SAFB1蛋白的表达纯化及其对乳腺癌细胞抑制作用的验证

利用RT-PCR方法从7721细胞系中分离野生型SAFB1基因,将该基因分别克隆入PET28a和pcDNA3.1载体来构建原核表达及真核表达载体.重组质粒经IPTG诱导表达后亲和层析纯化,用Western印迹实验验证蛋白表达的正确性.将SAFB1基因转入MCF7中,以RT-PCR的方法检测蛋白的表达,检测其对XOR基因的调控作用及做生长曲线验证其对乳腺癌细胞抑制作用.结果证实了SAFB1对乳腺癌细胞生长抑制作用非常明显,且对XOR基因的表达有一定的抑制作用.     

镍离子亲和层析介质的制备及其用于组氨酸标记蛋白质的纯化

以交联琼脂糖微球为基质,通过环氧氯丙烷活化,偶联亚胺二乙酸并螯合Ni2+,制备得到一种镍离子亲和层析介质.结果发现,在强碱条件下环氧活化率达到了38.0 μmol/mL,最终Ni2+配基密度达到了30.9 μmol/mL,偶联效率为81.3%.利用得到的镍离子亲和介质对基因工程大肠杆菌表达的组氨酸标记3-羟基丁酮还原酶进行了一步层析纯化,酶活回收率达到了58.8%,纯化倍数为2.1,蛋白纯度在85%左右,纯化效果与常用商品介质基本相当.     

抗人骨桥蛋白单克隆抗体制备及其特异性研究

利用RT-PCR技术克隆人骨桥蛋白(hOPN)基因,构建OPN原核表达质粒pET-32a(+)-hOPN,转化BL21菌株,经IPTG诱导表达重组人骨桥蛋白(rhOPN).以纯化的rhOPN为免疫原,免疫BABL/c小鼠,取其脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞NS1融合.通过有限稀释法进行克隆和间接ELISA筛选,获得抗人OPN蛋白单克隆抗体杂交瘤细胞株,以ELISA、Western blot对抗体特异性进行鉴定.通过竞争抑制试验对单克隆抗体识别抗原位点进行分析.结果共获得2株抗人OPN单克隆抗体,分别命名为8F1和2B5,亚型测定皆为IgG1.通过细胞侵袭抑制试验检测,2株抗人OPN mAb皆能很好地抑制细胞迁移.本研究成功获得了抗人骨桥蛋白的特异性单克隆抗体,为进一步研究OPN蛋白在自身免疫病和肿瘤中的功能提供了重要的工具.     

LTB融合禽流感病毒M2e基因在毕氏酵母中的表达

禽流感病毒一直是家禽和家畜健康养殖的巨大威胁,之前的研究表明,原核系统中表达的LTB和M2eHBc+融合基因的产物能有效诱导免疫动物对禽流感病毒M2e多肽产生特异性的粘膜免疫应答.酵母作为生物反应器应用于生物制品生产具有独特的优点.本研究构建了pPIC9K-LBM2eHBc+酵母表达载体并对酵母GS115进行了遗传转化,甲醇诱导表达结果表明LBM2eHBc+融合基因在酵母细胞中得到表达,表达出的融合蛋白能够被M2抗体识别.     

浅谈计算机网络安全遭遇攻击的手段及相应的对策

随着计算机网络技术的迅速发展,网络病毒、木马也大量增加,破坏力极强,对计算机网络的安全构成了很大的威胁,因此如何应对计算机网络安全成了当今社会关注的焦点。文章主要介绍计算机网络安全问题和一些恶意软件、病毒、木马等的攻击手段以及相应的对策。     

谈学生英语阅读能力的提高

我现在所任教的学生中,在每次英语测试后,都有学生问我：“陈老师,我平时非常刻苦,该掌握的知识我都掌握了,为什么每次测试都不能得高分？”针对该学生提出的问题,我对其试卷进行了分析。无论是听力部分,还是基础知识运用和书面表达都做得很好,丢分较少,而唯独阅读部分做得不好,15道阅读题,做错了8道题,很显然是阅读能力太差。     

多媒体环境下的语文阅读

语文新课程标准中有这样一个理念：“语文课程应拓宽语文学习和运用的领域,注重跨学科的学习和现代科技手段的运用,使学生在不同内容和方法的相互渗透和整合中开阔视野,提高学习效率。”在这样的理念指引下,我们尝试将多媒体技术整合于语文阅读教学中,通过一种全新的小学语文阅读多媒体教学策略,突破语文阅读教学的重难点,积极推动小学语文阅读教学的改革。     

多媒体在英语教学中的优点

一、多媒体教学的优点 单一的教学手段、呆板的教学形式、沉闷的课堂气氛,导致学生不能轻松地、牢固地掌握老师讲授的英语知识。在新课改的带动下,多媒体这种现代化新型的教学方式应运而生,给英语教学模式带来了一定的革新。多媒体教学具有集文字、图像、影像、声音及动画等多种信息的功能。对比传统的教学模式,它具有以下优点：     

作文与生活

叶圣陶先生说过：“作文这件事,离不开生活,生活充实到什么样的程度,才会做成什么样的文章。”学生亲身经历的事情,如参观、访问、实践活动等,他们感受最深刻,情感最丰富,兴趣最浓烈,最容易把自己的所见、所闻、所感真实地表露出来。作为小学语文教师,应该怎样引导学生留意生活,让生活走进作文,让学生“写自己想说的话”,“乐于书面表达生活内容,增强习作自信”,才能唤起学生对习作的兴趣。     

游戏在体育教学中的运用

体育游戏是指以身体练习为基本手段,以增强体质,娱乐身心,陶冶性情为目的的一种现代化游戏。在素质教育已经推广普及的今天,合理运用体育游戏则成为在体育教学中实施素质教育的重要手段之一,因为它具备了教学手段的个性化、生动化、高效化等特点。如果做一个比喻的话,体育教学与体育游戏的关系就像“飞”与“翅膀”的关系,运用好“翅膀”,才能“飞”得更高更远。下面笔者就体育游戏在体育教学中的运用原则、时机和选择及事项四个方面摭谈认识和看法。