快速检测猪瘟兔化弱毒疫苗株的TaqMan荧光定量RT-PCR方法的建立

在猪瘟病毒兔化弱毒疫苗株（HCLV）的5′端非编码区设计一对引物和一条TaqMan探针,通过优化反应条件,成功建立了特异性检测HCLV的荧光定量RT-PCR方法．结果表明：该方法检测的最低拷贝数为45拷贝／μL,灵敏度比普通PCR方法高10^4倍,在较广的范围内（4．5×10^1-4．5×10^6拷贝／μL）有良好的线性关系（r=0．994）;分别以乙型脑炎病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒、副猪嗜血杆菌、牛病毒性腹泻,黏膜病病毒作为模板进行TaqMan RT-PCR扩增,未出现阳性信号：4个不同浓度标准品组内试验变异系数为1．90％～5．82％,组间试验变异系数为4．02％～5．69％：HCLV3个cDNA样本组内试验变异系数为3．72％～4．93％;组间试验变异系数为2．99％～4．02％．该方法具有很好的灵敏性、特异性及稳定性,能够快速准确定量检测HCLV,为HCLV疫苗的研制、猪瘟病毒分子生物学等方面研究提供了一种快捷有效的工具．     

弱激光照射足三里穴对刺激迷走神经引起胃内压变化的影响

实验选用体重１．５～２．５ｋｇ的健康家兔,静脉注射氨基甲酸乙酯麻醉,在体记录胃内压变化．观察了弱激光照射足三里穴对刺激兔迷走神经导致胃内压变化的影响．结果表明：（１）电刺激兔迷走神经可使胃内压升高,弱激光照射足三里穴后,能明显减弱迷走神经引起的胃内压升高现象,且这种抑制效应与照射时间呈正相关．（２）纳络酮可加强激光的作用．（３）静脉注射脑啡肽,激光照射足三里穴对刺激完整迷走神经引起的胃内压变化无显著影响,但对切断迷走神经后刺激其外周端引起的胃内压上升有明显的抑制作用．（４）酚妥拉明和心得宁对刺激迷走神经和弱激光照射引起的胃内压变化均无显著影响．由此推断,脑啡肽经中枢途径可减弱激光的作用,经外周途径与激光作用相协同,去甲肾上腺素类可能不参与弱激光的调节作用．     

兔肝金属硫蛋白

金属硫蛋白是一类小分子金属结合蛋白，广泛地存在于生物界，尤其是哺乳动物和人的肝、肾、脑等组织中，生物合成于肝脏，它参与体内某些微量金属元素（如ｚｎ、Ｃｕ、Ｃｏ等）的储存、运输和代谢，并具有抗辐射、消除自由基、抗氧化、抗衰老等多种重要生物学功能，具有广阔的应用前景和市场潜力。     

家兔中性粒细胞防御素的纯化及其对念珠菌抗菌活性的研究

采用聚丙烯酰胺凝胶电泳分离纯化兔中性粒细胞防御素,兔中性粒细胞防御素NP2具有抗白念珠菌M1012R,INH A-207,乳酒念珠菌,热带念珠菌和高里氏念珠菌等菌的活性,具抗菌活性随防御素浓度的升高而增强。     

藏药革叶兔耳草粗提物的抗氧化活性研究

用工业乙醇提取革叶兔耳草全草粉末,减压浓缩得到乙醇浸膏,用蒸馏水溶解后,依次用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取,浓缩分别得到石油醚、乙酸乙酯、正丁醇的粗提物;采用DPPH法研究4种不同溶剂粗提物的抗氧化活性.试验结果表明:革叶兔耳草4种不同溶剂的粗提物均有一定的抗氧化活性,且抗氧化活性与粗提物的质量浓度呈一定的量效关系.尤其是乙醇粗提物具有较强的抗氧化活性,可作为一种新的自由基清除剂和天然抗氧化剂.     

Klebsiella sp.GXK-1的α-L-鼠李糖苷酶的酶学性质

【目的】克隆、表达克雷伯氏菌Klebsiellasp.GXK-1菌株中的α-L-鼠李糖苷酶基因,并研究重组酶的酶学性质。【方法】比对分析GenBank数据库中克雷伯氏菌同属的α-L-鼠李糖苷酶基因序列,设计简并引物PCR扩增基因的保守区。扩增目的基因,以pSE380为表达载体构建重组质粒pSE-rha1,并在大肠杆菌E.coli XL-blue进行诱导表达,使用镍亲和层析纯化重组蛋白,研究目的蛋白RHA1的酶学性质。【结果】以pNPR为底物,进行重组酶酶学性质的研究。重组酶RHA1的最适pH值和最适温度分别为5.0和45℃,Km值为(0.223±0.030)mmol/L,V_(max)值为(1.272±0.121)μmol/(min·mg)。在pH值为6~10的缓冲液内酶活力仍保持在80%以上;在温度为40℃以下时,酶活较为稳定,但在温度高于40℃时酶活力迅速下降。RHA1能水解pNPR、橙皮苷和芦丁。【结论】RHA1具有良好的pH稳定性,不仅能够水解人工底物pNPR,还能够水解α-1,6键的天然底物橙皮苷和芦丁,具有一定的医疗应用价值。     

