活性氧对人体中与衰老相关物质的影响

研究了过硫酸按-TEMED体系产生的超氧负离子对健康人血液中几种生物活性物质的作用，结果表明，可以使细胞膜发生脂质过氧化作用，产生丙二醒（MDA），使生物膜造成损伤．同时使血液中超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH－PX）活性均有所降低．通过对CAT纯品的研究揭示出在血液中经SOD，的作用产生毒性更强的·OH，它是使生物膜破坏及各种酶活性降低的主要原因．     

迷向周期和方法在β-簪结构折褶模拟中的应用

采用新近提出的迷向周期和方法（IPS），结合自导Lang evin动态模拟，模拟研究9-余肽折褶成β-箨结构的情况，表明了该结构与NMR观察到的基本一致，而Ewald模拟由于是强烈的镜像相互作用会产生构型偏差，获得致密构型的几率增大，表明IPS方法更适合于周期边界条件的模拟。     

人胎颈交感节肽能神经元的免疫细胞化学的研究

取１６例２４～３２周龄的死亡人胎作材料，用免疫细胞化学方法，于光镜下观察到颈上神经节（简称颈上节）和星状神经节（简称星状节）中存在含血管活性肠肽（ＶＩＰ）神经元和纤维，含生长抑素（ＳＯＭ）神经元和纤雏以及含Ｐ物质（ＳＰ）纤维，但未发现含ＳＰ神经元。二节中的含ＶＩＰ神经元和含ＳＯＭ神经元形状多种，免疫反应染色深浅不等，颈上节以大、中型细胞为主，而星状节以中、小型细胞居多。上述神经元类型和分布未有明显的胎龄变化。结果揭示颈交感神经节中，含ＶＩＰ和含ＳＯＭ神经元在出生前已经发育。ＶＩＰ、ＳＯＭ和ＳＰ３种神经肽在胎儿期已作为神经传导物或神经调节物而发挥功能。     

vMIP-II肽在大肠杆菌中的双辅助子高效表达

目的 :构建病毒趋化因子 (vMIP -II)基因表达载体并在大肠杆菌中以辅助折叠和辅助阻遏方式高效表达vMIP -II重组肽 .方法 :用PCR法获得vMIP -II基因片断 ,将其插入表达载体pQE ,构建重组表达载体pEh -vMIP .表达载体、辅助折叠子和辅助阻遏子载体共转染大肠杆菌DH5α ,用酶切、DNA测序、PCR扩增鉴定阳性克隆 .结果 :阳性重组子在大肠杆菌细胞中经IPTG诱导可高效表达vMIP -II重组肽 ,蛋白电泳分析可观察到一相对分子质量与理论值相符 (约 8× 10 3)的诱导表达条带 ,其表达量约占菌体总蛋白的 2 0 % .分析表明 ,vMIP -II重组肽主要以可溶性形式表达 .结论 :用双辅助技术在大肠杆菌中高效表达较小相对分子质量vMIP -II的成功 ,为进一步研究vMIP -II的功能及应用奠定基础 ,也为同类小分子、易降解的肽类物提供基因工程表达方法     

酶介导肽键形成的最佳化

早在1898年,J.H.van't Hoff提出通过逆转质量作用,酶促肽合成应该是可能的.1938年,贝格曼(Bergman)和弗伦克尔康拉特(Fraenkel Conrat)首次用蛋白酶催化合成了所限定的肽.酶介导肽合成法与常规的方法相比有几项改进,如没有消旋作用、底     

亚临床甲状腺功能减退患者TSH与B型尿钠肽原水平的相关性研究——以天水市秦州区人民医院病案为例

目的:探讨亚临床甲状腺功能减退(甲减)患者血清促甲状腺激素(TSH)水平与B型利钠肽原水平的关系.方法:回顾分析本院心内科住院患者96例,空腹测定肝功、心肌酶谱、甲状腺功能和B型利钠肽原水平等指标,TT4、TT3、FT4、FT3浓度数值均在正常范围内.根据TSH水平在0.55TSH4.78 um/L范围为甲功正常组;以血清TSH浓度在TSH≥4.78 um/L范围为亚临床甲减为观察组,并进行统计比较和相关分析研究.结果:正常组和观察组在男女性中分别发病和血脂、心肌酶方面有显著性差异(P0.01);两组之间游离甲状腺素原(FT4)和B型尿钠肽水平之间有显著性差异(P0.05);正常组TSH水平与甲状腺功能和B型尿钠肽水平无相关性,观察组TSH水平与TT4、TT3、FT4之间呈负相关(相关系数,γ=-0.758,-0.637,-0.781,P=0.00);与B型尿钠肽水平也无相关性(相关系数,γ=0.005,P0.05).结论:亚甲减患者出现血脂、心肌酶和B型尿钠肽原的改变,并没有通过TSH甲状腺激素调节轴改变心功能指标B型尿钠肽原水平的高低.通过甲状腺激素水平来调节心肌代谢活动,未发现内分泌性腺轴对心脏内分泌的影响.     

