甘蔗渣制备低聚木糖的工艺优化

甘蔗渣是一种常见的农业废弃物,对甘蔗渣制备低聚木糖的工艺进行优化,可为其高值化利用提供理论依据。本研究以甘蔗渣为原料,采用低浓度碱脱木质素-低强度酸水解-木聚糖酶酶解的工艺来制备低聚木糖,分别研究了碱处理浓度、碱处理温度和碱处理时间对木质素脱除率、木聚糖保留率的影响以及酸处理浓度、酸处理温度、酸处理时间对低聚木糖和木糖产率的影响,最后通过单因素试验结合响应面法对木聚糖酶酶解工艺进行优化。结果表明,低浓度碱脱木质素的处理参数为KOH溶液浓度0.3 mol/L、碱处理温度110℃和碱处理时间1.5 h,在此条件下木质素脱除率和木聚糖保留率分别达到57.8%和87.4%;低强度酸水解的处理参数为H₂SO₄溶液浓度0.1 mol/L、酸处理温度80℃和酸处理时间1 h,在此条件下的最优酶解工艺为酶用量22 U/g碱处理甘蔗渣(Alkali treated Sugarcane Bagasse, ASB)、酶解温度40.5℃、酶解时间4.3 h,得到的低聚木糖产量为12.66 g/L。本研究为甘蔗渣的高值化利用以及更好地制备低聚木糖提供了新思路和理论依据...     

酸性木聚糖酶交联酶聚集体的制备条件优化

交联酶聚集体法是一种新型的无载体酶固定化方法,为提高酸性木聚糖酶的稳定性,使用该法固定化微紫青霉产酸性木聚糖酶,制备无载体固定化木聚糖酶,并对其制备条件进行优化。结果表明,优选的制备条件为将质量浓度0.36mg/mL的酸性木聚糖酶粗酶液在冰水浴中经饱和质量分数为85%的硫酸铵沉淀30min后,于40℃,加入终体积分数为0.14%的戊二醛,交联4h可获得较高活性的交联酶聚集体,酶活保留率达42.2%。这有助于酸性木聚糖酶更好地在工业中应用。     

丹参法呢基焦磷酸合酶基因(SmFPPS1)的表达模式

克隆了丹参中萜类物质合成相关的法呢基焦磷酸合酶基因(farnesyl diphosphate synthase,SmFPPS1,HQ687768),并对其序列特征进行了分析,发现该基因编码产物含有异戊烯基转移酶的特征结构域定位于细胞质中.功能互补分析显示,SmFPPS1不具有牻牛儿基牻牛儿基焦磷酸合酶(geranylgeranyldiphosphate synthase,GGPPS)活性.实时荧光定量PCR分析结果显示,SmFPPS1在丹参生长的各个时期具有一定的组成性表达,在其花期的各器官中主要在花中表达,而且其表达受到茉莉酸甲酯(methyl jasmonate,MeJA)和真菌诱导子信号的诱导.     

锌离子与改性聚乙撑亚胺模拟酶的作用机制

研究了锌离子对嘴啶肟改性聚乙撑亚胺模拟酶催化酯水解性能的影响及作用机制。     

计算机分子模拟提高蛋白质热稳定性的研究

计算机分子模拟作为一种重要的研究手段在生物、医药、化学、材料、微电子等领域受到了广泛的关注.其不仅可以从分子水平研究系统的微观结构及其宏观性质,而且在某些极端条件下及实验设备非常昂贵时,能直接提供实验数据以供参考.文章以解淀粉芽孢杆菌核糖核酸酶Barnase为研究对象,研究其在高温下的结构特征和动力学行为,分析蛋白质体系内的相互作用,寻找提高该蛋白质热稳定性的因素.为研究提高蛋白质热稳定性提供了一种计算思路和方法,同时为设计新的能在高温下发挥作用的新型酶类提供理论依据.     

