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171.
研究尘肺结核患者结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,MTB)耐药基因突变与耐药性的关系。在97例尘肺结核患者痰中检出MTB菌株28株,采用PCR-SSCP法检测katG、rpoB和rpsL基因突变,并与采用常规药敏试验(AST)法检测的耐药结果进行对比分析。采用PCR-SSCP法检测katG、rpoB和rpsL基因,突变率分别为42.86%(12/28)、42.86%(12/28)和32.14%(9/28),采用AST法检测INH、RFP和SM,耐药率分别为64.23%(18/28)、60.71%(17/28)和53.57%(15/28),两者之间差异均无显著性(P>0.05)。其中多耐药株20例(71.43%),包括耐三种药物12例(42.86%),耐两种药8例(28.57%),单耐药株6例(21.43%),敏感株2例,耐药率92.86%。PCR-SSCP法检出3个基因联合突变8株,与AST法符合率为66.67%(8/12);2个基因突变5株,符合率为62.50%(5/8);单基因突变2株,符合率为33.33%(2/6)。结果表明:PCR-SSCP技术适用于MTB katG、rpoB和rpsL耐药基因突变的筛选,对指导尘肺结核患者临床用药上具有重要意义。 相似文献
172.
PCR技术检测金黄色葡萄球菌肠毒素D基因 总被引:6,自引:0,他引:6
根据金黄色葡萄球菌肠毒素D基因的序列,设计相应的引物,建立检测金黄色葡萄球菌肠毒素D基因的PCR技术。利用该方法可从含有肠毒素D基因的金黄色葡萄球菌中扩增出PCR产物。扩增产物具有特异性,长为316个碱基对。经限制性核酸内切酶HhIⅠ酶切证实扩增产物为SED基因片段。 相似文献
173.
为了简化聚链反应(PCR)程序和加快检测速度,将二温式PCR与多重PCR结合起来,建立一种同是检测鸡传染性支气管炎病毒(IBV)和鸡传染性喉气炎病毒(ILTV)的二温式重PCR技术,试验根据IBV和ILTV的基因文库,设计2对分别与IBV和ILTV某段基因序列互补的引物。用这2对引物同一样品中的IBV、ILTV核酸模板进行二温式多重PCR扩增,结果均同时得到2条特异性大小与实验设计相符的1720bp(IBV)和647bp(ILTV)的扩增带,而对其他6种禽病病原的扩增结果均为阴性,敏感性测定结果表明明,该二温式多重PCR技术检出10pg的IBV RNA模板和10pg的ILTV DNA模板。 相似文献
174.
二甲亚砜在聚合酶链反应扩增载脂蛋白E基因中的作用 总被引:5,自引:0,他引:5
目的:探讨二甲亚砜(DMSO)在聚合酶链反应(PCR)中扩增人类载脂蛋白E基因中的作用。方法:在不同质量分数DMSO的存在下,以PCR技术增人类载脂蛋白E基因片段。限制性内切酶酶切检测扩增产物。结果:在质量在分数5%-10%的DMSO下,可以成功地扩增到人类载脂蛋白E基因的第4外显子片段。结论:在DMSO作用下,PCR扩增增强了特异性。扩增的人类载脂蛋白E基因片段可以进行基因限制性片段多态性的分析。 相似文献
175.
目的:了解白血病患者EB病毒感染情况。方法:收集21例急性淋巴细胞白血病、1例慢性淋巴细胞白血病、15例急性粒细胞白血病、8例慢性粒细胞白血病患者及32例正常对照组的外周血,分离单个核细胞,提取DNA,应用PCR方法检测EB病毒DNA。结果:在1例初诊慢性粒细胞白血病病人样本中发现EB病毒阳性,余均为阴性。结论:白血病患者存在EB病毒感染情况,但并不普遍。 相似文献
176.
本文报道一种简便、快速、可靠,同时又适合大量转基因植株中外源基因测定的PCR检测技术,同时改进了转基因植物中总DNA提取方法,并且用窄缝转移杂交测定了转基因植株中外源基因拷贝数。 相似文献
177.
应用PCR技术扩增DYZ 3 DNA特异顺序进行人类性别鉴定的研究 总被引:1,自引:0,他引:1
本文综合了Kogan等(1987)和Michal等(1989)的研究结果,设计合成了Y染色体α-卫星DNA特异的引物和Alu家族DNA特异的引物用于性别鉴定.该方法克服了原方法的不足,操作简便,成本低廉,能在更短的时间内完成实验. 相似文献
178.
179.
目的 构建人乳头瘤病毒11型(HPV11)E7 DNA疫苗质粒.方法 从尖锐湿疣病变组织中提取DNA制备模板,采用聚合酶链反应(PCR)技术扩增HPV11-E7基因,将E7基因经双酶切后定向克隆到pcDNA3.1( )中,测序鉴定.结果从病变组织中扩增出了全长HPV11-E7基因,并正向插入载体pcDNA3.1( )中,经酶切和测序鉴定无误.结论 HPV11-E7 DNA疫苗质粒构建成功,为今后进行防治尖锐湿疣的动物实验和临床实验奠定了基础. 相似文献
180.