基于支持向量机的多类凋亡蛋白亚细胞位置预测

基于支持向量机,以全部和局部氨基酸序列的n肽组分、序列的亲疏水性分布等五种特征提取方法构成特征向量表示蛋白质序列,对六类细胞凋亡蛋白的亚细胞位置进行预测.结果表明,基于氨基酸二肽组成成分构成的特征向量集(以符号DIPE表示)的预测结果高于其它四种特征向量集的预测结果,在Jackknife检验下,总预测成功率达到了89.3%;与现有的方法比较,发现对于Mitochondrial类凋亡蛋白,支持向量机方法有更好的预测效果.     

蛹虫草菌丝对罗氏沼虾免疫功能的影响

在罗氏沼虾饵料中添加w=1%、2%、3%蛹虫草菌丝能提高罗氏沼虾血清PO活力、肌肉SOD活力、 GSH-Px活力,并同时降低MDA含量.经嗜水气单胞菌攻毒后,实验组的免疫保护率也明显提高.结果证明,蛹虫草菌丝可提高罗氏沼虾的免疫能力,增强抗嗜水气单胞菌的能力.     

乳腺癌细胞靶向特异性多肽研究

通过噬菌体肽库技术, 研究能特异性结合并具有携带目的基因进入靶细胞能力的多肽. 以人乳腺癌细胞MDA-MB-231为靶细胞, 与pC89噬菌体肽库共培养筛选出能特异性进入靶细胞的小肽噬菌体. Subtilisin被用于灭活未进入细胞的噬菌体, 进入细胞的特异性小肽噬菌体经细胞裂解、转化E. coli XLI-Blue得到扩增. 经5轮反复共培养, 富集得到能特异性进入乳腺癌细胞的小肽噬菌体. 以RGD-integrin binding噬菌体为对照, 分别检测乳腺癌细胞特异性小肽噬菌体与MDA-MB-231、其他乳腺癌细胞株以及实体瘤细胞株的亲和性. 测序并合成无噬菌体外壳蛋白的特异性多肽(CASPSGALRSC)以标记FITC; 同时为了解氨基酸序列排列对特异性的影响, 合成了调整氨基酸序列排列次序的多肽(CGSLSRAPSAC), 并检测其与人乳腺癌细胞的特异性. 实验获得与MDA-MB-231细胞特异性结合的小肽噬菌体; 合成的无噬菌体外壳蛋白的多肽序列保持与MDA- MB-231细胞的特异性, 并且亲和性高于嵌合蛋白(RGD-integrin). 本研究建立了一种利用噬菌体肽库研究能结合或进入不同细胞的未知多肽的技术; 得到了一条能与MDA- MB-231高特异性结合的氨基酸多肽序列; 这种高特异性呈现氨基酸多肽序列高度依赖性; 该氨基酸多肽具有作为乳腺癌基因治疗高效靶向性载体的潜在临床应用价值.     

用于感染脓毒症治疗的鲎抗内毒素因子模拟肽新药的研发

脓毒症是临床上常见的危重病症,可引起脓毒性休克和多器官功能障碍综合征,是导致ICU病人死亡的主要原因之一.革兰氏阴性菌细胞外膜主要成分之一的脂多糖,也称为内毒素,是脓毒症全身性失控性炎症反应的关键启动因素.在迄命已发现的活性物质中,来源于海洋生物鲎的变形细胞中的LALF因其显著的抗菌及中和LPS活性受到广泛的关注;但不论是LALF全基因或功能区重组的表达产物,均具有明显的抗原性或溶血毒性,无法直接运用于临床.课题组经采用生物信息学手段对LALF功能区结构进行了计算机模拟、变构和修饰;在国家科技攻关项目和国家863计划课题等资助下,历经十余年研究.