路在真核细胞代谢调控中发挥着关键的调控作用，该通路核心元件mTORC1复合物的活性受其上游TSC复合物负调控，TSC复合物包括TSC1、TSC2、TBC1D7三种蛋白.以TBC1D7蛋白为研究对象，通过氨基酸序列比对显示多物种来源的TBC1D7蛋白具有较高的保守性，且蛋白三维结构分析证实其分子表面存在高度保守区域.随后，构建了人类TBC1D7蛋白原核表达载体并在大肠杆菌中表达得到全长TBC1D7蛋白，经过酶切去除标签和凝胶排阻层析得到了高纯度TBC1D7蛋白.另一方面，通过在HCM细胞中对TBC1D7进行敲降和过表达，证实了TBC1D7的表达会直接升高mTORC1的活性；反之，升高TBC1D7的表达则会抑制mTORC1的活性.本研究表达和纯化了人类TBC1D7蛋白，并探讨了在人类心肌细胞中TBC1D7的表达与其下游mTOR信号通路之间的联系，为人类TBC1D7蛋白和mTOR信号通路的进一步研究打下了良好基础.     

中国地鼠的剖宫产净化

目的 通过生物净化使中国地鼠的微生物、寄生虫质量控制级别达到清洁级标准。 方法 普通级中国地鼠剖宫产后获得的仔鼠由清洁级 ICR 小鼠代乳,记录仔鼠 0 ~ 30 日龄的体质量变化和存活情况,对离乳后的仔鼠进行微生物、寄生虫质量检测。 结果 本次实验对 24 窝普通级中国地鼠进行剖宫产手术,共获得新生仔鼠 109 只,其中 5 只死胎仔,最终代乳成活 56 只,代乳成功率为 53. 85%,离乳后的地鼠经随机检测均达到清洁级国家标准。 结论 本研究对中国地鼠进行了生物净化,进一步完善了中国地鼠的质量标准化,为中国地鼠的生产、应用提供了质量保障。     

重组金针菇免疫调节蛋白的纯化及生物活性研究

目的研究重组的金针菇免疫调节蛋白(re FIP-fve)对小鼠脾淋巴细胞的增殖作用、诱导小鼠脾淋巴细胞对白细胞介素-2(IL-2)的促分泌作用及对血细胞的凝集作用.方法采用离子交换色谱法,利用SP Sepharose XL色谱柱纯化重组的免疫调节蛋白;将纯化后的蛋白作用于小鼠脾淋巴细胞和血细胞,用MTT法检测蛋白对脾细胞增殖和血细胞凝集的影响;用ELISA法检测蛋白对淋巴细胞分泌细胞因子的作用.结果经过SP Sepharose XL色谱柱纯化后可获得纯度为86%的重组蛋白;纯化蛋白浓度在80μg/m L时最大限度促进细胞增殖;蛋白浓度在2μg/m L时开始出现凝血;ELISA检测结果显示:重组的金针菇免疫调节蛋白能明显增强小鼠脾淋巴细胞分泌白细胞介素2(IL-2)的水平.结论经过SP Sepharose XL色谱柱纯化后可获得纯度较高的蛋白;纯化后的蛋白与小鼠脾淋巴细胞共同培养,不仅可以促进脾细胞的增殖,而且能增强小鼠脾淋巴细胞分泌白细胞介素2的水平;蛋白与血细胞共同培养能够促进血细胞的凝集.     

中华锯齿米虾卵黄蛋白的纯化鉴定

为了研究中华锯齿米虾卵黄蛋白的性质,利用聚丙烯酰胺凝胶电泳,采用不同的染色方法对其进行分析鉴定,并采用电泳洗脱法从中华锯齿米虾成熟卵巢中将其分离纯化.研究结果表明,中华锯齿米虾成熟卵巢中的卵黄蛋白为糖脂复合蛋白,该蛋白分子质量为434 ku.利用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳技术分析该卵黄蛋白由3个主要亚基组成,分子质量分...     

枇杷核醇腈酶的高效分离纯化及酶学性质研究

以枇杷"解放钟"的核为原料,根据醇腈酶高耐热性的特点,采用60℃热处理-DEAE-Sepharose FF柱分离组合技术,从枇杷核中获得电泳纯的醇腈酶.最终纯化酶的比活力达到232 U·mg-1,酶活力回收率高达64%.所制备的的R型醇腈酶具有高度的光学选择性,催化苯甲醛与丙酮氰醇反应产生R型扁桃腈,对映体过量值达到9...