南方鲇核基因组遗传结构的RAPD分析

为了解南方鲇核基因组的遗传结构,采用38个随机引物对长江上游及其支流中南方鲇的核基因组DNA进行随机扩增.岷江支流甄溪个体与金沙江个体的遗传距离为0.265,与岷江个体的遗传距离为0.208,明显高于金沙江个体与岷江个体的遗传距离0.095.实验结果显示,长江上游金沙江岷江及其支流甄溪水域中的南方鲇个体间核基因组存在RAPD遗传多样性.     

大黄鱼凝血酶原类似基因的克隆及其表达分析

采用快速末端cDNA扩增法,首次从大黄鱼中克隆到全长为2 023 bp的凝血酶原类似基因cDNA,编码为617个氨基酸,其中包括80 bp的5′末端非编码区及89 bp包含poly(A)尾的3′末端非编码区。预测1~15位的氨基酸处存在1个信号肽。推导的氨基酸序列与哺乳动物及其他鱼类进行同源性比较,发现其与红鳍东方鲀有73%同源性,而与哺乳动物的同源性为50%~65%。凝血酶原类似基因虽然在大黄鱼的各个组织中组成型表达,但是在减毒鳗弧菌免疫的大黄鱼的脾脏和肾脏中表达明显上调,这表明凝血酶可能参与大黄鱼对细菌侵染的免疫应答。     

铁皮石斛不同生长阶段遗传稳定性的RAPD分析

利用从20个随机引物筛选出来的3个稳定性较好的10碱基引物对已继代12到13次仍然维持在不同生长阶段、来自同一蒴果的铁皮石斛T31种群进行RAPD检测其遗传稳定性,发现不同生长阶段内遗传相似系数较高,在89．36％和100％之间,其中原球茎期的变异比萌芽期、一叶期、两叶期、开花期要显著,但程度都极其微弱．     

麝科动物干皮标本中的DNA扩增

随着分子生物学技术的发展和渗透，分子系统进化研究成为当前生物多样性保护研究中的一个主要趋势，它为生物系统进化中的诸多疑点的解决提供了一条重要途径。而线粒体DNA（mtDNA）由于其结构简单，呈母系遗传，且进化速度快[1]，因而得到广泛的应用[2]，它极大地推动了动物系统进化的研究。特别是链聚合酶反应（polymeraseChainReaction，PCR）的产生和发展[3]，使得从古生物化石和陈旧组织中得到进化信息成为一条新的途径，并扩大了分析样品的来源途径。麝科动物是一类小型鹿类动物，并具有重要的经济价值，它在鹿类动物的进化过程中…     

大豆启动功能片段的PCR检测

启动子在基因的表达调控中起着关键作用．已克隆到大豆的启动子，并保存于质粒pBI 10l的多克隆住点(HindⅢ和BamHI间)上．根据GenBank中质粒pBI10l、pBI 12l的全序列设计引物，来扩增这一启动功能片段．阴性、阳性对照都得到预期的泳带，但目的启动子带却与阴性带相同，说明质粒中的启动子片段在保存过程中已丢失．     

农杆菌质粒DNA高效提取方法研究

以EHA105菌株为实验材料,通过优化质粒扩增条件、加大菌液使用量、改良提取纯化过程中所用试剂等,简化了操作流程,给出了一种高效提取农杆菌中质粒DNA的方法。结果表明,选择LB＋KANA为培养基、抗生素质量浓度为50 mg/L,细菌培养至OD600=0.634～0.714时,以5 mL/次用量取菌液裂解;以改进方法提取试剂,得率与常规方法相当。该方法在满足PCR检测条件的前提下既减少了酚、氯仿等有毒试剂的用量,又省时、经济、方便,为植物转基因工程中目的物DNA的检测提供了技术支持。     

T0501012 中国五大区苹果轮纹病防治技术

目前，苹果轮纹病是制约苹果增产、增收的第一大病害。该项目采用RAPD基因扩增技术和田间生物实验，明确了苹果果实轮纹病的4种主要症状类型，是典型的D型病原菌产生遗传变异形成的致病性更强的基因变种所致，为今后该病害的动态检测与预测预报及防治用药奠定了可靠的理论基础；提出了将枝干轮纹病由开花前防治改为落花后孢子器首次开口高峰期防治新技术，将防效从原30％～40％提高到80％以上；     

吐鲁番果蝇随机扩增DNA多态性初步分析

由于吐鲁番地区独特的气候特点,对吐鲁番果蝇和实验室野生型果蝇进行随机引物扩增DNA多态性的初步研究。结果表明：吐鲁番果蝇与野生型果蝇在DNA水平上的有差异性,并且优化出一种提取果蝇基因组DNA的方法。文章研究的目的在于探讨吐鲁番果蝇在DNA水平上的遗传多样性。     

福建棘隙吸虫的蛋白质组分及基因组DNA多态性分析

采用RAPD技术和等电聚焦电泳方法，对福建棘隙吸虫福建株和广东株虫体进行基因组DNA多态性分析和蛋白质等电点测定。结果表明，15个随机引物在两虫株基因组DNA中共获得扩增带182条，二者共有的89条，广东株特有的4条，其共享度为0．978，遗传距离指数为0．022；两虫株的蛋白质经电泳分离均可获得9条区带，其中有7条区带的等电点相同，第Ⅳ，Ⅴ条蛋白区带的等电点存在差异。研究表明在福建和广东两地流行的福建棘隙吸虫是同一种属。     

一种直接用于PCR分析的风沙土微生物总DNA提取方法

以风沙土为材料,直接提取土壤微生物DNA.采用SDS—溶菌酶—CTAB—蛋白酶K和液氮反复冻融法裂解细胞得到DNA粗提液,以PEG对其纯化.结果表明,SDS—溶菌酶—CTAB—蛋白酶K和液氮反复冻融法裂解细胞可获得大片段的DNA,提高DNA产率.每克干土的DNA提取量为0.586～1.311μg.所提DNA片段在23Kb以上.PEG可有助于去除DNA中腐植酸,DNA不作回收纯化即可作为模板进行16SrDNAPCR扩增.SDS—溶菌酶—CTAB—蛋白酶K和液氮反复冻融裂解细胞、PEG纯化DNA的方法组合是一种简便的适合风沙土微生物总DNA的提取方法.