Identification of proteinaceous binding media for the polychrome terracotta army of Emperor Qin Shihuang by MALDI-TOF-MS

A proteinaceous binding media for the polychrome terracotta army of Emperor Qin Shihuang has been identified using matrix-assisted laser desorption/ionization time-of-flight mass spectrometry(MALDI-TOF-MS).Methods for the preparation of the model samples and the elimination of interferences have been evaluated,as well as ageing processes.A method involving the complexation of EDTA in combination with dialysis was used to eliminate any interference in the polychrome layers taken from the historical samples.The model samples were aged by being buried in loess to replicate the ageing process of the historical samples as closely as possible.The optimum conditions for the extraction and subsequent enzymatic hydrolysis of the extracted protein were investigated.Under the optimized conditions,the‘‘peptide mass fingerprints’’of the proteinaceous binding media from the historical and model samples were determined by MALDITOF-MS.The results revealed that animal glue was used as the binding media for the polychrome layers of Emperor Qin Shihuang’s terracotta army.It also shows that animal glue used as binding media has a long history in China.     

番茄抗白粉病必需基因ShGSTU1原核表达条件优化

采用RT-PCR技术从番茄中扩增谷光甘肽转移酶基因ShGSTU1,构建该基因的原核表达载体pET28aShGSTU1和pET32a-ShGSTU1,并对重组质粒在大肠杆菌BL21(DE3)中表达条件进行优化,主要对诱导温度、诱导时间及诱导剂浓度进行分析.结果表明:重组蛋白在表达载体pET28a中的最佳表达条件为1mmol/L IPTG,37℃诱导4h;在表达载体pET32a中的最佳表达条件为1mmol/L IPTG,30℃诱导5h.     

具有激活RB蛋白生物活性小肽的研究

构建了慢病毒载体表达MP1多肽的RFP融合蛋白(RFP-MP1),并研究了它对人肺腺癌细胞株H1299和人骨髓瘤细胞株U2-OS增殖的影响.U2-OS和H1299细胞中RFPMP1的表达导致了RB在蛋白水平上的积累,使细胞生长受到抑制.此外,细胞流式结果发现RFP-MP1使细胞周期阻滞在G1期.进一步研究表明RFP-MP1能够阻滞RB对E2F活性的抑制.这些结果表明,11肽的MP1能够上调肿瘤细胞中RB蛋白的表达水平并且抑制其生长.     

二氯二茂钛在水相中的合成反应

文中研究了二氯二茂钛与多种化合物在水相中生成的配合物,并就合成反应的影响因素进行了论述。     

重组羧肽酶B在胰岛素原C肽制备工艺中的应用

用RT-PCR方法克隆了大鼠羧肽酶原B的cDNA编码序列,将其重组到原核表达质粒pT7-473中,并在大肠杆菌中以包涵体方式获得高表达。SDS-PAGE电泳及灰度扫描显示表达量达菌体总蛋白的35％,表达产物融合了表达质粒上的6His。在变性条件下,经Ni-NTA柱纯化,得到羧肽酶原B,在复性液中进行稀释复性后,胰蛋白酶切得具酶活性的羧肽酶B,然后经DEAE-FF分离纯化获得较纯的羧肽酶B(28．5mg／L),比活为13．5u／mg。用RP-HPLC分析胰蛋白酶 羧肽酶B酶解胰岛素原C肽三聚体的酶解产物,证明该重组的羧肽酶B可替代提取的羧肽酶B应用于胰岛素原C肽的制备工艺中。     

螯虾尾神经节光敏神经元反应的适应特性及信号通路检测

520nm光照诱发克氏原螯虾尾神经节光敏神经元反应,发现2min后出现明显适应现象。适应期间,用550nm检测光刺激引起的效应随适应发展逐渐减弱。胞外高［Mg²⁺]不抑制此光敏反应;高［Mg²⁺］、高［Ca²⁺］均显著增加适应速率;低［Na⁺］显著降低适应速率,但能被胞外高［Ca²⁺］所拮抗。检测光敏神经元的上行传入通路,未见通过下咽神经节,提示可能有中枢启动运动反射环路。统计239例成体螯虾光敏神经元反应检出率,提示在发育过程中存在作为光感受器的光敏及适应潜能的保留或消亡机制。     

