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目的:分析铜绿假单胞菌(pseudomonas aeruginosa,PA)的LexA与其靶位点的特异性结合的特性。方法:以PCR法扩增PA的LexA基因,将其克隆于原核表达载体pET-22b(+),转化大肠埃希菌BL21(DE3),IPTG诱导表达,采用镍离子亲合柱层析和Superdex-75凝胶过滤层析分离和纯化目的蛋白,以含推定LexA结合位点的片段CTGTN27ACAG为探针,用凝胶阻滞试验检测LexA蛋白与探针序列结合的能力及特异性。结果:构建了pET22bLexA重组质粒,IPTG诱导目的蛋白表达率约为25%,获得纯度大于95%的目的蛋白;CTGTN27ACAG能与LexA蛋白发生特异性结合。结论:推定LexA结合位点CTGTN27ACAG能与PA的LexA蛋白特异性结合,可能是LexA蛋白的结合靶位点。 相似文献
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204国道改建工程采用湿喷桩进行软基处理,结合工程施工实践,着重介绍了湿喷桩施工工艺、质量控制措施以及施工中遇到的问题及处理措施,并对成桩质量检测应注意的问题提出自己的看法。 相似文献
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在多年施工现场的技术工作中,时不时遇到钢筋砼工程产生裂缝的问题。由于大多数人对裂缝缺乏科学的认识,一旦遇到砼有裂缝就人心惶惶,接着会出现媒体曝光,停止使用,不惜巨资进行加固,甚至推倒重建……等等一系列的社会问题.裂缝,对于建筑技术人员来讲,是一个头痛而又不得不面对的现实,几乎每个技术人员都遇到过、处理过。我在多年的工作实践中,得出的几点体会,供大家作参考。 相似文献
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我国公路建设中存在大量的钢筋混凝土和预应力混凝土桥梁结构,有许多设计中桥梁承载力明显不足,并且随着使用年限的增加,桥梁强度刚度都有所降低,必须进行加固.针对这些桥梁,文章提出了几种基本加固方法,并讨论了各自的优缺点. 相似文献
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阐述了钢管混凝土的性能特点和技术原理,指出了工业建筑的结构特点,进而对钢管混凝土在工业建筑中的应用进行了探讨。 相似文献
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随着公路建设大规模展开,为适应各种不同环境下建设需要,在公路设计中对桥梁结构类型的选定要求将越来越高,大跨径、高应力的桥梁结构不断得到广泛应用,箱梁结构的应用更是层出不穷。于是,为确保箱梁施工质量,对箱梁施工技术的工艺控制就显得格外重要,如何使得浇筑出来的箱梁达到内实外美的效果,需要把握好箱梁施工过程中几大质量控制点的控制,因此,下面就让我们针对预应力现浇箱梁施工技术的相关要求进行探讨,以供同行参考借鉴。 相似文献