植物NAD-IDH基因克隆及体外表达酶活力分析

植物NAD⁺-依赖型异柠檬酸脱氢酶(NAD-IDH)是一多功能酶. 以拟南芥生态型“Columbia gl1”及甘蓝型油菜三系“陕2A”, “陕2B”和“垦C1”的叶片为材料, 采用RT-PCR方法成功地从每种植物材料中分别克隆了3种NAD-IDH不同亚基基因. 同源性搜索发现, 来源于油菜的克隆基因是新基因. 将克隆基因的功能蛋白编码区整合到pMID1多克隆位点, 构建表达重组体, 均能在体外翻译系统中高效地表达出特异目的蛋白. 亚基0, 亚基1和亚基2基因转录本加入到含终浓度为36 μg/mL的二硫键异构酶的体外翻译系统, 体外表达产物中检测到NAD-IDH酶活力. 不同基因种类及转录本分子比的体外表达产物的酶比活力比较表明, NAD-IDH由3种亚基组成, 缺一不可, 缺少亚基0是致命的, 缺少亚基1或2中的任何一个对酶活力的损伤是严重的. 同时发现, 来源于陕2A和陕2B的亚基1基因转录本中存在碱基缺失现象, 从而发生移框突变或无义突变, 使突变亚基不表现正常亚基1功能, 导致油菜品系间叶片NAD-IDH酶比活力存在差异.     

从海带根中提取纯化褐藻硫酸多糖

海带根粉碎后，经过酶解，去除褐藻酸，得到酶解液；通过DE-41、DE-80离子交换柱层析，得到海带硫酸多糖(FGS)F1-F8的8种不同组分；再用Sepharose 2B凝胶柱层析纯化，获得层析纯F1-F8的FGS．我们初步测定了8种FGS的分子量、单糖组分及其摩尔比．FGS为一类含有鼠李糖、岩藻糖、木糖、甘露糖、半乳糖以及硫酸根的杂多糖．     

柑桔内生拮抗细菌的发酵液对油菜菌核病的田间防治效果

从柑桔健康组织中分离得到两株内生拮抗细菌"重桔1号"和"元石45",制成细菌悬浮液, 25℃恒温水浴振荡培养72h, 喷雾于接有油菜菌核病菌的油菜成株叶片上,以喷灭菌水为对照. 结果表明,喷有"重桔1号"和"元石45"两株细菌的发酵液的叶片菌核病菌病斑比对照叶片病斑扩展明显减小,与对照相比其病斑面积平均少扩大值分别为9.75cm2和10.62cm2 , 两株细菌的发酵液对油菜菌核病的绝对防治效果分别为19.5%和47.5%.     

高压静电场处理油菜种子的品质影响及模型探讨

研究了高压静电场处理种子在大田生长条件下的长期效应 .结果表明 ,较低电压的处理可提高硫甙含量显著降低含油量 ,而较高电压的处理可降低硫甙含量 ,极显著降低芥酸含量 .采用平面类脂双层模型分析外加高压静电场对植物细胞跨膜电位的影响 ,并探讨其微观机理 ,一定程度上可以解释相关的实验结果     

基于苯乙酮的肟醚-酰胺类化合物的合成及生物活性研究

合成了10个新型的肟醚-酰胺类化合物，所合成的新化合物经^1H NMR、元素分析和MS进行了结构确证．初步的生物活性测定表明新化合物普筛时Nb对黄瓜灰霉病菌，Ni对油菜菌核病菌及粘虫有100％的抑制活性。     

黄颡鱼头骨的研究

黄颡鱼头骨共有126块,无顶骨、后耳骨和下鳃盖骨,有续软骨存在.犁骨、前颌骨、齿骨上都具铺石状牙齿,上颌骨、腭骨不具齿而成棒状小骨支持触须.舌颌骨、方骨、中翼骨、外翼骨发育良好.前鳃盖骨失去鳃盖作用而参与悬器的形成.     