血浆N末端脑利钠肽水平和心脏超声功能参数在评估临床心功能分级中的价值研究

目的探讨血浆N末端脑利钠肽(NT-proBNP)水平和心脏超声功能参数在评估临床心功能分级中的价值.方法选取慢性心力衰竭患者106例,入院次日清晨抽取患者空腹肘静脉血,采用酶联免疫法检测血浆NTproBNP水平,并对患者进行纽约心脏病协会(NYHA)心功能分级评定,之后进行心脏彩色多普勒超声检查.结果血浆NT-proBNP水平与心功能分级之间呈明显正相关(P0.01);左心室短轴缩短率、左心射血分数与心功能分级之间呈明显负相关(P0.01);左心室舒张末期内径、左心室收缩末期内径与心功能分级之间呈明显正相关(P0.01);不同心功能分级之间血浆NT-proBNP水平、各心脏超声功能参数均存在明显差异(P0.01);其中,心功能Ⅰ级和Ⅱ级,Ⅲ级和Ⅳ级之间差异均无统计学意义(P0.05),Ⅲ级与Ⅰ级、Ⅱ级,Ⅳ级与Ⅰ级、Ⅱ级之间差异均有显著统计学意义(P0.01);NT-proBNP联合心脏超声检查对不同心功能分级的诊断特异性和敏感性明显高于血浆NT-proBNP水平、心脏超声检查,差异具有统计学意义(P0.05).结论血浆NT-proBNP水平联合心脏超声功能参数能够客观准确地判断慢性心力衰竭患者的心功能情况,有助于指导临床对该类患者的治疗及判断预后.     

姬松茸子实体中活性肽的分离及其组成的初步研究

采用两次葡聚糖凝胶色谱法从姬松茸子实体提取的肽类物质初步分离获得肽,继而分析了所获得肽的氨基酸和分子量．结果表明,姬松茸子实体的活性肽含有丰富的氨基酸,是一种具有高F值(23．3)的寡肽,且其分子量在1500--30000u之间．     

心肌肽素在心肌细胞氧化应激中的作用

研究心肌肽素对过氧化氢所致心肌细胞氧应激模型中所起的作用。采用原代培养乳鼠心肌细胞,以200μmol/L过氧化氢作用2 h诱导心肌细胞造成氧化应激模型,细胞损伤前分别给予不同浓度的心肌肽素进行干预。使用RT-PCR检测Caspase-3表达变化,MTT比色法检测原代乳鼠心肌细胞的活力,黄嘌呤/黄嘌呤氧化酶法测定超氧化物歧化酶活性。过氧化氢组心肌细胞活力低于对照组,超氧化物歧化酶活性下降(P<0.05),caspase-3 mRNA表达升高;心肌肽素组细胞活力、超氧化物歧化酶活性高于过氧化氢组,而caspase-3 mRNA表达水平较过氧化氢组降低(P<0.05),不同浓度心肌肽素之间无明显差别(P>0.05)。心肌肽素对过氧化氢造成的心肌细胞损伤作用有抵抗作用且这种抵抗作用与其抑制凋亡作用有关。     

大豆肽酶解制备工艺研究

以大豆豆粕为反应底物,用复合蛋白酶将其进行水解,对反应条件（底物浓度、反应温度、pH值、反应时间、酶用量）等工艺参数进行了系统的研究分析,并总结大豆肽含量及大豆蛋白水解度与各影响因子之间的关系。研究结果表明：反应温度为50℃,pH值为6～8,底物浓度为25%,添加复合酶量为3 000 U/g,反应时间为24 h,在此条件下酶解液中肽得率最高为49.76%。提供一种复合酶酶解制备多肽的方法,以豆粕为原料,经单酶及多酶协同水解→纯化→超滤→浓缩→喷雾干燥或冷冻干燥,制成粉末状肽制品的方法。