L－谷氨酰胺生产菌定向选育的初步研究

以天津短杆菌ＴＧ－８６６为出发菌株，利用亚硝基胍、硫酸二乙酯等常规诱变方法以及原生质体融合法最终筛选出一株谷氨酰胺生产菌ＧＭＮ－１８［ＭＳＯ~Ｒ＋８－ＡＧ~Ｒ＋ＳＧ~Ｒ＋（ＮＨ_４）_２ＳＯ_４~Ｒ］，在适宜条件下平均积累谷氨酰胺２７．３ｇ／Ｌ。     

白鱀豚某些组织中谷丙、谷草转氨酶的初步研究

本文对白鱀豚几种组织中的GPT和GOT活性及肝脏中此两种酶的一些性质进行了探讨。     

JAL1杂交瘤细胞的批量培养研究

研究了不同葡萄糖、谷氨酰胺浓度下JAL1细胞的生长、糖耗、乳酸及氨的生成、单抗合成等代谢过程及该株细胞的基本代谢规律，同时对该株细胞生长和单抗生产的动力学方面进行了研究，在细胞培养箱中，采用方瓶批量培养杂交瘤细胞，培养条件为pH7.0-7.5，温度37℃，5％CO2。实验表明，在不同浓度葡萄糖、谷氨酰胺的培养液中，细胞的活性细胞密度、总细胞密度、细胞活性上均有不同，相应地，对细胞的最大比生长速率、葡萄糖最大比消耗速率、乳酸最大比生成速率以及单抗最大比合成速率也有不同程度的影响。实验结果还表明，该株细胞的单抗分泌是属于负生长耦联型的。     

补充谷氨酰胺对运动小鼠谷氨酰胺代谢的观察

文章研究大强度长时间运动情况下,补充谷氨酰胺(Glutamine ,Gln)对血浆Gln、骨骼肌Gln合成酶和谷氨酰胺酶活性变化的影响,证明大强度运动时,经补充Gln能有效地提高血浆、骨骼肌Gln浓度,维持小鼠在运动中的Gln正常水平。     

谷氨酰胺对杂交瘤细胞生长代谢的影响

研究了不同浓度的谷氨酰胺对分泌抗小细胞肺癌单克隆抗体的2F7杂交瘤细胞生长、葡萄糖消耗、乳酸及氨的生成等代谢过程的影响。在细胞培养箱中,用含不同浓度谷氨酰胺的培养液培养2F7杂交瘤细胞,培养条件为pH 7.2～7.4,温度37℃,5%CO_2、95%空气。实验表明,适宜于2F7杂交瘤细胞生长的谷氨酰胺浓度为2.5 mmol/L,谷氨酰胺浓度与细胞的葡萄糖消耗呈反比,与乳酸生成浓度呈反比,与氨的生成浓度呈正比。     

重组枯草芽孢杆菌谷氨酰胺合成酶蛋白在改良M9培养基中的诱导表达

以重组枯草芽孢杆菌谷氨酰胺合成酶(L-谷氨酸:氨连接酶,Glutamine Synthetase, GS EC 6.3.1.2)蛋白表达宿主菌株BL21(DE3) (pET3C/谷氨酰胺合成酶)作为研究对象,借助SDS PAGE分析方法,对于用乳糖诱导由T7lac启动子控制的重组目的产物蛋白的各种基本参数进行了初步的研究.研究了最佳本底培养基、最佳碳源及其最佳添加比例、碳源与诱导物的最适组合,并探索了适用于改良型培养基的诱导参数.实验结果表明,对于重组目的产物蛋白,改良型M9培养基完全可以替代LB培养基;以甘油为碳源,可以避免葡萄糖对T7lac启动子的屏蔽作用.以乳糖为诱导物,目的蛋白的表达量、可溶性及酶活与以IPTG为诱导物基本接近.研究结果为酶法合成谷氨酰胺的工业化生产提供了一定的参考.     

铅胁迫对凤眼莲氮代谢关键酶的影响

该文研究了系列浓度Pb2+胁迫6h、6d、20d、60d对凤眼莲氮代谢关键酶活性的影响.结果表明:无论有无Pb2+污染存在,凤眼莲的根、叶的GS活性大于NADH-GOGAT活性,且GS活性和NADH-GOGAT活性均表现为叶＞根.6h、6d、20d的0.1～2 mmol·L-1 Pb2+胁迫均使根和叶的GS活性降低,但在Pb2+胁迫60 d后,随着凤眼莲新生组织的萌生,各处理浓度组的GS活性均出现不同程度的上升,凤眼莲叶片的GOGAT活性在Pb2+暴露60 d后极显著上升.     

光照、氮源对光敏核不育水稻生长的影响

报道不同光照强度，氮源对光敏核不育水稻生长量及叶片，根部GS活性的影响，研究表明：随着光照强度的增大，光敏核不育水稻根和叶的生长量，可溶性蛋白质的含量及GS活性均随之提高，这提示光照促进了其根和叶中编码GS的基因的表达，导致GS活性的提高，与此相似，氮源亦能促进光敏核不育水稻根和叶中可溶性蛋白质的合成及GS活性的提高，表明氮源同样具有促进其根和叶中编码GS的基因的表达的作用。     

E.coli酪氨酸转氨酶的纯化与非天然氨基酸的底物特异性检测

构建重组菌株E.coliBL21(DE3)转pET23a-tyrB,IPTG诱导其大量表达,然后依次通过盐析、离子交换层析、疏水层析、凝胶过滤层析获得纯酶,运用薄层层析技术(TLC)检测,结果表明纯化的TyrAT转氨酶对自身底物酪氨酸在37℃和50℃具有较高活性.分别加入非天然氨基酸L-正缬氨酸、L-新戊基甘氨酸、L-叔亮氨酸、D-正亮氨酸作为底物,检测到TyrAT转氨酶对L-叔亮氨酸在50℃下有活性,对D-正亮氨酸在37℃和50℃均有催化活性,且50℃下效果更好.     

高血脂合并脂肪肝患者应用他汀类药物肝脏安全问题观察

目的探讨他汀类药物在用于合并脂肪肝的高脂血症患者降脂治疗过程中对肝脏损害情况.方法选取我院门诊收治的286例合并单纯性脂肪肝的高脂血症患者做为研完对象,随机分成他汀类药物治疗组(144例)及对照组(142例),治疗后分别观察患者1、3、6个月后的血清谷丙转氨酶、转肽酶及胆红素等情况来评估肝功能,并于6个月后复查肝脏CT以计算肝/脾CT比值来评估脂肪肝严重程度。结果144例他汀治疗组患者中出现转氨酶>3倍正常值(ULN)的有1例.继续减量应用他汀类药物后,该例罻氨酶则明显下降.转氨酶轻度增高<3倍ULN的有8例.继续相同剂量应用他汀类药物后,转氨酶均降至正常.肝脏CT示肝/脾CT比值用药6个月后明显增大(P<0.05).142例对照组患者中出现转氨酶>3倍正常值(ULN)的为0例.转氨酶轻度增高<3倍ULN的为3例,继续观察,转氨酶均降至正常.肝脏CT示6个月后肝/脾CT比值无明显变化.结论常规剂量他汀类药物治疗合并脂肪肝的高脂血症时肝脏影响井不大,是比较安全的,并且,他对脂肪肝有一定的治疗作用,利于肝细胞内脂肪的消退.