铅胁迫对凤眼莲氮代谢关键酶的影响

该文研究了系列浓度Pb2+胁迫6h、6d、20d、60d对凤眼莲氮代谢关键酶活性的影响.结果表明:无论有无Pb2+污染存在,凤眼莲的根、叶的GS活性大于NADH-GOGAT活性,且GS活性和NADH-GOGAT活性均表现为叶＞根.6h、6d、20d的0.1～2 mmol·L-1 Pb2+胁迫均使根和叶的GS活性降低,但在Pb2+胁迫60 d后,随着凤眼莲新生组织的萌生,各处理浓度组的GS活性均出现不同程度的上升,凤眼莲叶片的GOGAT活性在Pb2+暴露60 d后极显著上升.     

毛尖紫萼藓1-半胱氨酸过氧化物酶基因GpPER1的克隆、表达载体构建及序列分析

从本实验室已成功构建的毛尖紫萼藓干旱cDNA文库中获得一条与抗旱相关的基因,即1-半胱氨酸过氧化物酶(1-Cys peroxiredoxins)基因,简称GpPER1,GenBank登录号为GU989314,该基因全长1040bp,开放阅读框(ORF)为666 bp,编码221个氨基酸。根据GpPER1基因的开放阅读框设计特异性引物,通过RT-PCR技术扩增得到GpPER1基因片段,并成功构建了表达载体pRI 101-GpPER1,为进一步在分子水平上研究毛尖紫萼藓的耐旱机制,发现并利用植物的抗逆基因奠定了基础。     

HBP21抑制胰岛素诱导的PI3K/AKT 信号通路机制

磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B(PI3K/AKT)信号通路在肝细胞癌中处于异常激活的状态,并且促进癌症的发生发展.在肝细胞癌中,热休克蛋白HSP70结合蛋白21(Hsp70 binding protein 21,HBP21)处于低表达状态,过表达HBP21显著诱发癌细胞发生凋亡.利用qRT-PCR技术检测肝癌组织中HBP21的mRNA水平,发现癌组织中HBP21的mRNA水平要低于癌旁组织.用胰岛素处理肝癌细胞Huh7以激活细胞内PI3K/AKT信号通路,采用qRT-PCR技术和蛋白免疫印迹实验检测细胞内HBP21的转录和翻译水平,随着胰岛素处理时间的延长,HBP21的mRNA水平和蛋白水平都呈现下降趋势.在Huh7内过表达HBP21显著抑制胰岛素诱导的AKT和哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)的磷酸化;通过泛素化实验和蛋白免疫印迹实验发现,HBP21不影响AKT的K48及K63位泛素化及人第10号染色体缺失的磷酸酶及张力蛋白同源的基因(phosphatase and tensin homolog deleted on chromosome ten,PTEN)的蛋白水平.利用抑制剂LY294002处理Huh7细胞,确定HBP21作用于PI3K/AKT信号通路.进一步研究发现,HBP21不影响IRS1和IRS2的mRNA水平,而是抑制胰岛素受体β亚基(insulin receptor beta,IRβ)的磷酸化进而影响PI3K/AKT信号通路的活化.在Huh7细胞中,HBP21抑制肝癌细胞中异常活化的PI3K/AKT发挥着重要作用.HBP21在肝细胞癌中的缺失表达,以及其抑制PI3K/AKT信号通路使其有可能成为潜在治疗癌症的靶点.     

辣根过氧化物酶处理五氯酚过程的毒性特征

用酶的催化聚合作用来处理酚类及芳香胺类化合物的污染是近年来受到重视的新方法,但人们很少研究废水在这一处理过程中的毒性变化。采用辣根过氧化物酶和过氧化氢在ｐＨ值为４时处理含五氯酚的模拟废水,集中研究了该过程的发光菌毒性特性。结果表明,五氯酚溶液的毒性在处理后大为降低,总毒性可降低至起始毒性的１５％左右。处理过程的产物有少量溶解在水中,也构成一部分毒性。     

热敏相分离模拟酶催化荧光免疫分析法测定乙肝表面抗原

以聚Ｎ－ 异丙基丙烯酰胺（ＰＮＩＰ） 作为免疫反应载体, 以铁酞菁作为ＨＲＰ的新型模拟酶来标记抗人ＨＢｓＡｇ 抗体, 建立了基于热相分离技术的夹心型荧光免疫分析ＨＢｓＡｇ 的方法． ＨＢｓＡｇ浓度在２０ ～５０００ｎｇ／ｍＬ范围与体系的相对荧光强度呈良好线性关系． 检测限８ｎｇ／ｍＬ．