应用多重的等位基因特异PCR诊断苯丙酮尿症

点突变是导致人类遗传病的主要基因突变类型,其检测方法的探索一直是基因诊断研究中的重要课题。本文报道一种简便、快速检测点突变的新方法——多重的等位基因特异聚合酶链反应(Multiplex allele—specific polymerase chain reaction,MASPCR)。等位基因特异聚合酶链反应(Allele-specific polymerase chain reaction,ASPCR),又     

应用PCR法检测庚型肝炎病毒感染

应用逆转录套式ＰＣＲ法检测了４８例丙型肝炎、２６例乙型肝炎及１２例甲乙丙丁戊型肝炎病毒感染标志均阴性的肝炎患者血清中的庚型肝炎病毒（ＨＧＶ）ＲＮＡ，结果表明我国肝炎患者中存在ＨＧＶ感染；ＨＧＶ可单独感染或与其它肝炎病毒混合感染，丙型肝炎患者中，ＨＧＶＲＮＡ的检出率为１０．４％，乙型肝炎患者中的检出率为３．８％，而在甲乙丙丁戊型肝炎标志均阴性的肝炎患者中的检出率为３３．３％，ＨＧＶ与其他肝炎病毒的混合感染可加重肝脏的损害，ＨＧＶ感染是甲乙丙丁戊型肝炎标志均阴性肝炎的重要病因之一     

丙肝病毒核心抗原检测临床应用研究

应用酶联免疫法分别检测丙肝病毒核心抗原(HCV-cAg)和抗体(HCV-Ab),了解丙肝病毒核心抗原检测的意义。采用湖南康润公司生产的HCV游离核心抗原试剂盒,对来自门诊或手术前筛查的850例临床样本进行了HCV-cAg和HCV-Ab检测,阳性者用反转录多聚酶链反应(RT-RNA)证实。850例筛查样本HCV-Ab阳性22例,其中HCV-cAg阳性14例,RT-RNA阳性16例;828例HCV-Ab阴性的样本检出HCV-cAg阳性4例,其中RT-RNA阳性3例。HCV-cAg与RT-RNA符合率为83.33%(15/18)。HCV核心抗原检出时间早于抗体,HCV-cAg检测试剂盒可作为HCV抗体检测的补充试剂,敏感性高、特异性好、费用低廉。     

鸡腺病毒内蒙古分离株六邻体蛋白基因片段的合成和分子克隆

根据鸡１０型腺病毒以及人２、５、４０、４１型腺病毒、牛３型、鼠１型腺病毒六邻体蛋白基因序列，选择保守区，设计和合成一对引物，以鸡腺病毒内蒙古分离株基因组ＤＮＡ为模板，进行聚合酶链反应（ＰＣＲ）扩增得到预期大小的０．５５ｋｂＤＮＡ片段．将此ＤＮＡ片段克隆于ｐＵＣ１９的ＳｍａＩ位点，筛选重组质粒，进行限制酶切分析和ＰＣＲ检测，得到含有六邻体蛋白基因片段的重组质粒，为进一步开展此病毒分子生物学研究和分子生物学诊断技术的建立创造了条件     

一种新型单个神经细胞的RT-PCR技术研究

提出一种新型可重复实现单细胞的RT-PCR的实验技术,扩增目的基因.应用玻璃微电极提取单个神经细胞,裂解获得mRNA,利用RT-PCR技术检测单个神经细胞的离子通道等基因的表达.应用此技术可以灵敏地检测特定电生理现象的分子生物学基础.此法可以比较大鼠背根神经节中大细胞内HCN1的mRNA表达量.实验结果表明:扩增产物的量足够用于后续实验,而且3个重复的均一性也很好,充分表明了该研究提出的实验技术的可行性.     

不同民族大学生乙肝病毒基因型分布状况调查

为了解不同民族大学生乙型肝炎病毒（hepatitis B virus,HBV）基因型和亚型分布状况,采用限制性片段长度多态性聚合酶链反应（PCR-RFLP）技术,对中南民族大学93例来自15个民族乙肝大三阳学生血清HBV进行基因分型.结果表明：患者中HBV基因B型占61.3%（57/93）,C型占25.8%（24/93）,D型占4.3%（4/93）.说明各民族HBV基因型分布中,B型占绝对优势,C型次之,D型最少（P〈0.01）.且不同民族不影响HBV基因型的分布（P〉0.05）,C型和D型分布基本符合我国HBV基因型地理区域分布规律.     

利用WSBV的引物扩增对虾的杆状病毒DNA

利用台湾报道的ＷＳＢＶ的ＰＣＲ引物，成功地扩增出了１４００ｂｐ左右的中国对虾的杆状病毒的ＤＮＡ片段，与预计的产物长度吻合，该引物对经初步离心处理的病虾组织出能扩增出特异性ＤＮＡ条带，而在对正常虾组织ＤＮＡ、昆虫杆状病毒ＤＮＡ进行了扩增，均获得阴性结果，说明该引物的特异性较高，对中国对虾的杆状病毒的检测具有一定的实际应用价值。实验结果同时说明ＷＳＢＶ与中国对虾的杆状有同源序列存在，具有一定的保守性，     

原位多聚酶链式反应（In Situ PCR）技术的应用和发展

原位ＰＣＲ是一项新的分析子技术，它结合了杂交技术和ＰＣＲ技术的优点，具有高度的敏感性，特异性，并能进行精确的定位，在研究工作和临床诊断上有广阔的应用前景。     

用微量单管RT－PCR快速检测及定型脊髓灰质炎病毒

介绍一种逆转录─聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）的简单快速检测和定型脊髓灰质炎病毒（ＰＶ）的方法，无需提取ＰＶＲＮＡ，共用一种缓冲系统，将ＲＴ和ＰＣＲ试剂混合在２０μＬ反应体系中，整个操作可置于一不间断温度循环程度程序中完成。一步法ＲＴ－ＰＣＲ与常规ＲＴ－ＰＣＲ及中和抗体试验对ＰＶ的检测结果完全一致，它的检测敏感度可达５ＴＣＩＤ（５０）／ｍＬ。该法需要的时间，费用和污染的都大大减少，而且特别适于临床常规诊断和鉴别ＰＶ的需要。     

几种动物RAPD指纹图谱反应条件的分析

用随机排列碱基顺序的寡核苷酸引物，对蚕、鱼、蛇、家猪等动物的基因组ＤＮＡ扩增，获得了这些动物的随机扩增多态ＤＮＡ指纹图谱，对影响扩增结果的几个因素进行了分析，对动物随机扩增多态ＤＮＡ反应的适宜条件进行了讨论。