陕西蝮蛇二亚种血液形态学观察

对陕西产蝮蛇二亚种──秦岭亚种（ＡｇｋｉｓｔｒｏｄｏｎｈａｌｙｓｇｉｎｌｉｎｇｅｎｓｉｓＳｏｎｇ）和短尾亚种（Ａ．ｈ．ｂｒｅｖｉｃａｕｄｕｓＳｔｅｊｎｅｇｅｒ）血液形态学作了研究，鉴识了各类血细胞形态，并在两亚种间作了比较．     

北部湾金黄水母Chrysaora helvola Brandt刺细胞毒液溶血活性

【目的】探讨金黄水母Chrysaora helvolaBrandt刺细胞毒液(nematocysts venom,NV)的红细胞溶血活性特征及可能机制。【方法】通过分光光度法测定红细胞溶解释放血红蛋白的量来确认不同条件和药物对NV诱导红细胞溶血行为的影响。【结果】NV诱导的红细胞溶血与其总蛋白浓度存在依赖关系。溶液pH值、大分子非电解质渗透压保护剂PEGs均能显著影响其溶血活性;非电解质小分子糖类渗透压保护剂D-甘油和D-半乳糖对溶血活性影响很小,但D-葡萄糖能显著延缓溶血。NV同时具有Ca~(2+)依赖的弱磷酸酯酶A2(PLA_2)活性,且受组氨酸烷基化试剂p-BPB抑制。这一PLA2活性可能对其红细胞溶血活性也有贡献。【结论】NV的红细胞溶血活性可能由膜穿孔机制和所含PLA_2酶成分造成,并受到含葡萄糖单元结构的糖受体调节。     

竹叶青(Trimeresurus stejnegeri)蛇毒五种磷脂酶A2的分离纯化和氨基酸序列分析

用超细Sephadex G-75凝胶色谱和C4反相高效液相色谱从竹叶青（Trimeresurus stejnegeri）蛇毒中分离纯化5种磷脂酶A2，并分别命名为PLA2－I（SWISS－PROT，P82892）、Ⅱ（SWISS-PROT，P82893）、Ⅲ（SWISS－PROT，P82894）、Ⅳ（SWISS－PROT，P82895）、V（SWISS－PROT，P82896）。SDS－PAGE测定它们的分子量分别为14．0、15．8、15．0、14．0和14．0kDa。等电聚焦电泳测得PLA2－I、Ⅱ、Ⅲ呈碱性，等电点大于8．8；PLA2－Ⅳ和V呈酸性，等电点分别为5．2和4．7。PLA2－Ⅳ和V有水解卵磷脂活性。用自动Edman降解法测定了PLA2－V的全部氨基酸序列和PLA2－I、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ的N－端部分氨基酸序列。PLA2－V由122个氨基酸残基组成，有14个Cys，并与其它来源的PLA2的氨基酸序列进行了比较。     

桂北五步蛇纤溶酶金属蛋白酶原基因的初步研究

从桂北五步蛇毒腺中抽提蛇毒总ＲＮＡ,采用一步法（ＲＴ－ＰＣＲ和ＰＣＲ在同一试管内进行）扩增纤溶酶金属蛋白酶原基因,并进行电泳检测,可见３条特异的ＤＮＡ条带,分别约为１．５Ｋｂ、１．３Ｋｂ和８００ｂｐ,利用平端连接的方法将其中的８００ｂｐＰＣＲ产物克隆至ｐＧＥＭ－Ｔ Ｅａｓｙ载体,挑选白色菌落,用酶切和ＰＣＲ法对其进行鉴定。     

蕲蛇毒中抑制ACE活性组分的分离纯化与表征

蕲蛇粗毒流经强阴离子交换色谱POROS 2 0HQ柱 ,经毛细管电泳仪检测 ,5个蛋白峰具有ACE抑制活性 ,对最强的活性峰进行PAGE切割电泳的分离 ,得到 3条带 ,经检测只有第三条带 (AI - 3)具有ACE抑制活性 .该组分的分子量为 2 0 2 0 0 (非还原 ) ,加DTT处理后 ,分子量为 2 590 0 .其IC50 为 0 .10mmol/L .     

