酶法水解棉籽蛋白的制备与应用

以脱酚后的棉籽粉为原料 ,研究了酶解法制备可溶性棉籽水解蛋白的生产工艺。对其影响因素和产品的实际应用作了探讨。结果表明 ,利用中性蛋白酶AS1.398水解棉籽粉 ,产品得率可达 28.8%,蛋白质量分数为63.28%。棉籽水解蛋白可作为菌体发酵氮源。     

脲酶高产菌的筛选和产酶条件的研究

从红壤稻田分离产胞外脲酶活性高的细菌、放线菌和真菌各20株.细菌、放线菌、真菌产脲酶活力的平均值分别为0.764,1.104,0.847μmol/min.产脲酶能力大小为:放线菌>真菌>细菌.我们研究了一株放线菌Dactylosprangiumaurantiacum产胞外脲酶的条件.结果表明:该菌产酶的最佳培养时间为42h;产酶的最佳培养温度为28℃;产酶的最佳起始pH为7;葡萄糖、鼠李糖和甘露糖等碳源对产酶有利;硝酸铵、氯化铵和硫酸铵对产酶有利;钙、镁等金属离子能促进产酶.     

红豆杉组织、细胞培养物紫杉醇快速检测

利用薄层层析，高效液相色谱，酶联免疫吸附等方法对国内4种1变种红豆杉及其组织，细胞培养物进行紫杉醇快速定性，定量检测，试验结果表明，国内4种1变种红豆杉及其组织，细胞培养物中都含有紫杉醇，其中东北红豆杉及其培养物中紫杉醇含量较高。     

水疱性口炎病毒L蛋白N端存在新的定位信号

水疱性口炎病毒(vesicular stomatitis virus, VSV) L蛋白是该病毒复制酶的主要成分, 分子量约为241 kD. 通过构建L蛋白缺失突变体与绿色荧光蛋白(GFP)融合基因的方式, 将融合蛋白置于T7启动子或CMV启动子下游, 在多种动物细胞中瞬时表达了重组的融合蛋白. 荧光显微镜观察结果显示, 仅保留N端96个氨基酸残基或缺失N端120个以上残基时, 融合蛋白均匀分布于整个细胞质中, 而含有N端120个以上残基时, 融合蛋白呈点状或局部分布于核周围部位. 截取L蛋白96～120氨基酸片段, 连接到GFP蛋白氨基端, 同样融合蛋白亦特异性地分布到核周围局部区域. 进一步研究含定位信号的25个残基片段发现, 仅13个残基的肽段QGYSFLHEVDKEA(108 ~ 120)就具有定位功能, 缺失D或V均导致定位信号完全丧失. 含有这13个残基的GFP融合蛋白, 在多种细胞和不同表达模式下均显示了同样的分布规律, 表明L蛋白N端这种定位信号具有独立的定位功能, 并且在不同细胞中是保守的.     

樟树(Cinnamomum camphora)对钉螺过氧化物酶影响的研究

分别用新鲜樟树的根皮、茎皮、叶的水浸液处理钉螺，结果表明：樟树各部分的水浸液均有很好的灭螺效果；灭螺效果的顺序依次为：根皮、茎皮、叶；樟树各部水浸液对钉螺的过氧化物酶有明显影响，经处理1—3天样品的酶活高于对照组，处理4天的酶活最强，而处理5天的酶活则大大减弱。在这一处理过程中，有时出现新的酶带，有时又有酶带消失。     

酶解桃仁制备低分子肽

以核桃仁为原料, 采用酶解技术, 经蛋白质提取、酶解、分离等工序制备高质量低分子肽制品. 蛋白酶水解核桃仁的最佳条件为 温度40 ℃、 pH 9、底物浓度40 mg/mL、酶量150 U/g, 反应时间2 h, 在此条件下核桃蛋白质的水解度约为20%.     

高活力饲用复合酶制剂的制备

以粮油加工副产品为原料，经黑曲霉、米曲霉混合固态发酵，制备了有较高酶活和较全酶系的饲用复合酶制剂．发酵物料中m(麸皮)：m(豆粕)=4：6，m(水)：m(干料)＝0．8：1，w(Zn^2 )=0．2％和w(Mg^2 )＝0．02％能提高蛋白酶的活力，45℃烘干发酵料，各种酶活损失最小．     

斜带石斑β-珠蛋白cDNA的克隆和序列分析

从斜带石斑EpinephelusCoioides白细胞cDNA库随机挑取噬菌斑，做为模板，用λTriplEx5'3'长距离插入子筛选引物，进行插入片断的PCR扩增，并进行表达序列探针（ESTs)测定。从中克隆到了血红蛋白β亚基cDNA,cDNA包含长达444bp的开放阅读框，编码147个氨基酸的多肽。用www.expasy.ch网站的compute pI/MW程序计算其可能的相对分子质量为16544，等电点为6.95。其氨基酸序列与草鱼β-珠蛋白Ⅲ的同源性最高，为73.0%。在远端和近端的与血红素结合的组氨酸都是保守的，另外，与其它鱼类及蛙，鸡和人的β-珠蛋白比较，在血红素结合区及亚基结合区的氨基酸残基均是高度保守的。     

泥土芽孢杆菌YMTC1049菌株高温蛋白酶产酶条件的优化

 报道高温蛋白酶产生菌YMTC1049(Geobacillus sp.)产酶条件的优化过程.在基础培养基中分别添加葡萄糖、麦芽糖、酵母提取物、蛋白胨、胰蛋白胨、酪蛋白、聚胨等7种营养成分,获得对酶活影响较大的碳、氮源.用多因素正交试验设计考察了pH、酪蛋白、葡萄糖和温度对酶活的影响水平,菌株在优化发酵条件下培养24h时,上清液蛋白酶活力达312U/(mL·min).     

适用于我国小麦品质育种的SDS—PAGE方法

本文根据多年来实验室工作的经验，采用国产的仪器设备和药品，提出了在182mm×95mm的凝胶上，一次可装载100个样品，每次点样只需1．5－2μl，用于HMW麦谷蛋白亚基分析的SDS—PAGE方法。该方法具有分辨率高，经济性好，简单易行的特点。特别适于小麦育种计划中对大量品系进行HMW麦谷蛋白亚基分析及利用“半粒法”进行HMW麦谷蛋白亚基分析。