脲酶高产菌的筛选和产酶条件的研究

从红壤稻田分离产胞外脲酶活性高的细菌、放线菌和真菌各20株.细菌、放线菌、真菌产脲酶活力的平均值分别为0.764,1.104,0.847μmol/min.产脲酶能力大小为:放线菌>真菌>细菌.我们研究了一株放线菌Dactylosprangiumaurantiacum产胞外脲酶的条件.结果表明:该菌产酶的最佳培养时间为42h;产酶的最佳培养温度为28℃;产酶的最佳起始pH为7;葡萄糖、鼠李糖和甘露糖等碳源对产酶有利;硝酸铵、氯化铵和硫酸铵对产酶有利;钙、镁等金属离子能促进产酶.     

构建基因工程菌生产1,3-丙二醇的研究进展

综述了近几年基因工程菌生产1,3-PD的研究成果,包括其关键酶、策略及基因工程菌生产1,3-PD的现状等,探讨了利用基因工程菌生产1,3-PD的发展前景．     

几丁质酶基因在转基因烟草中表达效率的检测

采用氨基葡萄糖法检测转基因烟草植株叶片几丁质酶活力,结果表明几丁质酶基因在转基因植株中酶活力增强,与β—1,3-葡聚糖酶基因的协同作用下酶活性最强,几丁质酶活力的测定对外源基因表达效率的检测是可行的．     

大鼠端脑神经元型一氧化氮合酶免疫阳性神经元的分布

目的 :观察大鼠端脑神经元型一氧化氮合酶 (nNOS)免疫阳性神经元的分布。方法 :ABC免疫细胞化学法显示大鼠端脑nNOS阳性神经元。结果 :nNOS阳性神经元呈棕褐色 ,胞体的形态多样化 ,呈梭形、三角形、圆形等多种形状 ,突起有一个或多个 ;阳性纤维呈棕色串珠状 ,个别脑区阳性纤维相互交织成网。端脑nNOS免疫阳性神经元主要分布于嗅结节 (包括海马回 )、梨状区 (包括梨状皮质和梨状核 )、斜角带、隔区、杏仁复合体、海马结构、尾壳核和苍白球 ,以及大脑皮质等各个部位 ,其中以大脑皮质、梨状区和斜角带、尾壳核等部位最为丰富。结论 :大鼠端脑内分布有丰富的nNOS阳性神经元 ,它们可能通过调节神经递质的分泌 ,参与脑的高级整合功能。     

β葡聚糖酶杂合基因bglHAM的克隆及在P.pastoris中的表达

采用PCR的方法,以Bacillus macerans总DNA为模板,构建出β-1,3-1,4葡聚糖酶杂合基因bglHAM,与巴斯德毕赤酵母表达载体pPIC9K重组,得到重组质粒pPIC9K-HAM,电脉冲转化法转化酵母菌GS115,KM71,在MM,MD平板上筛选表型,YPD-G418平板上筛选多拷贝重组子,重组菌株经甲醇诱导后,刚果红平板染色法检测到β-葡聚糖酶活性,SDS-PAGE证明表达产物的分子量约为24kD,摇瓶诱导培养筛选到的重组菌株,胞外每mL发酵液最高酶活达240U。     

喷雾法制备固定化酶载体--磁性聚丙烯腈微球

介绍了一种制备磁性聚丙烯腈微球的方法。将纳米磁粉均匀分散于聚丙烯腈的N,N-二甲基甲酰胺溶液中,用喷协和法制备了具有超顺磁性的聚丙烯腈微球,并对微球制备过程中的影响因素进行了综合考察。得到了粒度分布在1.0μm-1.5μm、磁含量约为15%的磁性聚丙烯腈微球,其最佳制备条件为：以N,N-二甲基甲酰胺为溶剂,CPAN=1g/L,T=180℃,n=30000r/min,V=2mL/s,Cmagnetic fluid=2g/L。     

诱导促进中国红豆杉细胞培养中紫杉烷的积累

通过甲苯莉酮酸酯（MJA）或二氢甲基苯莉酮酸酯（HMJA）的诱导,有效增强了中国红豆杉（Taxus chinensis）悬浮细胞培养中新型生理活性物质云南紫杉烷（taxuyunnanine C,Tc）的积累。在培养第7天添加500μmol/L MJA后,产物的胞内最大含量为每克干细胞含29.5ng Tc,但细胞生长受到明显抑制;在添加100μmol/LMJA时,Tc的总产量达最大,为300mg/L。紫杉烷生物合成途径中的关键酶紫杉二烯合成酶的活力在被诱导后也获得大幅度提高。     

分子伴侣GroEL对青霉素G酰化酶亚基折叠的影响

采用Tac启动子控制表达质粒,在不同的宿主细胞中表达了青霉素G酰化酶（PAC）,检测这些菌株所表达的PAC活性,分析细胞内分子伴侣GroEL含量,PAC翻译后加工为α,β亚基的状况,以及它们之间的关系,结果表明：质粒pKK-SP在不同宿主中表达时,翻译后加工状况有明显差异,单位质量细胞所表达的PAC活性与翻译后加工效率相关,且与细胞内分子伴侣GroEL在菌体总蛋白中含量正相关,同时也阐明了亚基的折叠成为翻译后加工过程的限制步骤,细胞内分子伴侣GroEL有助于PAC亚基的折叠和稳定。     

麦芽根中5′-磷酸二酯酶的制备及性质

从麦芽根中提取5′－磷酸二酯酶,酶活可达474U／mL。将所得酶液用于水解酵母核糖核酸,得到5′－CMP、UMP、GMP、AMP4种单核苷酸。最佳反应条件为：底物RNA浓度为0.01g/mL,每毫升底物的酶用量为30U,酶解温度70℃,pH7.0,时间2h,5′－核苷酸转化率达80％。     

水分亏缺下SA和6-BA对大花蕙兰的生理调控效应

在水分亏缺下以外源水杨酸SA和6-BA处理大花蕙兰叶片,研究外源激素对大花蕙兰水分生理特性的影响。对内源激素IAA、ZR、ABA和保护酶SOD,CAT活性以及MDA含量的测定结果表明,0.5～4.5mmol／L SA和2.5～4.5mmol／L的6-BA可使IAA含量增高。0.5～2.5mmol/L的SA和2.5～4.5mmol／L的6-BA均使ZR含量增高。0.5～4.5mmol／L的SA和6-BA均有抑制ABA含量的作用。0.5～4.5mmol／L的SA和2.5～4.5mmol／L的6-BA可提高SOD活性和CAT活性,降低MDA含量。2.5～4.5mmol／L的SA可提高净光合速率(Pt),增加水分利用效率(WUE),2.5mmol／L的6-BA也可提高WUE。