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171.
用一个含有锌指编码序列的人cDNA片段(L2 ̄9)作为探针杂交筛选人肝组织cDNA分子库,得到8个杂交阳性克隆,经测序和拼接后,将其整合为一条长1838bp和cDNA序列,该序列的221 ̄1642bp为一个完整的开放阅读框,编码了一个由473个氨基酸组成的蛋白质,1 ̄220bp为5′-UTR,1643 ̄1838bp为3′-UTR,在1801 ̄1806bp有一个加尾信号序列AATAAA,3′端为18 相似文献
172.
陈秀莉 《阴山学刊(自然科学版)》1999,(6):64-66
将人工合成的与苜蓿花叶病毒(ALMV)RNA2互补的寡核苷酸进行放射性同位素(γ-p^32ATP)标记,制备成探针。用ALMV攻毒转基因烟草和未转基因烟草,提取总RNA,用上述探针分析植珠体内病毒增殖情况,做抗病性分析。实验表明:转基因植珠(李颖同学做的转基因植株)有较强的抗病性,而未转基因的对照株却无抗病性。 相似文献
173.
从正常人外周血中性粒白细胞中提取总RNA,用RT-PCR的方法扩增人乳铁蛋白(hLF)cDNA,将其克隆到pMD18-T Simple载体上并测序.用限制性内切酶Xho Ⅰ和Hind Ⅲ将目的片段与逆转录病毒载体PLNCX2进行双酶切、并用T4连接酶进行连接;然后转化到top10菌中,再次进行DNA序列测定.前后两次序列测定结果一致,没有突变,全长为2,136bp,说明所克隆的为hLF基因的cDNA序列;与GeneBank中登录的序列相比,同源性达99%以上. 相似文献
174.
为探讨结核分枝杆菌国际标准强毒株H37Rv株和卡介苗菌株(BCG)分别感染巨噬细胞,检测细胞内转铁蛋白受体和乳铁蛋白表达量并分析其时相性变化及意义。分别采用结核分枝杆菌H37Rv株和BCG菌株感染巨噬细胞RAW264.7细胞株,于感染后1、6、12、18、24h,应用ELISA技术检测巨噬细胞上清液中TfR和Lf的表达量;应用Western blot技术于上述时间点检测巨噬细胞内TfR的表达量。结果显示,ELISA和Western blot技术均证实感染模型组检测的TfR表达量均高于正常对照组,ELISA结果显示上清液中TfR表达量在感染12和18h差异最明显,具有统计学意义(P<0.05)。Western blot显示:于模型建成后1、6、18h、差异有统计学意义(P<0.05)。另外,ELISA证明感染可诱导巨噬细胞分泌较高水平的Lf,于感染后6、12、18、24h均高于正常对照组,且差异均具有统计学意义(P<0.05)。由此可知,结核分枝杆菌感染导致巨噬细胞内的TfR和Lf表达更高。 相似文献
175.
水稻甘油醛—3—磷酸脱氢酶cDNA结构分析和分子进化 总被引:1,自引:0,他引:1
甘油醛-3-磷酸脱氢酶(GAPDH)是糖代谢中的核心酶之一,首次完成了水稻中编码此酶CDNA1325bp的全顺序分析,它含有1014bp组成的完整的编码区,编码一个由337个氨基酸组成的肽链,与来源于其他77个牿上的GAPDH的同源性比较显示基因间核苷酸同源性高达70%,与美洲龙虾GAPDH三结构比较说明水稻GAPDH有高度保守性可形成相似的构象,并模建了水稻GAPDH的空间结构。此外,对17种不 相似文献
176.
应用Digoxigenin标记的cDNA探针检测香蕉束顶病毒 总被引:3,自引:0,他引:3
用非放射性的Digoxigenin标记的11-dUTP取代32P标记的dATP或dCTP,标记克隆的BBTVcDNA-10.5kbcDNA,制备成探针.通过核酸斑点杂交对粗提取的BBTV,BBTV-DNA,感染BBTV的香蕉植物的拟茎,球茎处的组织,新生叶片以及成熟后的叶片进行了检测.结果表明:BBTVcDNA-1cDNA探针特异性强,不与CMV—RNA、无毒香蕉组培苗提取的核酸发生杂交反应;仅与粗提BBTV、BBTV-DNA、BBTV侵染的香蕉组织的核酸提取物发生杂交反应.此探针灵敏度高,可检出含有BBTVcDNA-10.5kb的质粒DNA的最小量为10pg;测定感病香蕉植株的拟茎汁液的最高稀释度可达1∶128,相当于0.4mg病蕉组织中的病毒含量.测定同一病株不同部位的结果表明,BBTV在植物体内的分布不均匀,拟茎处组织中病毒含量最高,球茎处的组织以及新生叶片中的病毒含量次之,成熟后的叶片中的病毒含量最低 相似文献
177.
一种cDNA—5′末端的克隆方法 总被引:1,自引:0,他引:1
应用脱氧核糖核苷酸末端转移酶(TDT)在cDNA 5′末端加同聚物尾的方法,通过延长加尾时间,改变加尾步骤,大大加强了加尾效率,使得在cDNA末端快速扩增技术(RACE)中应用TDT加尾法进一步获得mRNA的5′端成为一种行之有效的方法。 相似文献
178.
Based on part of a known cDNA sequence of Suaeda Liaotungensis choline monooxygenase, the authors successfully cloned the 5′ cDNA end of Suaeda Lianotungensis choline monooxygenase using Inverse PCR RACE with a specially designed 5′-phosphated RT primer and two pairs of specific inverse PCR primers. Compared with the anchored PCR RACE, inverse PCR RACE has better specificity and higher amplification. 相似文献
179.
用RT-PCR方法,从人胎肝总RNA中扩增得到约1.1kb人TPO cDNA编码顺序,并进行分子克隆,将其中一个克隆(pTPO47)亚克隆到M13载体,测定全部DNA顺序。它的碱基顺序与已报道的顺序完全相同,有一个1059bp的开放阅读框架可编码353个氨基酸。pTPO47亚克隆到哺乳动物表达载体pCEP4,在哺乳动物293细胞系瞬时表达后,进行Northern杂交,结果显示有约1.4kb的转录产 相似文献
180.
ZHU Wuyang CHEN Shuiping QIN Chenggeng YU Man JIANG Tao DENG Yongqiang QIN Ede 《科学通报(英文版)》2006,51(17):2065-2071
Dengue (DEN) viruses, mosquito-borne pathogens of the Flavivirus genus, Flaviviridae family, are envel- oped RNA viruses that contain a single-stranded, posi- tive-sense, capped RNA genome of approximately 11 kb. Single polypeptide is co-translationlly pr… 相似文献