同源四倍体芦荟的诱导研究

取库拉索芦荟 ( Aloe vera L .)的茎段、叶片作外植体接种于 MS附加不同激素的培养基上 ,诱导出丛生芽、微块茎、愈伤组织 ,将丛生芽、微块茎、愈伤组织分别用浓度为 0 .0 1% ,0 .0 2 % ,0 .0 5 %的秋水仙素以不同的方法和时间处理 ,丛生芽和微块茎能较好地诱出变异体 ,其中以 0 .0 2 %的秋水仙素棉球覆盖处理丛生芽 4 8h诱变效果最好 .变异体叶片肥厚、根粗壮 .筛选稳定的变异体继代 ,经染色体数目观察 ,二倍体植株染色体数目为 2 n=2×x=14 ,x=7,不同变异体染色体数目不同 ,其中 80 %以上的变异体细胞染色体数 2 n=4×x=2 8,x=7,为同源四倍体 .四倍体气孔器明显大于二倍体 .四倍体试管苗在 MS BA4 mg/l NAA0 .2 mg/l可以大量增殖 ,并于 1/2 MS NAA0 .3mg/l IAA0 .3mg/l培养基上诱大量根 .试管苗移栽成活率达 90 %以上 .     

半枝莲多糖的研究 分离纯化及其基本性质

半枝莲经乙醚脱脂,热水提取,Sevage 法脱蛋白质,乙醇沉淀后得半枝莲多糖粗品.经 DEAE-纤维素(DE-52)柱层析和 Sephadex G-200凝胶过滤得半枝莲多糖精品.紫外光谱分析表明不含有核酸和蛋白质.经乙酸纤维薄膜电泳、琼脂糖电泳和 Sephadex G-200凝胶过滤法柱层析结果表明均为单一条带或者单一峰,证明此多糖精品是均一的.分析表明此多糖精品的总糖含量以半乳糖为标准为115%,以葡萄糖为标准为56%,以糖原为标准是58%.用 SephadexG-200分子筛法测得平均分子量为1×10~4道尔顿.体外实验表明半枝莲多糖对移植肉瘤 S-180细胞和腹水癌细胞均有一定的抑制作用.     

知母多糖PS—Ⅰ的分离、纯化和分析

知母根茎(Anemarrhna、asphodeloides Bge)经热水提取,Sevage法除蛋白,乙醇沉淀,Sepharose 2B柱层析,得知母多糖pS-Ⅰ精品,经柱层析鉴定为单一对称性洗脱峰,总糖含量为74.3％,蛋白质含量为18.2％。单糖组成为D-甘露糖和D—葡萄糖,平均分子量约为190万。     

穿山龙多糖分离纯化工艺的研究

以粗多糖得率为指标，比较水醇法、水提ZTC吸附澄清剂法和超声波法三种提取方法，并以穿山龙多糖含量为指标，考察采用水醇法提取穿山龙多糖时，回流时间、固液体积比，提取次数对多糖含量的影响；同时，用硫酸-苯酚法对穿山龙粗多糖中的多糖含量进行了测定．实验结果表明，水醇法提取的多糖得率高于水提ZTC吸附澄清剂法和超声波法，分别提高6．0倍和6．6倍．水醇法的最佳提取工艺条件：回流提取时间90min，液料比1：10，提取次数3次．     

甲醛对芦荟POD酶活性的影响

实验以玻璃箱模拟室内空间环境,应用乙酰丙酮分光光度法和邻苯三酚自氧化法测定在不同甲醛含量下芦荟对甲醛的吸收及其体内过氧化物酶(POD)活性的变化情况.结果表明,有芦荟存在时甲醛气体含量显著下降,芦荟体内的POD酶活性增强;随着通入甲醛气体量的增加,芦荟对甲醛的吸收量显著增加,POD活性的提高也越来越显著.说明芦荟体内POD酶对甲醛气体的胁迫存在着一定程度的生理应激反应.     