光动力疗法对兔肝癌肿瘤微血管密度及血管内皮细胞生长因子的影响

目的：研究光动力疗法对兔肝＇VX2移植癌模型的抑瘤作用及其可能的机制,为临床应用 PDT 治疗肝癌提供依据;方法用15只新西兰白兔制成VX2细胞肝癌模型。以血卟啉衍生物（HPD）为光敏剂观察PDT的抑瘤效果,应用免疫组化染色检测VEGF及MVD的表达水平;结果 PDT对肿瘤明显的杀伤作用;PDT组中VEGF及Mr＇VD的表达水平显著的低于对照组（p〈0.05）;结论 PDT可抑制兔肝VX2移植癌中肿瘤灶VEGF的生成,减少肿瘤灶内MVD。PDT抗肿瘤血管形成是其抑制肿瘤生长的一个重要机制。     

戊巴比妥钠对兔和大鼠麻醉方法的研究

目的比较分析各麻醉方式的麻醉效果.方法将戊巴比妥钠配制成3%的浓度,并分别以静脉(30mg/kg)、肌肉(30mg/kg)、腹腔(30mg/kg)、皮下(40rg/kg)的剂量对兔和大鼠施行麻醉.记录实验中每只动物的麻醉时间、睡眠时间、麻醉后睫毛反射、刺痛反应、体温、呼吸频率及苏醒后恢复时间等,统计平均数据.结果兔进入麻醉状态时间(min)为静脉(0)、肌肉(16)、腹腔(6)、皮下(17),睡眠维持时间(min)为静脉(72)、肌肉(46)、腹腔(58)、皮下(89),恢复时间(min)为静脉(41)、肌肉(26)、腹腔(28)、皮下(41).大鼠进入麻醉状态时间(min)为静脉(3)、肌肉(13)、腹腔(5)、皮下(12),睡眠时间(min)为静脉(44)、肌肉(39)、腹腔(72)、皮下(82),恢复时间(min)为静脉(16)、肌肉(18)、腹腔(25)、皮下(28).结论实验者在实验时,可通过本文所给数据,根据手术过程的长短的需要和理想的恢复期选择上述不同的麻醉方式对实验动物施行麻醉.     

免疫亲和层析纯化兔抗人IgG

用人IgG-Sepharose 4B亲和柱,3mol/L氯化镁洗脱,一步纯化免抗人IgG血清,获得了SDS-PAGE电泳纯,免疫双扩散法效价达1/256,收率62.6%;用8mol/L脲洗脱,效价为1/128,收率34.1%.与硫酸铵多步沉淀法比较,纯度和效价大大提高,为获得高度特异、高亲和力兔抗人IgG提供了一条简便途径.     

戊巴比妥钠对兔和大鼠麻醉方法的研究

目的比较分析各麻醉方式的麻醉效果.方法将戊巴比妥钠配制成3%的浓度,并分别以静脉(30mg/kg)、肌肉(30mg/kg)、腹腔(30mg/kg)、皮下(40rg/kg)的剂量对兔和大鼠施行麻醉.记录实验中每只动物的麻醉时间、睡眠时间、麻醉后睫毛反射、刺痛反应、体温、呼吸频率及苏醒后恢复时间等,统计平均数据.结果兔进入麻醉状态时间(min)为静脉(0)、肌肉(16)、腹腔(6)、皮下(17),睡眠维持时间(min)为静脉(72)、肌肉(46)、腹腔(58)、皮下(89),恢复时间(min)为静脉(41)、肌肉(26)、腹腔(28)、皮下(41).大鼠进入麻醉状态时间(min)为静脉(3)、肌肉(13)、腹腔(5)、皮下(12),睡眠时间(min)为静脉(44)、肌肉(39)、腹腔(72)、皮下(82),恢复时间(min)为静脉(16)、肌肉(18)、腹腔(25)、皮下(28).结论实验者在实验时,可通过本文所给数据,根据手术过程的长短的需要和理想的恢复期选择上述不同的麻醉方式对实验动物施行麻醉.