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871.
植物基因的克隆与转化研究进展 总被引:2,自引:0,他引:2
朱玉贤 《河北科技大学学报》1999,20(2):5-9,28
综述了近20a来植物基因工程、特别是DNA重组技术和基因遗传转化技术的发展历程,比较了各种分子克隆和转化方法的优劣,将有助于广大青年学者了解并掌握现代分子生物学的最新动态 相似文献
872.
BAC-FISH技术是90年代开始发展起来的一种新的定位技术。由于该技术较常规FISH技术的信号检出率高得多,运用该技术已将一些重要抗性基因定位到水稻染色体上。随着该技术的不断发展,将在栽培稻和野生稻比较作图研究中发挥更大的作用。 相似文献
873.
建立并优化HRM方法检测AKT1基因的E17K(49G>A)突变,并在85例非小细胞肺癌中应用该法检测AKT1基因的E17K突变.设计、合成针对AKT1基因的E17K突变的引物、探针,优化不对称PCR条件及高分辨率熔解曲线(HRM)基因突变分析方法.对85例非小细胞肺癌标本提取的基因组DNA,应用HRM基因突变分析方法和直接测序的方法检测了AKT1基因的E17K突变情况.经优化后,设计的引物在不对称PCR反应条件下可扩增出良好的条带.检测探针与野生型模板的扩增产物杂交后,其解链温度要高于与突变型产物杂交的解链温度.野生型和突变型的质粒模板所产生的熔解曲线可见显著差异,相应的Tm值相差约 3.5℃.经HRM基因突变分析方法和直接测序法检测,在85例非小细胞肺癌标本检测到1例AKT1基因的E17K位点为杂合突变型,其余均为野生型.本研究建立的对AKT1 E47K突变检测的HRM方法是一种灵敏、准确、快速的方法.另外,本研究仅在非小细胞肺癌患者中发现频率极低的AKT1 E47K突变. 相似文献
874.
以大肠杆菌启动子探测质粒pKK232-8为载体经三亲本杂交用4组限制性内切酶分别消化古生菌盐生盐杆菌R1的染色体DNA,在体外进行重组,转化E.coliDH-5α感受态细胞,得到12个转化子(T1 ̄和2),其抗性水平分布在10 ̄500mg/L的区间内,将这些转化子所含质粒分别命名为PSX1 ̄PSX12,限制性酶切分析表明,这些质粒各插入了一段不同的外源DNA片段,杂交分析表明,抗性最强的转化子T1 相似文献
875.
香石竹斑驳病毒上海分离株是从上海地区栽培的香石竹上分离并鉴定的,以提纯的病毒为材料,SDS-酚法纯化的基因组RNA作为模板,RT-PCR合成并扩增外壳蛋白基因cDNA,cDNA克隆于pGEM-T easy vector,转化为E.coliJM109。阳笥克隆pTCaCP经序列分析,证明带有全长CP基因。 相似文献
876.
877.
PCR扩增人外周血淋巴细胞抗体基因的探讨 总被引:1,自引:0,他引:1
采用RT-PCR法,以一组人抗体重链和轻链简并引物,直接从人外周血混合淋巴细胞中扩增出抗体重链Fd和κ轻链基因.结果提示:用Trizol试剂提取细胞总RNA,以Olig(dT)引导合成cDNA第一链,再经PCR扩增的方法,是值得优先采用的方法.细胞总RNA的提取不必追求高纯度,少量外周血即足以满足构建抗体库所需,简并引物可获得良好的扩增效果,为构建噬菌体抗体库奠定了基础 相似文献
878.
用构建好的乙肝病毒基因亚克隆pBamHIHinclCAT2转染人特异性肝癌细胞HepG2及人非特异性肝癌细胞Hela,通过相应配体的刺激,使细胞内氯霉素乙酰基转移酶活力明显增强.进一步的体外蛋白阻滞分析,确定在该亚克隆上含有一新的维甲素受体反应元件.此元件序列极端保守,由相隔6个碱基的重复序列构成 相似文献
879.
籍助小麦标准品系“中国春”缺四体及双端体进行基因定位,现已将三十多种酶的九十多个位点定位于染色体或染色体臂上.通过对同工酶酶谱的分析,可以判断出个体的基因型,据此可推导出群体中有关基因及基因型频率,进而研究群体的遗传结构.此项研究工作对群体改良方案的确立和实施具有重大的指导意义 相似文献
880.
利用AFLP-银染法筛选与抗甘蓝黑腐病性状连锁的分子标记 总被引:7,自引:0,他引:7
利用AFLP-银染法在一对花椰菜抗、感黑腐病的近等基因系中筛选到四个与抗黑腐病性状、一个与感黑腐病性状连锁的DNA 分子标记.对其中一个400bp 的抗病标记进行Southern 杂交检测,结果表明该标记在抗病品系中存在明显的杂交信号,而在感病品系中无杂交信号.该标记测序后,通过Genbank 进行同源性检测,发现其与拟南芥菜BAC克隆F7N22 部分序列有75% 的同源性.该BAC克隆位于拟南芥菜5 号染色体的黑腐病抗性基因(rxc2)附近.这意味着该标记可能与甘蓝黑腐病抗性基因紧密连锁. 相似文献