3种芦荟多糖抗肿瘤作用的比较分析

对3种芦荟多糖体内抗肿瘤药效及其对荷瘤小鼠免疫功能的影响进行了比较研究.结果表明:3种芦荟多糖对S180实体瘤均有一定的抑制作用,其中在100mg kg剂量下效果最佳,其抑瘤率分别为50 58%(PAVL)、43 51%(PAAM)和40 13%(PAC);除PAAM低剂量组外,其他各组均可显著延长H22小鼠的生存时间(P<0 05或P<0 01),其中PAVL在100mg kg时生存期达(21 45±3 47)d,明显优于AP对照组(P<0 05);此外,5-Fu组胸腺指数和脾指数较生理盐水组有所降低,而各给药组(个别低剂量组除外)的胸腺指数和脾指数明显提高,与生理盐水组比较有显著性差异(P<0 05或P<0 01),与5-Fu组比较有极显著差异(P<0 01).结论:3种芦荟多糖均具有一定的抗肿瘤和免疫调节作用,但在同等剂量下,PAVL各组对S180小鼠瘤重、胸腺指数和脾指数及其对H22小鼠的生命延长率等均优于PAAM和PAC.     

中华芦荟愈伤组织的诱导

以中华芦荟幼苗茎段为外植体,以MS为基本培养基,通过添加不同浓度的生长素、细胞分裂素或两者组合,以及添加Vc或活性炭(共350种组合),研究中华芦荟愈伤组织的诱导及生长情况.结果表明, 在单独使用不同种类的生长素时,不同浓度的生长素诱导的愈伤组织频率差异明显,且愈伤组织的生长状态也各异;单独使用细胞分裂素时,愈伤组织的诱导率极低.当组合不同浓度和种类的生长素和细胞分裂素时,愈伤组织诱导频率差异显著;同时发现在减轻愈伤组织褐化的效果上,Vc较活性炭好.通过对愈伤组织诱导结果的比较,MS 2.0 mg/L 6-BA 0.5 mg/L 2,4-D 10 mg/L Vc为中华芦荟愈伤组织诱导的较好培养基,愈伤组织诱导率达到91.4%,且愈伤组织生长较旺盛.     

中华芦荟成熟叶组织培养的研究

以中华芦荟成熟叶为外植体,接种于9组不同2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-D)和6-苄基腺嘌呤(6-BA)浓度配比的脱分化培养基中,诱导外植体的脱分化形成愈伤组织。研究表明,中华芦荟叶愈伤组织的最佳培养基为MS+0.5mg/L(2,4-D)+3mg/L(6-BA)+30g/L蔗糖+10g/L琼脂+1.0g/L活性炭;诱导不定芽的适宜培养基为MS+1mg/L(2,4-D)+3mg/L(6-BA)+30g/L蔗糖+10g/L琼脂+0.7g/L活性炭;及诱导生根的适宜培养基为1/2MS+0.2mg/Lα-萘乙酸(NAA)+20g/L蔗糖+10g/L琼脂+0.5g/L活性炭,生根率达100%.     

马齿苋多糖组分POP I对氧化损伤INS-1细胞的影响

目的：观察马齿苋多糖组分（POP I）对四氧嘧啶致大鼠胰岛素瘤细胞（INS-1 cell line）氧化损伤的影响.方法：不同浓度POP I （0.05,0.1,0.5,1.0,2.0,5.0和10.0 mg/mL）作用四氧嘧啶氧化损伤的INS-1细胞1d、3d和5d后,分别测定其细胞存活率、胰岛素分泌量、超氧化物歧化酶（SOD）活性、丙二醛（MDA）含量和谷胱甘肽（GSH）含量.结果：POP I可明显抑制由四氧嘧啶所致的INS-1细胞存活率降低、SOD活性下降、GSH浓度减少和.MDA含量增加,并存在时-效和量-效关系;在5.6 mmol/L或16.7 mmol/L葡萄糖刺激下,POP I浓度依赖性地促进了INS-1细胞分泌胰岛素.结论：一定浓度范围内,POPI对四氧嘧啶致胰岛β细胞损伤有明显的保护作用,其作用机理可能与POP I提高细胞抗氧化能力有关.