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141.
从短小芽孢杆菌(Bacillus pumilus)C-9中克隆得到葡聚糖内切酶基因,该基因包含1980 bp核苷酸,编码559个氨基酸,其N端有一个预测的29个氨基酸的信号肽序列;以YIp5质粒为骨架,构建rDNA介导的多拷贝整合载体,实现葡聚糖内切酶在酿酒酵母中的高效、稳定表达。与对照菌株相比,含有葡聚糖内切酶基因的重组酿酒酵母可以在以羧甲基纤维素为唯一碳源的培养基上生长。 相似文献
142.
摘要: 目的比较国产和进口两种胰蛋白酶对蛋白质的酶解效果,为后续蛋白质组学稳定研究提供依据。方法用超声破碎法提取羊肌肉组织总蛋白,经两种胰蛋白酶酶解后液相色谱串联质谱检测酶解肽段,将结果上传蛋白质序列数据库,利用质谱分析鉴定方法分析比较两种胰蛋白酶的酶解效果,并借助生物信息学工具对所得数据进行分析。结果两种胰蛋白酶酶解同种蛋白质样品产生的肽段长度86%以上均为6-18 个氨基酸,适用于质谱检测。酶解后肽段产生的质量国产胰蛋白酶优于进口胰蛋白酶,国产胰蛋白酶比进口胰酶酶解可多鉴定到19% 的蛋白质和34%的肽段。结论进口、国产的胰蛋白酶在酶解蛋白质方面均可用于质谱检测前蛋白质的酶解消化。但国产胰蛋白酶价格明显低于进口胰酶,更具应用优势。本研究为评价胰蛋白酶酶解效果提供了一种有效、全面的研究方法。 相似文献
143.
赤子爱胜蚓(Eisenia Foelide)纤维素酶的初步研究 总被引:1,自引:0,他引:1
将赤子爱胜蚓整体组织匀浆的抽提液,经Sephadex G-75凝胶过滤、DEAE-Sepharose CL-6B离子交换及在FPLC仪上用Mono Q柱分离,可以纯化到多种组分的纤维素酶,研究了它们的酶学性质,证明均为C_X酶。 相似文献
144.
克隆得到了调节雌雄激素平衡的大黄鱼cyp19a/b基因,cyp19a基因c DNA全长1805 bp(NCBI登录号:FJ800566),其中开放阅读框1557 bp,编码518个氨基酸;cyp19b基因c DNA全长2268 bp(NCBI登录号:FJ800567),其中开放阅读框1503 bp,编码500个氨基酸.荧光定量PCR分析显示cyp19a基因在性腺中有明显的表达,且在卵巢中的表达量极显著且高于精巢;在肌肉、脑、肝脏、肾脏、脾脏等组织器官中基本不表达.而cyp19b基因在脑、脾脏和肝脏中有较高表达,在性腺和其他器官中基本不表达. 相似文献
145.
斜带石斑鱼肝脂酶和脂蛋白脂酶基因克隆与序列分析 总被引:2,自引:0,他引:2
为从分子水平研究海水鱼类肝脂酶(hepatic lipase,HL)和脂蛋白脂酶(liportein lipase,LPL)基因在脂质代谢过程中的作用及其分子系统进化地位,采用RT-PCR及RACE法从斜带石斑鱼(Epinephelus coioides)肝脏克隆得到HL、LPL基因cDNA全序列.克隆获得斜带石斑鱼肝脏HL基因cDNA全长2 261 bp,其中5′非翻译区(5′-UTR)为186 bp,3′-UTR为590 bp,开放阅读框(ORF)为1 485 bp,编码494个氨基酸;LPL基因cDNA全长2 191 bp,其中5′-UTR为 144 bp,3′-UTR为 499 bp,ORF为1 548 bp,编码515个氨基酸.序列同源性分析表明,斜带石斑鱼HL、LPL基因与哺乳动物同源性均低于真骨鱼类罗非鱼、斑鳢和真鲷等,这与其亲缘远近关系相一致,表明HL、LPL在进化过程中都相对保守.构建系统发生树显示,斜带石斑鱼HL、LPL基因氨基酸序列与大口黑鲈、真鲷等共同占据进化树上独立的分枝,与较为原始的硬骨鱼类中华鲟在进化树上距离较远.本实验对斜带石斑鱼HL、LPL基因同源性、系统进化地位的研究,为进一步研究海水鱼类脂代谢调控机制,预防鱼类脂代谢疾病奠定了基础. 相似文献
146.
