黄鳝成体性腺组织生殖干细胞的体外培养及鉴定

通过黄鳝成体性腺组织的体外培养,探讨黄鳝成体性腺生殖干细胞体外分离培养与鉴定的方法.分离黄鳝性腺组织进行植块培养,倒置相差显微镜下观察细胞生长状况.利用H.E、油红O染色、碱性磷酸酶(AP)细胞化学染色等方法对培养细胞进行鉴定.黄鳝成体性腺组织原代培养3～5 d,可见组织周围有细胞迁出,并形成生长晕.15 d左右,生长晕直径可达3～3.2 mm,生长晕中的细胞主要包括:成纤维细胞、神经样细胞、类生殖干细胞三种类型.成纤维细胞呈不对称的长梭形,突起短而多,细胞核较浅,核仁明显,有2～3个核仁,是生长晕的主要细胞成分.神经样细胞具有放射丝状细胞突起,油红O染色呈阳性反应.类生殖干细胞呈圆形,单核或多核,核质比大,AP染色呈现出阳性反应.探索了适于黄鳝成体性腺组织体外培养的条件和方法,并对原代培养的细胞进行了初步鉴定,为进一步利用体外培养的黄鳝成体性腺生殖干细胞开展黄鳝性逆转分子机制研究奠定了基础.     

黄鳝消化酶活性与温度的关系

报道了3种黄鳝消化酶在不同反应温度和不同的饲养温度下的活性变化.在20～45℃反应温度内,蛋白酶和淀粉酶的活性随温度升高而增加,其中蛋白酶活性在25℃以上增加较快,超过45℃酶活性下降.在20～40℃饲养水温下,3种酶活性随水温升高而增加,但增幅不同.与反应温度比较,脂肪酶活性增幅前者大于后者,蛋白酶活性增幅则前者远大于后者,淀粉酶活性增幅前者略小于后者.     

黄鳝的养殖与常见病防治

黄鳝一般生长在稻田、沟渠中,随市场经济的发展,人们对鳝鱼要求量愈来愈大,野生黄鳝供不应求。近年来特种养殖中,黄鳝人工养殖备受青睐,本文对黄鳝的人工繁殖、苗种培养、饲养、管理、疾病防治等方面做了较为详细的介绍。     

整合素CD29/CD49/CD90在天然性逆转黄鳝雌雄生殖腺中的表达状况

整合素是细胞黏附分子家族中的一员,参与调节细胞的生长、增殖与分化.黄鳝是一种雌性先熟的雌雄同体鱼类,其性逆转发育机制亟待研究.应用免疫组化方法探讨CD29,CD49,CD90 3种整合素分子在黄鳝雌、雄性发育中的表达状况.研究结果表明,CD29,CD49,CD90在雌性生殖腺各级卵母细胞中均不表达,位于生殖褶边缘的性原细胞中可见表达;在雄性生殖腺的初级精原细胞中表达,但在成团分布的次级精原细胞、各级精母细胞中均未表达.     

限制酶SmaⅠ参与的PCR产物克隆技术

介绍了一种增加连接效率的ＰＣＲ产物克隆技术，即ＳｍａⅠ内切酶参与的ＰＣＲ产物与ＳｍａⅠ酶切的载体的连接；并通过克隆黄鲜基因组中一段约２５０ｂｐ的ＰＣＲ产物的实例证实了该技术的可靠有效性。     

为什么雌黄鳝会变成雄黄鳝

<正>妈妈说黄鳝小的时候是雌性的,长大了就变成雄性的了,这是真的吗?A:黄鳝的身体细长,看上去像一条蛇,其实它属于鱼类。不过,大多数的鱼类要么是雄性的,要么     

黄鳝Monopterus albus性转变的探讨

通过403尾黄鳝解剖性腺观察并镜检组织切片,发现大多数黄鳝左叶性腺发达,右叶性腺不发达,左叶性腺先发育成卵巢,后转变为精巢。少数黄鳝右叶性腺发达,但也能发生性转变。黄鳝发生性转变与体长有关,并随纬度和环境条件改变而变化。黄鳝的性比不稳定,这是其通过性转变而适应环境的结果。     

三种农药对黄鳝红细胞微核的诱导

微核测试法广泛应用于快速评定物理和化学诱变因子对生物体内染色体的损伤。本实验在测定杀虫双、甲胺磷和速灭杀丁三种农药对黄鳝96小时半致死浓度的基础上,在半致死浓度和安全浓度之间设置五个浓度组,研究了每个浓度组对黄鳝红细胞微核率的影响。实验结果表明,杀虫双、甲胺磷和速灭杀丁对黄鳝96小时半致死浓度分别为12.02、2.37和0.134ppm。这三种农药都能诱导黄鳝红细胞微核率的提高,而且农药浓度与微核率变化呈正相关性,随着农药浓度的升高,微核率出现高峰的时间也提前。值得注意的是即使农药浓度较低时,微核率的变化也是显著的,在评定水质时,要考虑到农药对鱼类遗传物质潜在的损害。     

黄鳝肠道蛋白酶的应用研究

将黄鳝内脏混合物提取液作同工酶电泳,得到3条蛋白酶同工酶条带,其中ProteaseⅠ条带与从黄鳝肠道中提取的蛋白酶纯品SDS-PAGE条带重合,表明从黄鳝内脏混合物中可以提取到黄鳝肠道蛋白酶纯品.金属离子Cu2 和Ba2 对酶有激活作用,EDTA、Mn2 、Pb2 对酶有抑制作用,而Ca2 、Mg2 、K 、Na 对酶活性无明显影响.通过酶与化学试剂的配伍试验测得:CO23-、SO32-、硼砂对酶活性无影响,甘露醇、橄榄油、聚乙烯醇对酶活性有轻微抑制作用,SO42-、H2PO4-、BO32-和海藻酸钠对酶有轻微激活作用,而洗涤剂中常用的表面活性剂SDS、LAS、CHAPS和TritonX-100在低浓度时对酶活性无明显影响,酶在0·02%的SDS、0·05%的LAS和0·1%的CHAPS中保持相对稳定,40min酶活保持在50%左右.酶专一底物测试结果表明:黄鳝肠道蛋白酶对弹性蛋白酶的专一底物刚果红弹性蛋白(elastin-CongoRed)有水解活性,而对胰蛋白酶和胰凝乳蛋白酶的专一底物N苯甲酰L精氨酸乙酯(BAEE)和N乙酰L酪氨酸乙酯(ATEE)无水解活性,表明黄鳝肠道蛋白酶为弹性蛋白酶.