基于AFP+ AFP-L3+PIVKA-Ⅱ的电泳荧光仪性能分析

随机选择南充市某三甲医院门诊体检患者,参照美国临床实验室标准化协会（CLSI）EP-6A2文件,结合甲胎蛋白（AFP）及其异质体比率（AFP-L3）与异常凝血酶原（PIVKA-Ⅱ）试剂分析验证了全自动电泳荧光免疫分析仪μTASWakoi30的精密度、线性范围、准确性性能.结果表明,μTASWakoi30精密度CV均在10%以下,完全满足标准要求;AFP及PIVKA-Ⅱ在高值样本不同比例下通过实测均值与预测值回归拟合均线性良好;在不同校准品比和不同质量浓度水平下,回收率均在要求范围80%~120%内,准确性高.     

抗甲胎蛋白单克隆抗体的研制及其在免疫组化中的应用

以高纯AFP为抗原,免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞和小鼠SP2/0 Ag14骨髓瘤细胞融 合,经2次亚克隆,建立5株稳定分泌抗AFP特异性单克隆抗体的杂交瘤细胞株。应用经纯化 的该单克隆抗体进行了原发性肝癌组织切片的免疫组织化学实验,结果显示全部5种抗AFP单 克隆抗体对肝癌亚细胞组分均呈现特异性结合。表明已筛选出适于制作甲胎蛋白临床诊断试 剂盒所需的特异性单克隆抗体。     

TGF—β1和HSP70在大鼠肝癌早期诊断中的价值探讨

目的：通过动态检测大鼠肝癌模型造模各阶段血清中TGF—β1和HSP70水平并与传统指标AFP比较,对其在肝癌早期诊断中的价值做综合的评价。方法：用CCL4诱导大鼠肝硬化基础上的肝癌模型。从造模第6周起,每两周心脏采血一次,ELISA法检测大鼠血清中TGF-β1、HSP70和AFP水平,并取部分肝组织行病理学检查。结果：造模第8周发生肝硬化,第10周发生不典型增生及早期肝癌结节。造模第10周TGF-β1和HSP70水平即显著升高,TGF-β1在肝硬化阶段无显著升高,而HSP70则略微有升高,二者特异性分别为90％和60％,阳性率分别为55％和70％,联合检测的阳性率为80％,造模第12周的阳性率分别达85％和90％,联合检测阳性率达100％;AFP水平在造模第12周才有显著升高,肝硬化阶段也有升高并与早期肝癌无显著性差异。其阳性率和特异性分别为60％和30％。结论：传统指标AFP对极早期的肝癌不敏感,特异性不高,而TGF-β1和HSP70均较AFP敏感、特异,二者联合可提高检测敏感性。     

胡萝卜抗冻蛋白基因的克隆及其在E.coli中的表达

对中国的一个胡萝卜品种进行了冷诱导前后幼苗总蛋白组成的比较、分析 ,SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳的结果表明两者在相对分子质量 36 0 0 0附近有一条蛋白带的差别。由此推测实验的胡萝卜品种在冷诱导过程中有抗冻蛋白 (AFP)表达。根据相关的研究结果设计引物 ,以胡萝卜幼苗基因组DNA为模板 ,通过PCR扩增得到了长 10 99bp的抗冻蛋白基因。测序结果表明其与GenBank公布的afp序列仅有 3个碱基的差别。将此抗冻蛋白基因克隆进大肠杆菌表达载体pGEX4T1,在IPTG的诱导下表达出了含有AFP的约 6 0 0 0 0的融合蛋白 ,证明该AFP基因在原核表达系统中可以正常表达     

制造专家系统的AFP评价法

本文分析了制造专家系统的特征因素，并对这些特征因素进行了权衡分析，在此基础上，对传的层次分析 法的不足做了剖析，建立了制造专家系统的ＡＦＰ评价模型，最后，对ＡＨＰ法评价案例进行了ＡＦＰ法的讨论。     

基于G-四链体-氯血红素DNA酶的传感器对血清中甲胎蛋白的检测

建立了一种夹心式用于检测血清中甲胎蛋白(alpha-fetoprotein,AFP)的新型传感器。利用微孔板表面羧基与抗体表面的氨基之间的相互作用,将AFP的单克隆抗体(monoclonal antibodies,McAbs)修饰到微孔板的表面;再利用抗体抗原的定向固定效应,将AFP键合到McAbs的表面,接着将生物素标记的AFP单克隆抗体(biotinylated McAbs)与AFP结合;最后,利用链霉亲和素(streptavidin,SA)与生物素的特异性结合作用,将G-四链体-氯血红素DNA酶键合到生物素标记的单克隆抗体上,从而制得高灵度、高特异性的AFP传感器。用2,2-联氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二铵盐(ABTS)-H2O2体系检测AFP的浓度,信号值与AFP的浓度在0.05 ng·mL-1至20 ng·mL-1之间成线性关系,检测限为0.02 ng·mL-1。此传感器可应用于血清中AFP的检测。     

慢性乙型肝炎患者肝功能与Hp感染的相关性研究

目的:探讨幽门螺杆菌(Hp)感染对慢性乙型肝炎(HB)患者肝功能相关指标的影响.方法:对126例HB患者在检测肝功能[包括血清总胆红素、谷胺酰氨基转移酶、凝血酶原时间、甲胎蛋白(AFP)水平和血氨水平]同时进行胃镜检查和Hp感染情况检测.根据Hp感染情况分为Hp( )组79例和Hp(-)组47例,比较两组患者的血清总胆素、谷胺酰氨基转移酶、凝血酶原时间、甲胎蛋白水平和血氨水平进行相关性分析.结果:血清总胆素、谷胺酰氨基转移酶、凝血酶原时间两组无显著性差异,Hp( )组AFP水平和血氨水平显著高于Hp(-)组.结论:Hp感染可能是HB患者AFP和血氨升高的另一个原因.     

The re-emergence of the GP73 and fucosylated liver cancer biomarkers

The study shows that GP73 alone may not be sufficient to achieve the discrimination in every population. This is because many other clinical factors may influence the levels of the biomarker. This review attempts to identify some of these clinical variables, and helps provide a means of using these clinical values, in combi- nation with GP73, to achieve the best use of the entire clinical biomarker family.     

细胞因子受体-抗人AFP嵌合抗体融合蛋白的构建及表达

用RT-PCR方法从人胎肝组织中扩增EpoR胞外区基因及gp130跨膜区基因,并用酶切连接方法将其与抗人AFP嵌合抗体拼接,连接到质粒pVITRO上,构建真核表达载体.将重组质粒转染CHO细胞,以RT-PCR、Western blot和ELISA方法检测融合蛋白的表达.结果显示稳定转染细胞株有约150kDa的融合蛋白表达.