沼生花褶伞粗毒的毒性实验研究

用花褶伞粗毒液对美洲蜚蠊进行腹腔注射、小鼠脑室注射、蟾蜍坐骨神经腓肠肌、蛙心灌流实验,检测了该粗毒液的毒性.结果表明,花褶伞粗毒对昆虫毒性不明显,对哺乳动物有一定毒性,可能含有神经致幻毒素裸盖菇素和一些拟胆碱成分.     

平颏海蛇毒腺cDNA表达文库的构建

以直接表达载体质粒pc DNA3为载体,成功构建了一个高质量的平颏海蛇毒腺cDNA表达文库,这是国内首个海蛇cDNA文库,通过对亚文库克隆的大规模序列测定和分析,发现了38个海蛇新基因序列,其中包括神经毒素基因,磷酸脂酶A2基因和半胱氨酸丰富毒蛋白基因共10个编码海蛇毒素蛋白的新基因。     

野口英世的蛇毒研究

二十世纪初多次获得诺贝尔生理学或医学奖提名的日本微生物学家野口英世因梅毒、黄热病等研究著称于世,但人们对他赴美之初的蛇毒研究知之甚少。不过,正是这项研究使其获得了美国免疫学界的认可,并成为首个在洛克菲勒研究所任职的亚洲学者。通过梳理野口早期发表的论文发现,他曾深入研究过蛇毒的凝血与溶血机制、蛇毒与动物血清的作用和抗眼镜蛇毒血清的效用,不仅阐明了蛇毒的毒理、率先研制出抗响尾蛇毒的血清,还论证了动物血清中抗体-补体的作用方式。文章认为,初出茅庐的野口研究蛇毒即取得成功的主要原因有:一、抗体-补体理论作为一种新兴的免疫学理论,为动物毒素研究提供了借鉴;二、刚刚问世的免疫学减毒方法为研制抗蛇毒血清奠定了基础;三、西蒙·弗莱克斯纳和塞拉斯·米切尔的悉心指导;四、野口具有攻坚克难的胆识、勤奋好学的品性和坚忍不拔的毅力。     

国产六种小型蝰科毒蛇蛇毒免疫原性比较

以国产小型蝰科毒蛇短尾蝮（Gloydius brevicaudus）、岩栖蝮（Gloydius saxatilis）、乌苏里蝮（Gloydius ussuriensis）、山烙铁头（Ovophis monticola）、原矛头蝮（Protobothrops mucrosquamatus）和竹叶青（Trimeresurus stejnegeri）蛇毒为对象，用国产商用抗蝮蛇毒血清和抗五步蛇毒血清分别检测这6种蛇毒的免疫原性。间接ELISA和western blot两种方法的检测结果表明：6种蛇毒有共同的抗原组分，且在免疫反应中大部分组分表现出免疫原性；同种蛇毒和抗血清之间显示出最高的免疫结合强度；近缘物种间的免疫结合强度更接近；随着抗体浓度的升高，免疫结合强度增加。抗蝮蛇毒血清对短尾蝮、乌苏里蝮和岩栖蝮蛇毒的免疫中和效价高于抗五步蛇毒血清；两种抗蛇毒血清中和山烙铁头、原矛头蝮和竹叶青蛇毒的效价相近。     

虎纹捕鸟蛛（Selenocosimia huwena）粗毒对蟾蜍神经肌肉接头传递的影响

１０－５～１０－４ｇ／ｍｌ虎纹捕鸟蛛粗毒对蟾蜍坐骨神经肌肉标本有阻遏作用，１×１０－４ｇ／ｍｌ粗毒发生阻断的时间为３８ｍｉｎ，但不改变神经干动作电位，不影响肌肉对直接刺激的反应。阻断后肌肉对间接强直刺激仍可发生强直收缩；粗毒对蟾蜍坐骨神经肌肉标本的阻断作用表现为：初期４～５０秒的收缩增强继而转向抑制；粗毒可对抗箭毒的阻断作用；蟾蜍在体坐骨神经肌肉标本可被粗毒阻断，但阻断后可以恢复；粗毒不改变蛙腹直肌对Ａｃｈ的敏感性，粗毒中含有拟胆碱成份。箭毒可以阻止粗毒对蛙腹直肌的拟胆碱效应；该粗毒对蟾蜍坐骨神经肌肉标本的阻遏作用发生在神经肌肉接头，粗毒中含有拟胆碱组份，此组份可能通过后膜去极化阻断神经肌肉接头。