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221.
转基因花卉的DNA提取与多重PCR分析   总被引:24,自引:0,他引:24  
分别以CTAB法、DNA提取试剂盒提取菊花、矮牵牛、非洲菊3种花卉的基因组DNA,凝胶电泳结果表明试剂盒提取的效果较好。设计合成了3对引物,分别扩增花椰菜花叶病毒(Cauliflower mosaic virus,CaMV)35S启动子、根癌农杆菌胭脂碱合成酶基因(nos)终止子、大肠杆菌K12菌株新霉素磷酸转移酶Ⅱ(nptⅡ)基因。普通PCR检测结果表明,3种花卉6个样品中仅矮牵牛的1个样品含有这3种转基因成分,酶切鉴定结果验证了PCR产物为非假阳性。尝试以多重PCR同时检测转基因矮牵牛与对照阳性质粒中的2个或3个转基因成分,得到预期结果。  相似文献   
222.
中国水仙种质资源的遗传多样性分析   总被引:11,自引:1,他引:11  
用随机扩增多态DNA(RAPD)标记方法对中国水仙主要栽培品种及不同的生态类型进行了遗传多样性检测。从98个随机引物中筛选出16个有效引物,共扩增出120条DNA带,其中多态位点39个,占32.5%。相对其他作物,中国水仙遗传多样性水平偏低。中国水仙遗传多样性贫乏可能是现有中国水仙品种稀少的重要原因。用UPGMA法对各样品间的Nei氏相似性系数进行聚类分析。结果显示,崇明水仙与漳州水仙亲缘关系十分密切,平潭水仙与漳州水仙亲缘关系相对较远。平潭水仙和崇明水仙各居群内的遗传分化很小,而漳州水仙居群内遗传多样性较为丰富。以栽培品种看,单瓣水仙与重瓣水仙亲缘关系密切,“金三角”与单瓣水仙、重瓣水仙两者的亲缘关系较远。基于研究结果,提出采用新技术引进新种质选育水仙新品种的思路和保护中国水仙资源的重要性。  相似文献   
223.
酵母转录因子GCN4是通过亮氨酸拉链(bZIP)结构结合DNA的蛋白质之一,当GCN4二聚体与DNA结合时,亮氨酸拉链区的2个单体结合为平行的卷曲螺旋结构,而其基区由无规线团结构变为α螺旋.为探讨亮氨酸拉链蛋白与DNA的结合机理,设计了含有GCN4亮氨酸拉链蛋白基区结合DNA的必需氨基酸的折叠片段,并将其克隆到Escherichia coli BL21,讨论了此亮氨酸拉链蛋白的表达条件.在蛋白质的小量表达试验中,重组子Escherichia coli BL21于5mL含有50μg/mL氨节青霉素和34μg/mL氯霉素的LB液体培养基中培养至对数期,加入不同浓度的IPTG,继续培养以诱导蛋白质的表达,在不同的时间(如:诱导前,诱导2,4,6,8h)取样100μL到1.5mL离心管中、离心收集沉淀,将沉淀悬浮于样品缓冲液中,用10%SDS-PAGE检测;在10L含氨苄青霉素和氯霉素的LB液体培养基中进行了大量表达,根据小量表达的试验结果确定了IPTG的浓度和诱导时间.结果表明:含有这种拉链蛋白质的重组子Escherichia coli BL21在37℃下小量培养时,0.1-0.8mmol的IPTG均可在2-10h内诱导该蛋白质表达;而大量培养时,0.2mmol和0.4mmol的IPTG在37℃均不可能诱导表达,只在28℃时才表达;小量培养和大量培养的最佳诱导时间为4-6h,诱导剂IPTG的浓度为0.2mmol,大量表达的温度为28℃而不是37℃.  相似文献   
224.
鱼类线粒体DNA控制区的结构和进化:以鳑鱼类为例   总被引:14,自引:0,他引:14  
以鳑鱼类为例,研究了鱼类线粒体DNA控制区的结构和进化规律.识别了终止序列区、中央保守区和保守序列区3个区域.指出扩展终止相关序列(ETAS)的主体是TACAT和它的反向互补序列ATGTA形成的发夹结构.给出了鱼类中若干重要保守序列的普遍形式.研究结果表明,一般情况下,只有一个行使功能的ETAS,但可能会有多个复制的、不行使功能的ETAS存在.鱼类的保守序列CSB2最为保守.线粒体DNA控制区被认为是由各功能单位形成主体框架,主体框架复制产生重复序列,重复序列产生快速变异,这样造成不同类群间线粒体DNA控制区巨大差异.易突变点和二级结构的存在均可能与变异的发生相关.  相似文献   
225.
在室温条件下,阿的平能嵌入DNA的碱基对之间,而阿的平荧光大幅猝灭,酸性介质下,激发波长348,428或449nm,碱性介质下激发波长为362或422nm,发射波长均为502nm,基于此对核酸进行定量测定,方法简单,快速,灵敏,对于双链或单链小牛胸腺DNA,线性范围0-4μg/mL,检测限0.03μg/mL,共存物质干扰小,在不同浓度ctDNA存在下,温度对荧光光猝灭的影响结果显示猝灭方式为静态猝灭。  相似文献   
226.
以常规电镜及NAMA-Ur DNA特异染色技术对Wistar大鼠肝细胞核仁的超微结构和rRNA的分布进行了观察。常规电镜技术表明大鼠肝细胞核仁纤维中心(FC)是电子透明区,数量较多,形状不规则。密集纤维组分(DFC)是围绕FC的环状结构部分,电子密度很高。FC中的染色质存在着一个介于集缩和解集缩状态之间的变化过程。NAMA-Ur DNA特异染色技术表明核仁内rDNA呈分散性分布,主要分布于DFC中(包括FC)的边缘),同时观察到与核仁相随染色质相连的核仁内rDNA呈念珠状结构。  相似文献   
227.
DNA在生物界中,堪称生物大分子中最重要者,主宰一切生物体维持其生命的各种机能的正常运行及每个物种一代一代繁衍于世,其结构是相对稳定的.  相似文献   
228.
将单晶硅片硅烷化后,用戊二醛做醛基修饰,将5′端氨基修饰寡核苷酸探针片段通过醛-氨共价键结合在硅片上,然后用椭圆偏振光谱法对探针和不同序列样品的杂交反应进行了研究。结果表明该方法能在不对样品进行荧光标记的情况下直接研究杂交反应的效率,从而得知样品的序列信息。  相似文献   
229.
导入野生大豆DNA小麦后代的农艺性状研究   总被引:5,自引:0,他引:5  
用花粉管通道法将野生大豆总DNA导入小麦,获得了转基因小麦,其后代的农艺性状有较大的变化。田间实验分析了变异系小麦植株与对照植株在叶片的光合速率、蒸腾速率、叶面积及株高、穗粒、穗重等性状上的差异。t检验结果显示,变异系小麦在叶面性状及产量性状上的差异是显著的,外源DNA的导入改善了植物的农艺性状,并在后代中表达,为选育高产、优质的新小麦品种提供了依据。  相似文献   
230.
地域、审美、民族性格的不同,导致中西文化的巨大差异,从对“智慧”的不同审美倾向,揭示出两种文化的内在动因和文化的遗传。  相似文献   
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