高效液相色谱法检测红发夫酵母胞内虾青素

确定了红发夫酵母的破壁提取方法并采用高效液相色谱法定量地测定了红发夫酵母胞内虾青素的含量。试验得到的液相色谱条件为:色谱柱KromasilC18, 5μm, 250mm×4. 6mm;流动相为甲醇和乙腈,V甲醇∶V乙腈=9∶1;流速1. 4mL/min;检测波长478nm;柱温为室温。加标回收率为(98. 2~102. 8)00。     

优良啤酒酵母菌株UN41的选育

以啤酒酵母(Saccharomyces cerevisiae) W作为出发菌株,用亚硝酸和紫外线连续诱变,在含双乙酰150 μg/mL(亚硝酸诱变)或200 μg/mL(紫外线诱变)的麦芽汁琼脂平板上分离抗双乙酰的菌株,通过三角瓶发酵筛选得到一株优良的啤酒酵母菌株UN41.该菌株在500 mL三角瓶装300 mL 12°Bx麦芽汁的培养基中,12℃下发酵8 d,发酵液的发酵度为65.0%;双乙酰、高级醇和乙醛的含量分别为0.076 8 mg/L、92.15 mg/L和9.33 mg/L,比出发菌株W的降低了37.6%、19.9%和27.6%.     

重组肠激酶在甲醇酵母中高效表达的培养条件研究

对重组肠激酶在甲醇酵母中高效表达的发酵条件进行了优化，并在BiofloⅢ发酵罐中实现了高密度培养和高效表达。结果表明；温度30C，培养基pH6．0，当酵母密度达到200A600mm以上时，加入无水甲醇，控制甲醇的流加体积，使其终体积分数为1．0％～3．O％，继续诱导培养72h左右，酵母菌密度可达到150g／L，重组肠激酶总活性可达58kIU／L发酵液。     

Inhibitory effect of the adenovirus type 5 E1A protein expressed in the yeast system of the human tumor cell growth

Adenovirus 5 type E1A as a tumor suppressor gene can inhibit tumor growth and enhance the censitivity of chemotherapy and radiotherapy.E1A have the ability to integrate into the host genome,resulting in long-time expres-sion that induces Rb gene inactivation and animal cells im-mortalization.This prompted us to select the E1A protein for treatment of cancer in order to overcome the limitations of E1A gene therapy.Thus,we firstly comstructed E1A eu-caryotic expression vector (pPIC9/E1A),transformated the pichia pastoris yeast cells(GS115) and screened the high-expressing recombinant strains.The positive yeast strains were cultured in the shake flask,and induced for 3d.The crude E1A protein was purified using two steps of col-umu chromatography on HiTrap Q and HiTrap SP.The pu-rified E1A protein was identified by SDS-PAGE and Western blot.E1A protein was mostly located at cellular unclear when Cheriot delivered E1A protein into cells.The analysis in vitro indicated that the E1A protein arrested LN686 cell cycle at G2/M phase,and significantly inhibited the growth of LN686 tumor cells.The current studies firstly provided an experimental basis to further develop E1A protein for tumor treatment.     

以啤酒洗槽废水为主料产朊圆酵母液体发酵的研究

以啤酒洗槽废水为主料通过单因素优选和正交试验法对产朊圆酵母进行液体发酵培养基的筛选与发酵条件的确定，经方差分析结果最佳培养基为2^oBe糖度的啤酒洗槽废水，豆饼粉0.5%,葡萄糖2％，MgSOr.7H2O0.05%,KH2PO40.1%。最佳发酵条件为时间18h，温度28℃，转数150r/min，装量100mL/250mL三角瓶，pH5.0。干菌体系累量为20.12g/L。     

番茄早疫病拮抗菌酵母的筛选

从几种果实表面附生微生物群中分离到120株酵母菌.通过平板筛选法(invitro),筛选出11株酵母菌对番茄早疫病(Alternariasolani)有拮抗作用.等体积混菌试验表明,11株酵母菌中有7株酵母菌,浓度为106、107和108CFU·ml-1时,能完全抑制105、104、103spores·ml-13种浓度的交链孢霉生长.通过果实接种试验法(invi vo)发现,酵母菌菌株L-1-6能够高度抑制3个品种番茄早疫病的发生,平均抑制率达到77.8%.     

重组人巨细胞病毒(HCMV)嵌合肽在毕赤酵母中的表达

目的：在巴期德毕赤酵母中表达人巨细胞病毒gp52C末端和pp150C末端串联片段的嵌合肽，方法：用SacI和BglⅡ分别酶切CMVp-pPIC9K重组质粒，电打孔法导入毕赤酵母GS115后，在缺组氨酸的MD板上筛选出转化子，然后根据甲醇利用快速型（Mut^ ）和甲醇利用缓慢型(Mut^s）菌株的不同生长特点，筛选出Mut^ 和Mut^s型转化子，用PCR法进一步鉴定阳性克隆，分别用甲醇诱导Mut^ 和Mut^s型转化子表达目的蛋白4d，取培养产物冻干浓缩，进行SDS-PAGE和Western blotting，筛选出能特异表达目的的蛋白的菌株，分析蛋白的含量及纯度。结果：重组人巨细胞病毒可在甲醇利用快速型毕赤酵母中有效表达，其表达量约占培养上清分泌蛋白的76.5%，结论：重组人巨细胞病毒（HCMV）嵌合肽可在真核细胞毕赤酵母中成功表达。     

酵母多糖对赤眼鳟非特异性免疫机能的影响

分别给赤眼鳟投喂4种不同酵母多糖含量的饲料(w(酵母多糖)分别为0、0．2％、0．5％、0.8％)36d。并在第12、24和36天检测超氧化物歧化酶(SOD)活性、溶菌酶活性、白细胞吞噬活性、红细胞的免疫功能，和第36天检测血清中补体C3水平。结果表明：饲料添加了0．5％和0.8％酵母多糖的饲料能显提高鱼类SOD酶活性．溶菌酶活性、补体C3水平、白细胞吞噬活性、红细胞的免疫功能，而添加了0．2％的酵母多糖饲料只能显提高溶菌酶活性。     

饵料及日采收率对蒙古裸腹溞培养效果的影响

~~饵料及日采收率对蒙古裸腹溞培养效果的影响@史海东$浙江海洋学院海洋与渔业研究所,浙江省海洋水产研究所!浙江舟山316100 @辛俭$浙江海洋学院海洋与渔业研究所,浙江省海洋水产研究所!浙江舟山316100 @王海岳$岱山县岱西镇人民政府!浙江岱山316200 @毛国民$浙江海洋学院海洋与渔业研究所,浙江省海洋水产研究所!浙江舟山316100 @姚海富$浙江海洋学院海洋与渔业研究所,浙江省海洋水产研究所!浙江舟山316100~~~~~~浙江省科技厅科研计划项目(021102111)…     

酵母细胞麦角固醇含量测定的研究

以石油醚取代正庚烷和乙醚作为萃取剂对麦角固醇含量进行了测定，并分析和比较了皂化，干细胞或湿细胞提取等条件对麦角固醇含量测定的影响，在此基础上，提出了一种快速测定发酵液中酵母麦角固醇含量的方法。