研究了6种中药枳壳乙醇提取物对酪氨酸酶活力的影响.结果表明:6种中药枳壳乙醇提取物对酪氨酸酶活力均有显的抑制作用,除了绿衣枳壳外,其它5种中药枳壳的提取物随着含量的增大,酶活力呈指数下降.测定导致酶活力下降50%的6种中药枳壳提取物含量(JC50)分别为:0.92mg/mL(绿衣枳壳)、0.96mg/mL(陕西枳壳)、1.30mg/mL(红河橙枳壳)、0.44mg/mL(湖南枳壳)、0.41mg/mL(四川枳壳)、和0.70mg/mL(江西枳壳),上述6种中药枳壳提取物对酪氨酸酶的抑制作用表现为可逆过程.抑制类型均为混合型,分别测定各种枳壳提取物对游离酶抑制抑制常数(K1)和酶-底物络合物抑制常数(Kis),并加以比较。 相似文献
147.
两种不同示踪剂用于蛋白质与抗原分子微阵列信号检测的对比研究 总被引:2,自引:0,他引:2
以氧化型琼脂糖凝胶膜为基片,制作蛋白质与抗原分子微阵列,建立了检测固相人IgG,游离IgG和自身抗体分子的免疫学测定模式,分别以辣根过氧化物酶-二氨基联苯胺一双氧水(HRPDAB-H2O2)和胶体金-硝酸银-对苯二酚2种示踪系统作为蛋白质与抗原分子微阵列信号显示剂,并对其作用的原理与特点进行讨论,检测结果发现基于胶体金的免疫金银染色法(IGSS)比固相酶免疫测定法(EIA)敏感,2种示踪系统对固相人IgG的最低检出量分别为0.05ng和0.5ng;而对血清游离IgG的最低检出量IGSS法比EIA法至少高出10倍,两法用于自身抗体的测定亦表现出较好的重复性,在14例HCV感染者中,自身抗体的总体检出率分别为38.6%和31.4%,结果具有显著的同步性,故同时辅以2种示踪剂并用于阵列芯片的联合测试,有助于提高自身抗体的总体检出水平。 相似文献
148.
渤海湾盆地辽河油田欢喜岭地区齐40块稠油油藏历经多年的蒸汽驱开发,其伴生气体中CO_2含量已上升至60%~90%。通过对该区块的油藏条件及开发前后的储层流体矿物分析,认为CO_2浓度的上升主要由于蒸汽驱开发导致油藏温度升高,储层流体和矿物发生化学反应结果,其中与CO_2形成有关的化学反应包括:稠油水裂解、硫酸盐热还原、矿物碳酸盐的分解与转化。室内模拟实验结果结合现场伴生气体的δ~(13)C_(CO_2)值(+1.7‰~+6.6‰)证实了CO_2主要来源为碳酸盐岩的分解。 相似文献
149.
利用红外光谱、化学吸附和激光表面反应技术研究了丁醇在SiO_2、γ-Al_2O_3和Fe_2O_3上的激光表面反应规律。结果表明:固体表面材料的红外特性及化学吸附能力、激光频率等是影响激光能量利用率的主要因素;丁醇在固体表面上的吸附态及受激吸附态分子内键与键间的能量传递是影响反应产物选择性的主要因素。根据实验结果,探讨了激光促进丁醇裂解反应过程的能量传递规律,提出了激光促进丁醇裂解表面反应机理。 相似文献
150.
甘薯类胡萝卜素合成酶基因pds全长cDNA的克隆 总被引:3,自引:0,他引:3
王飞 《安徽理工大学学报(自然科学版)》2007,27(1):55-58
根据双子叶植物类胡萝卜素合成结构基因氨基酸保守区域设计简并引物,扩增出甘薯编码类胡萝卜素合成关键酶PDS的基因(pds)cDNA中间片断。通过5'-RACE和3'-RACE技术进行cDNA末端的快速扩增,成功地克隆了pds的全长cDNA。序列分析表明,pds基因的全长cDNA序列长度为2128 bp,编码572个氨基酸,与其他植物的序列高度同源。 相似文献