首页 | 本学科首页   官方微博 | 高级检索  
文章检索
  按 检索   检索词:      
出版年份:   被引次数:   他引次数: 提示:输入*表示无穷大
  收费全文   1237篇
  免费   52篇
  国内免费   106篇
系统科学   2篇
丛书文集   43篇
教育与普及   44篇
理论与方法论   16篇
综合类   1290篇
  2024年   2篇
  2023年   8篇
  2022年   17篇
  2021年   18篇
  2020年   18篇
  2019年   19篇
  2018年   19篇
  2017年   14篇
  2016年   15篇
  2015年   22篇
  2014年   49篇
  2013年   50篇
  2012年   59篇
  2011年   64篇
  2010年   47篇
  2009年   47篇
  2008年   92篇
  2007年   66篇
  2006年   57篇
  2005年   65篇
  2004年   66篇
  2003年   64篇
  2002年   65篇
  2001年   60篇
  2000年   49篇
  1999年   44篇
  1998年   44篇
  1997年   39篇
  1996年   33篇
  1995年   27篇
  1994年   28篇
  1993年   31篇
  1992年   23篇
  1991年   26篇
  1990年   23篇
  1989年   16篇
  1988年   7篇
  1987年   1篇
  1986年   1篇
排序方式: 共有1395条查询结果,搜索用时 15 毫秒
121.
甜蛋白Monellin在巴斯德毕赤氏酵母中的胞内表达   总被引:1,自引:0,他引:1  
将PCR扩增得到的Monellin基因片段插入Pichia pastoris胞内表达质粒Ppic3.5k‘,然后转入Pichia pastoris SMD 1168受体菌中,用G418筛选高拷贝菌株,并进一步对其进行PCR鉴定,获得的阳性克隆菌株经甲醇诱导60h,SDS-PAGE结果显示菌株破壁液中含有表达的Monellin,其大小约为11ku,并具有甜度。  相似文献   
122.
用限制酶将pSK-TTR质粒上TTR基因切下,分别插入分泌型载体pPIC9和pPIC9K,将重组的pPIC9K-TTR用BglⅡ酶切后,转化pichia pastoris GS115菌株,筛选获得G418高抗性转化子,转化子经摇瓶发酵,上清液用SDS-PAGE检测,有明显的rTTR表达,经DEAE-sepharose F.F.离子交换柱和Superdex75分子筛层析,得到蛋白线纯度大于95%的rTTR,经Western Boltting,分子质量和等电点测定等证明,毕赤氏酵母的表达rTTR与人血浆提取的TTR极为相似。  相似文献   
123.
对里氏木霉和酵母菌混合发酵秸杆提高其粗蛋白含量的发酵工艺进行了研究。结果表明其发酵最优工艺条件 :以尿素作为氮源 ,里氏木霉接种 2 4 h后接种假丝酵母 ,接种量比例为 1∶ 4 (酵母∶里氏木霉 ) ,于 p H3.0 ,30℃下培养 4 d。粗蛋白含量可达 30 .5 5 % ,粗纤维转化率可达 33.5 %。  相似文献   
124.
大豆异黄酮对油脂氧化抑制作用的研究   总被引:6,自引:0,他引:6  
研究了大豆异黄酮的抗氧化活性,通过对猪油油脂的POV值、TBA值的测定,发现大豆异黄酮对猪油油脂的自动氧化具有很好的抑制作用,同浓度的游离型大豆异黄酮的抑制作用比糖苷型强,接着分析了大豆异黄酮对猪油油脂自动氧化抑制作用的生物活性以及糖苷型与游离型的活性差异与其化学结构的关系。  相似文献   
125.
抗菌肽AD基因的改造及在毕赤酵母中的表达   总被引:14,自引:0,他引:14  
采用PCR技术改造抗菌肽AD基因,将其C末端改造为Asn编码,改造后的抗菌肽Cecropin AD基因克隆到pPICZα-A载体上,构建成酵母重组分泌型表达载体,转化毕赤酵母(Pichia pastoris)受体菌GS115中,采用zerocin抗性标记筛选重组转化子,经摇瓶发酵,浓缩发酵液进行酸性聚丙烯酰胺凝胶电泳分析和抑菌活性检测。结果表明,改造后的Cecropin AD基因在毕赤酵母中获得了表达,表达产物经α-Factor信号肽引导分泌到胞外,具有较强的杀菌活性。  相似文献   
126.
酵母是进行外源蛋白生产的很有吸引力的寄主。与原核系统不同,酵母具有真核亚细胞组织,能完成译后的各种折叠、加工和修饰过程,通过这些过程才能产生出“真实的”、有生物活性的哺乳动物蛋白。另外,它们还具有单细胞微生物的生长快速和遗传操作简便的优点。酵母表达工作的极大部分集中在已经充分研究过的酿酒酵母(Sacharomyes cerevisae)上。然而,随着DNA转化技术的发展,越来越多的非酿酒酵母正在成为生产重组多肽的宿主,其中包括:多形汉逊酵母(Hansenula polymorpha)、乳酸克鲁维酵母(Kluyveromyces lactis)、巴斯德毕赤酵母(Pichia pastoris)、粟酒裂殖酵母(Schizosaccharomyces pombe)、西方许旺酵母(Schwanniomyces Occidentalis)和解脂亚罗酵母(Yarrowia lipolytica)。本文将综述以上替代酿酒酵母的酵母表达系统的性能,并讨论其优缺点。  相似文献   
127.
借助化学合成的寡聚核苷酸接头将酵母PGK1启动子和α因子前导序列相连构建成一个αB干扰素基因的分泌表达载体YFD65.含质粒YFD65的酵母菌BJ1991能分泌表达αB干扰素,分泌到培养基中的αB干扰素的量为10~8U/L.  相似文献   
128.
测定酵母发酵液中核糖核酸和蛋白质的含量表明,在GYR培养基中的发酵液核糖核酸的蛋白质的含量比在GYP发酵液中的含量高,且随着培养天数的延长而逐渐增多,培养4d后,GYR中发酵液的核糖核酸和蛋白质含量分别是GYP含量的3.73倍和1.53倍,这说明两种不同培养基对酵母发酵液中的核糖核酸和蛋白质有明显的影响。  相似文献   
129.
克鲁维酵母(Kluveromycessp.)Y-85在菊粉提取液培养基中生长产菊粉酶,其细胞和胞外和炙粉酶活力分别约占菊粉酶总活力的76%和24%,试验中以酶发液酶液,该酶的S/I值为15.2酶液在50,55与60℃下保温1h,活力分别残留100%,96%和65%,在8℃下放置7d14d酶活力分别残留98%和96%,在pH3.6~7.0内,酶活性十发稳定,5mmolL-半胱氨酸和Fe^+2分别可使  相似文献   
130.
间歇发酵过程动力学模型参数估计的Fuzzy方法   总被引:1,自引:0,他引:1  
提出一种间歇发酵动力学参数估计的Fuzzy方法,并以锌酵母发酵过程为例,运用本文提出的方法,对动力学模型参数进行了估计,获得了满意的结果。  相似文献   
设为首页 | 免责声明 | 关于勤云 | 加入收藏

Copyright©北京勤云科技发展有限公司  京ICP备09084417号