海洋细菌NTa发酵产琼胶酶条件的初步优化

利用选择性培养基从厦门红树林泥土样品中分离得到一株具有较高琼胶酶活力的海洋细菌NTa,通过16S rRNA分析,将该菌株归属为Stenotrophomonas sp.NTa.对该菌株发酵产琼胶酶的条件进行初步优化,结果表明:菌株NTa产琼胶酶的最佳碳源是琼脂,氮源是酵母浸膏,NaCl的质量分数为5%,在28 ℃发酵培养40 h,发酵液的酶活力达到1.98 U/mL,比优化前提高了37.35%.     

Isolation and characterization of a new species of Vibrio-Vibrio olivaceus sp.nov. from diseased flounder （Paralichthys olivaceus temminck et schlegel）

One kind of pathogenic bacteria was isolated from diseased (or dead) flounder (Paralichthys olivaceus L.) which expressed bacterial septicaemia. The phenotyic information of the 10 pure cultures was studied extensively, including morphological characteristics, colony characteristics in different media, physiological and biochemical characteristics, and the mol%G C ratio of the DNA for representative strain. The results showed that the isolates belonged to a new species of Vibrio. In addition, the representative strains have been re-checked by China Center for Type Culture Collection (CCTCC), the results were the same as ours, the examined strains were also regarded as a new species of Vibrio, and designated as Vibrio olivaceus sp.nov. by its isolated fish (Paralichthys olivaceus) based on its biological properties following Rules of International Code of Nomenclature of Bacteria. In the same time, we conducted studies on the serum homology of isolates, pathogenicity of isolates by experimental infection. The results showed that all the isolates were of serologic similarity and the isolates have strong pathogenicity to flounder. Inspection to pure cultures and isolates from liver of moribund fish from infection experiment by fluorescent antibody technique showed the feasibility of fluorescent antibody technique as an auxiliary method of examination.     

鱼腥藻PCC 7120染色体上relBE同源基因的克隆及表达

为研究鱼腥藻PCC7120染色体上与relBE同源的基因asl4561和asl4562表达产物的毒素-抗毒素作用,从鱼腥藻细胞中提取总基因组DNA,设计特异引物PCR扩增目的基因asl4561和asl4562,与T载体连接后经XhoI和EcoR I双酶切并与表达载体pET28a（＋）连接,由IPTG诱导表达,并在IPTG浓度和诱导时间上对asl4561基因的表达条件进行了优化.琼脂糖凝胶电泳显示扩增出了264bp的asl4561基因和213bp的asl4562基因,SDS-PAGE检测表明成功表达出15.65kD和13.55kD的两蛋白,当诱导温度28℃、IPTG浓度0.4 mmol/L、诱导时间6h时,asl4561基因表达蛋白在细菌裂解液上清中表达量最大.     

悬铃木白粉病病原菌及其生物学特性

对近年来在南京、上海、杭州等地危害较为严重的悬铃木白粉病病原菌的无性型和有性型进行了形态学观察和分子生物学鉴定。结果表明,该病害病原的无性型为粉孢属一种(Oidium sp.),病原的有性型为孓蠹菌门的Erysiphe platani。病原菌生长的适宜温度为20~28 ℃,最适温度为26 ℃;湿度对孢子萌发的影响不大,一般环境湿度下都可萌发;分生孢子寿命约为13 d。     

一株高氯酸盐降解菌的分离及特征

利用选择性培养基从ClO4-污染的底泥样品中分离到一株具有ClO4-还原能力的细菌JD15.对其细胞形态、结构、生理特征、16S rDNA和ClO4-还原酶α亚基基因片段pcrA的编码序列分析表明,该菌株为革兰氏阴性的短杆菌,微好氧;16S rDNA序列Dechloromonas sp.SIUL(AF170356.1)的相似性为100%,将其命名为Dechloromonas sp.JD15.该菌株的最适条件为t=25℃,pH=7;能够在ρ(ClO4-)=5×10-3～5×103mg.L-1的培养基上生长;在含0.5～10 mg.L-1的ClO4-培养基中分别培养4 d和30 d后,ClO4-的降解率分别大于50%和80%,表明该菌株可去除环境中的ClO-,具有潜在的应用价值.     

