PCR 技术用于 DNA 多态性分析 apoB—3′HVR 和 D17S30位点的体外扩增

本文用PCR技术扩增了北京地区73名无关个体的apoB—3'HVR和其中50名的D17S30位点.经琼脂糖凝胶电泳检测,在人群中表现出一定程度的多态性;同一样品分别扩增apoB—3'HVR和D17S30,其扩增带有明显的差别;而同一样品分次扩增后,其扩增带完全一致,表明扩增产物的可重复性.与DNA 指纹技术相比,这种方法虽然鉴别能力较低,但操作简便,灵敏度高,适于微量生物样品检验.我们将该技术应用于两例亲子鉴定案,其中一例排除了嫌疑父亲,另一例则不能排除.     

多聚酶链反应及其在实验动物科学方面的应用

ＰＣＲ是近年发展起来的一种基因诊断新技术，由于其方法简便、快速、特异、敏感，已在人类遗传、基因工程、医这诊断、法医鉴定等领域广泛应用。本文就该技术的基本原理及其在实验动物科学领域的初步应用及存在问题等进行了概述和讨论。     

应用TD—PCR技术和限制性内切酶技术鉴定猴B病毒

从DNA水平上鉴定猴B病毒，并区别人单纯疱疹病毒(HSV-1)；用PCR技术对猴B病毒和HSV-1进行扩增，并用限制性内切酶技术对扩增产物进行酶切，对PCR扩增产物和酶切产物进行电泳；电泳结果显示猴B病毒和HSV-1的PCR扩增产物为128bp，酶切后，B病毒能产生72bp和56bp片段，而HSV-1不能产生酶切产物；该方法能较好地鉴定猴B病毒，同时也将有密切抗原关系的HSV-l区分开来。     

太子参对心肌梗死后慢性心衰大鼠的保护作用及对基质金属蛋白酶的影响

目的:研究太子参对心肌梗死后慢性心衰大鼠心功能与心室组织基质金属蛋白酶(MMPs)的作用.方法:采用结扎大鼠冠状动脉复制慢性心衰大鼠动物模型,以血流动力学指标分析心功能,体重指数、羟脯氨酸含量以及病理组织学检查分析心肌纤维化,RT-PCR与酶谱法分析MMP-2与MMP-9的mRNA表达与活性.结果:大鼠冠脉结扎6周后,心功能显著紊乱;体重指数、羟脯氨酸含量以及病理组织学检查分析结果提示心肌纤维化;左心室组织MMP-2与MMP-9的活力增加,mRNA水平提高.太子参水煎液连续灌胃给药5周,可以显著改善心衰大鼠血流动力学,抑制左心室组织MMP-2与MMP-9的活力及mRNA的水平.结论:大鼠冠脉结扎6周形成慢性心衰模型,太子参水煎液可改善大鼠急性心肌梗死后的慢性心衰,其机制可能与抑制MMP的表达与活力,从而抑制心肌纤维化,改善心功能.     

95例黎族的β—地中海贫血基因类型分析

本文对海南岛黎族学生1726人进行普查,采用红细胞脆性试验阳性和血红蛋白A_2增高两项指标,筛选出β—地中海贫血对象149人,占调查总人数8.6％。随机对其中95例采用PCR扩增技术与ASO探针杂交法,应用7对寡核苷酸探针B—地中海盆血CD41/42.CD17.—28.—29CD43.CD71/72和ⅣS—Ⅱ654)分析突变基因类型。其结果:β—地贫CD41/42(—TCTT)基因型杂合子90例,占基因分析总例数94.7％,—28(A→G)基因型杂合子1例,其余4例尚未清楚。根据上述分析结果,笔者认为海南岛纯系黎族人群中β—地中海贫血病的基因类型为β—地贫CD41/42(—TCTT)。这一研究结果能为黎族优生和开展β—地贫产前基因诊断提供了依据。     

人胰岛素原类似物（B—Arg—Arg—A）基因的构建和表达

用聚合酶链反应（ＰＣＲ）法将Ｃ肽为６个氨基酸残基的胰岛素原类似物基因删除突变成Ｃ肽仅为２个精氨酸残基的胰岛类原类似物基因，即把ＰＵＣ１８ＢＣ＇Ａ改建为ＰＵＣ１８ＢＲ２Ａ。再将ＰＵＣ１８ＢＲ２Ａ与ＰＪＧ１０５且为表达质粒ＰＪＧ１０７，使Ｂ－Ａ－Ａ与ＰＪＧ１０５编码的一种多肽成融合蛋白在大肠杆菌体系中表达。融合蛋白占细菌蛋白总量的５８％。表达产物具有人胰岛素放射免疫活性。     

应用聚合酶链反应与斑点印迹杂交产前诊断β地中海贫血

应用聚合酶链反应(PCR)体外基因放大,~(35)S 标记β-珠蛋白基因探针与 DNA分子杂交斑点印迹新方法,对携带者进行了基因分析,对胎儿进行了产前诊断检测。对3对夫妇的检验显示,他们分别是41-42,-28或17突变基因携带者,2例胎儿正常,1例为杂合子。     

应用套式聚合酶链反应技术分析细菌与胆固醇…

目的：旨在从分子水平研究细菌感染与胆固醇结石形成之间的关系，以期阐明胆固醇结石发病的分子机理和探讨可能防治的新途径。方法：从３６例胆汁细胞培养阴性的胆囊大 石中提取ＤＮＡ，应用套式聚合酶链反应（ＮＰ－ＰＣＲ）技术，从中特异性从扩增细菌ＤＮＡ片段。结果：发现３０例（８３．３３％）胆固醇结石中有细胞ＤＮＡ存在。其中胆固醇含量３０－６９％之间６例，７０－９０％之间１４例；〉９０％１０例，尚未发现结石中胆