野燕麦花粉的人工萌发研究

花粉寿命通常较短,一般为几分钟到几个小时,这样就影响采集花粉和授精的机械化过程,降低劳动生产率.实验通过对野燕麦花粉的贮藏条件和萌发进行研究,从而解决了上述问题.     

香菇UGPase酶活性及转录表达水平对不同碳氮源的响应

【目的】尿苷二磷酸葡萄糖焦磷酸化酶 (UDP-glucose pyrophosphorylase,UGPase)是糖代谢途径中的关键酶,在生物体次生代谢产物合成过程中具有重要的作用,对其进行深入的研究,将有助于阐明糖代谢的分子机制。【方法】本实验以香菇新808为实验材料,设置不同的碳、氮源对香菇菌丝体进行液体发酵培养（25 °C,30天）,烘干菌丝体称取其生物量,利用苯酚-硫酸法测定菌丝体胞内多糖含量,通过荧光实时定量PCR检测不同碳氮源下菌丝体ugp基因的相对表达量,同时测定UGPase酶活性。【结果】结果表明,与普通PDA培养基比较,除以硝酸铵为氮源外,其余碳氮源均能提高香菇菌丝体生物量,其中以麦麸为碳源的生物量最大（0.63g）。以小分子糖（蔗糖、麦芽糖和甘露糖）为碳源、有机复合物（麦麸和黄豆芽）为氮源时,ugp基因表达量明显上调,UGPase酶活性更高,同时,其香菇菌丝胞内多糖的含量也更高。其中分别以蔗糖为碳源,以麦麸作为氮源时,ugp基因表达量、UGPase酶活性（分别为4043.80U/mg和3873U/mg）和菌丝胞内多糖含量（分别为3.60%和3.86%）最高,ugp基因表达量分别为对照组的8.19倍和6.52倍。【结论】香菇菌丝ugp基因转录表达水平、UGPase酶活性以及菌丝胞内多糖含量三者之间显示出较高的正相关性。小分子碳源（蔗糖、麦芽糖和甘露糖）、有机氮源（麦麸和黄豆芽）有助于香菇菌丝多糖的合成,其中蔗糖和麦麸可作为香菇液体发酵优势碳源和氮源。     

大孔树脂纯化天麻多糖的工艺研究

本研究以炮制的干天麻为原料,水提醇沉法提取多糖,大孔吸附树脂纯化,比较了八种大孔树脂(AB-8、D101、LX-17、D301、NKA-9、S-8、LSD-001、ADS-7)对天麻多糖静态吸附-解析效果,筛选出最佳纯化树脂,再研究最佳树脂纯化天麻多糖工艺参数.结果为:八种大孔吸附树脂中D101对天麻多糖的纯化效果最好.样品液浓度、温度、上样速度,洗脱用乙醇浓度、洗脱流速及洗脱体积等因素均对D101树脂吸附分离天麻多糖有影响.所得的最佳纯化工艺为:20℃是较适宜的吸附温度,上样速度1BV/h,上样浓度4mg/mL,进行吸附;吸附饱和平衡后,用解析液浓度60%乙醇,解析速率2BV/h,解析液体积3BV进行动态洗脱.通过该工艺天麻多糖的纯度提高到了65.7%,表明了大孔树脂D101对天麻多糖具有较好的纯化效果.     

不同干燥方法对鲍鱼营养成分的影响

为研究不同干燥方式对鲍鱼中营养成分的影响,采用自然晾晒、热风干燥和微波真空干燥的方式,研究干制鲍鱼中多糖、总糖、胶原蛋白以及氨基酸含量的变化情况。结果表明,自然晾晒的鲍鱼中多糖和总糖含量显著高于热风干燥及微波真空干燥,而胶原蛋白及氨基酸含量则显著低于其余2种干燥方法。其中胶原蛋白含量以微波真空干燥的方式最佳,但同热风干燥间相差不大;氨基酸含量以热风干燥方式最佳。综合整体实验结果,热风干燥及微波真空干燥优于自然晾晒,且有利于工业化生产加工。