人αB干扰素基因在PGK1启动子和α因子前导序列控制下在酵母中的表达和分泌

借助化学合成的寡聚核苷酸接头将酵母PGK1启动子和α因子前导序列相连构建成一个αB干扰素基因的分泌表达载体YFD65.含质粒YFD65的酵母菌BJ1991能分泌表达αB干扰素,分泌到培养基中的αB干扰素的量为10~8U/L.     

GYR和GYP对酵母发酵液中RNA和蛋白质的影响

测定酵母发酵液中核糖核酸和蛋白质的含量表明，在ＧＹＲ培养基中的发酵液核糖核酸的蛋白质的含量比在ＧＹＰ发酵液中的含量高，且随着培养天数的延长而逐渐增多，培养４ｄ后，ＧＹＲ中发酵液的核糖核酸和蛋白质含量分别是ＧＹＰ含量的３．７３倍和１．５３倍，这说明两种不同培养基对酵母发酵液中的核糖核酸和蛋白质有明显的影响。     

克鲁维酵母y—85菊粉酶水解菊粉的研究及其中试

克鲁维酵母（Ｋｌｕｖｅｒｏｍｙｃｅｓｓｐ．）Ｙ－８５在菊粉提取液培养基中生长产菊粉酶，其细胞和胞外和炙粉酶活力分别约占菊粉酶总活力的７６％和２４％，试验中以酶发液酶液，该酶的Ｓ／Ｉ值为１５．２酶液在５０，５５与６０℃下保温１ｈ，活力分别残留１００％，９６％和６５％，在８℃下放置７ｄ１４ｄ酶活力分别残留９８％和９６％，在ｐＨ３．６～７．０内，酶活性十发稳定，５ｍｍｏｌＬ－半胱氨酸和Ｆｅ＾＋２分别可使     

间歇发酵过程动力学模型参数估计的Fuzzy方法

提出一种间歇发酵动力学参数估计的Ｆｕｚｚｙ方法，并以锌酵母发酵过程为例，运用本文提出的方法，对动力学模型参数进行了估计，获得了满意的结果。     

固定化酵母制备枣酒的条件探讨

本文主要介绍在枣酒酿制中,利用固定化细胞技术,以海藻酸钙为包埋剂,通过添如吐温、甾醇、油酸、棕搁酸提高酵母活性,加快发酵速度,缩短发酵周期。如果胶粒再用明胶与戊二醛交联,可提高胶粒的机械强度,使细胞泄漏减少。连续使用五次,胶粒无开裂现象。     

用酵母双杂合系统筛选与人血小板生成素受体c-Mpl相互作用的蛋白质的初报

血小板生成素（ｔｈｒｏｍ ｂｏｐｏｉｅｔｉｎ, ＴＰＯ）是调节血小板生成最主要的细胞因子,其生物学效应由其受体ｃ－Ｍｐｌ介导．利用酵母双杂合系统（ｔｗ ｏ－ｈｙｂｒｉｄ ｓｙｓｔｅｍ ）筛选与ｃ－Ｍｐｌ相互作用的蛋白质因子,以Ｇａｌ４ ＢＤ融合ｃ－Ｍｐｌ膜内部分ｃＤＮＡ 的ｐＡＳＭＭ 为靶蛋白质粒,筛选了人胎盘ｃＤＮＡ 文库,分离到人波形纤维蛋白（ｖｉｍ ｅｎｔｉｎ）的部分编码序列,首次检测到波形纤维蛋白与ＴＰＯ 受体之间的相互作用,这提示细胞骨架蛋白可能在ＴＰＯ 的信号转导过程中起着重要的作用     

盐法分离低核酸酵母蛋白的机理研究

本文用荧光光谱法研究了不同盐对酵母蛋白质构象的影响,结果表明,盐是降低酵母蛋白分离物的核酸含量的原因之一。通过对盐除核酸过程进行热力学分折,对比离子对水结构和核蛋白稳定性的影响,否定了Damodaran提出的疏水作用机理,证明在维持核蛋白稳定的次级键中,氢键的作用是最主要的;核蛋白的解离并非盐通过改变溶剂的结构而间接作用于核蛋白所致,而应归因于盐与核蛋白的直接作用,特别是盐与核蛋白分子主链的作用。     

Characteristics of the binding features of Nelin with F-actin and screening Nelin interactive proteins

The interaction of nelin, a cardiac-specific expressed protein of human novel gene nelin, with F-actin was studied by both F-actin cosedimentation in vitro and colocalization assays. The results showed that nelin is a new F-actin binding protein and is colocolized with F-actin in cytoplasm of cells. Three new nelin binding proteins, filamin C subtype, titin N2B subtype and inter-alpha trypsin inhibitor heavy chain precursor (ITIH), were identified from human heart cDNA library using yeast two-hybrid screening. The binding activity of filamin C with nelin was confirmed by coimmunoprecipitation. Filamin C binds to nelin through its C-terminal region. It is indicated that nelin is a cytoskeleton associated protein and acts as a membrane-cytoskeleton associated protein involved in the formation of focal adhesions.     

芽孢杆菌植酸酶基因在毕赤酵母中的胞内表达

根据已知的枯草芽孢杆菌WHNB02植酸酶phyC基因全序列设计一对引物,采用PCR法从含有该基因的pUC18-phyC质粒上获得了长约1.1kb不含有信号肽序列的植酸酶phyC基因表达片段.经T载体克隆及序列测定后,构建毕赤巴斯德表达载体pPIC3.5K-phyC,并电转化毕赤巴斯德酵母宿主菌GS115.经MD和MM平板筛选、酶活性测定,获得了阳性转化子,并进行了诱导表达.SDS-PAGE分析表明:表达产物分子量为42.01KD,表达量占细胞可溶性总蛋白的24%,并具有植酸酶的生物学活性.酶学性质分析结果显示:胞内表达的植酸酶酶促反应最适pH值为7.5;最适反应温度为70℃;经90℃处理10min,残留酶活性42% 均优于出发菌株天然植酸酶的相应性质.     

β葡聚糖酶杂合基因bglHAM的克隆及在P.pastoris中的表达

采用PCR的方法,以Bacillus macerans总DNA为模板,构建出β-1,3-1,4葡聚糖酶杂合基因bglHAM,与巴斯德毕赤酵母表达载体pPIC9K重组,得到重组质粒pPIC9K-HAM,电脉冲转化法转化酵母菌GS115,KM71,在MM,MD平板上筛选表型,YPD-G418平板上筛选多拷贝重组子,重组菌株经甲醇诱导后,刚果红平板染色法检测到β-葡聚糖酶活性,SDS-PAGE证明表达产物的分子量约为24kD,摇瓶诱导培养筛选到的重组菌株,胞外每mL发酵液最高酶活达240U。