Pb~(2+)和Cu~(2+)对水螅的急性毒性作用以及对SOD活性的影响

采用急性毒性实验方法研究了不同质量浓度的Pb2+和Cu2+对水螅急性毒性作用(LC50),并且测定了经Pb2+和Cu2+胁迫后水螅体内SOD的变化.结果表明,2种重金属离子毒性大小顺序为Cu2+Pb2+.Cu2+和Pb2+对水螅24,48,72,96h的LC50分别为0.33,0.28,0.24,0.22mg/L和2.17,2.05,1.58,1.04mg/L,其安全质量浓度分别为0.022mg/L和0.104mg/L.通过0.6,0.7mg/L的Pb2+溶液对水螅SOD的24h实验起抑制作用,与对照组相比,SOD活性急剧下降,变化显著(P0.05);0.7,1.5,2.0mg/L的高质量浓度溶液对水螅SOD活性基本上没有变化.通过0.15,0.20,0.25,0.30,0.35mg/L的Cu2+溶液对水螅SOD的24h实验起诱导作用,水螅的SOD活性基本上呈上升趋势,在质量浓度为0.30~0.35mg/L的范围内,SOD活性急剧上升,与对照组相比,变化显著(P0.05).     

氮和铁对小球藻和微拟球藻油脂积累的影响

以在海南分离的藻株小球藻HNCl（Chlorellasp.HNC1）和微拟球藻HNN1（Nanno-chloropsisSp.F1NNl）为材料,研究N和Fe^3＋对细胞油脂积累的影响。结果表明：N缺乏条件促进了小球藻和微拟球藻细胞的油脂积累,但对生长有抑制作用。与对照相比,培养基中Fe^3＋的缺乏抑制了小球藻的生长和油脂的积累;Fe^3＋缺乏对微拟球藻的油脂积累有抑制作用;但对其生长无明显影响。富Fen处理对小球藻的油脂积累具有刺激作用,但对微拟球藻无显著影响;富Fe^3＋和正常铁条件下小球藻和微拟球藻的生长无显著差异。     

PVC包埋苯酚降解菌TX1的研究

采用聚乙烯醇(PVA)为主要载体,添加少量壳聚糖(SA)、SiO₂和CaCO₃,利用聚乙烯醇-硼酸(PVA-H₃BO₃)包埋法,包埋苯酚降解菌TX1并制备成胶珠,研究胶珠对含酚废水的降解。通过正交实验、单因素实验和传质性能分析确定并优化包埋条件,结果表明PVA浓度8%、SA浓度0.2%、SiO₂浓度2.4%、CaCO₃浓度0.4%和饱和H₃BO₃液pH值6.7时,包埋胶珠机械强度好、结构稳定、无泄漏、固定化效果好。同时发现该条件下的固定化细胞培养12 h后对初始浓度为500 mg/L苯酚废水的降解率为78.1%。     

繁茂膜海绵共附生假单胞菌属菌株DEH138A中脱卤酶的分离纯化及性质表征

用硫酸铵沉淀,Q-Sepharose HP离子交换层析,Superdex 200凝胶过滤层析和Mono-Q离子交换层析方法,对从大连潮间带繁茂膜海绵中分离得到的1株假单胞菌DEH138A(Pseudomonas sp.DEH138A)中的脱卤酶进行分离纯化和酶学性质表征。结果显示,假单胞菌菌株DEH138A中含有一种能降解L-2-氯丙酸的L-2-卤代酸脱卤酶(L-DEX)。经纯化后,L-DEX亚基分子量为27.8kDa,全酶分子量为42.5kDa,推测其为一个二聚体蛋白。L-DEX最适pH值及最适反应温度分别为10.0和30℃,Km值为0.63mmol/L。L-DEX能够作用于多种2-卤代酸,而且对单溴乙酸的脱卤效果最好。DTT和EDTA对L-DEX无抑制作用,Cu2+和Co2+对L-DEX有明显的抑制作用。L-DEX具有立体选择性等独特的酶学特性,在环境修复、精细化工等领域具有潜在的应用价值。     

盐诱导乳清蛋白冷凝胶对双歧杆菌的保护作用

探讨盐诱导乳清分离蛋白（whey protein isolates, WPI）形成的包含双歧杆菌的乳清蛋白冷凝胶（cold-set gels of whey protein containing bifidobacteria,CGWPCB）对双歧杆菌的保护作用。借助扫描电子显微镜和物性仪观察凝胶结构,评价以氯化钙为凝胶剂,形成的CGWPCB对双歧杆菌的保护作用。结果表明,7.5mmol/L CaCl2诱导8% WPI形成的网络状冷凝在pH 1.5的酸环境下对双歧杆菌的保护性最好,作用120min后菌落数下降3个数量级,菌体存活率达到0.42%。说明制备的乳清蛋白冷凝胶对双歧杆菌有良好的保护性,为益生菌产品的开发和应用提供了参考。